2019-2020学年高中生物 第一部分 微生物的利用 实验1 大肠杆菌的培养和分离知能演练轻巧夺冠 浙科版选修1

1、实验1大肠杆菌的培养和分离首先，选择题在关于大肠杆菌营养成分的叙述中，正确的是()a.碳源物质同时也可能是氮源b.所有的碳源都提供能量c.除水以外的无机物只提供无机盐d.无机氮源也能提供能量分析：选择a .作为碳源的物质也可以同时作为氮源，如碳酸氢铵和氨基酸，它们可以为微生物提供碳源和氮源；任何碳源都不能为大肠杆菌提供能量，如无机碳源；除水以外的无机物可能具有同时提供无机盐、碳源和氮源的多重功能；无机氮源可以为硝化细菌提供能量，但不能为大肠杆菌提供能量。在光照下，将细胞数相同的衣藻和大肠杆菌接种到仅含无机盐的培养基中，结果为(虚线和实线分别表示大肠杆菌和衣藻的生长曲线) ()分析：选择衣藻为低

2、等植物，通过与无机盐的光合作用合成有机物。大肠杆菌是一种异养生物，它本身不能产生有机物，但只能吸收现成的有机物，而且几乎不能在仅含无机盐的培养基上生长。培养基的制备需要灭菌和消毒技术，但是它们所消灭的微生物的种类和数量是不同的。下列哪一项可以正确表达灭菌结果和灭菌结果之间的关系()分析：选择b。消毒的目的是杀死物体表面或内部的一些微生物(不包括孢子和孢子)，而灭菌的目的是杀死物体内外的所有微生物，包括孢子和孢子。因此，一般来说，灭菌的结果应该包括消毒的结果，所以选择b。微生物在下列环境条件下能够正常生长和繁殖()a.缺乏生长素的无氮培养基中的嗜铬固氮菌b.人类表皮磨损部分的破伤风杆菌c.新配制

3、的植物矿物质营养液中的酵母d.无菌动物细胞培养液中的禽流感病毒分析：选择a .嗜铬固氮菌是一种自养固氮菌，能合成生长素以满足自身生长。破伤风杆菌是一种严格的厌氧菌，不能在表皮上生长。由于新配制的植物矿物质营养液中缺少有机物，酵母无法培养。禽流感病毒具有严格的细胞内寄生生命，因此不能在无菌动物细胞培养基中培养，而通常在活鸡胚细胞中培养。关于涂层分离方法，误差是()a.首先，对菌液进行一系列梯度稀释b .在琼脂固体培养基表面分别涂布不同稀释度的细菌溶液c.其核心是防止杂菌污染，保证培养液的纯度d.结果是在培养基的表面上形成了单个菌落分析：选择d。包被分离法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释

4、倍数的菌液包被在琼脂固体培养基表面进行培养。在具有高稀释率的细菌溶液中，聚集的微生物将分散到单个细菌中，从而在培养基表面上形成单个菌落。下面关于微生物培养和应用的说法是错误的()a.消毒不能杀死物体中的所有微生物b.样品中活菌的数量可以通过划线分离的方法进行计数c.标记分离和涂层分离通常用于微生物的接种d.微生物使用的培养基成分不同于植物组织培养使用的培养基成分分析：选择b。消毒是指杀死病原微生物的方法，但不一定杀死细菌孢子。应使用涂层分离法计数样品中的活菌数，但划线分离法不能。不同的物体需要不同的营养，所以培养基中添加的物质是不同的。最常见的微生物接种方法是条纹分离和涂层分离。下图显示了一些

5、操作步骤c .在步骤中沿多个方向划线，逐渐稀释接种物，培养后按单个菌落计数第四步，将培养皿放入恒温培养箱中培养，一段时间后获得x菌菌落答：乙排除培养基是否被杂菌污染的方法是()a .将未接种的培养基放在实验台上培养b .将未接种的培养基放在窗台上培养c .将未接种的培养基放入恒温箱中培养d .将接种后的培养基放入恒温箱中培养分析：选择c。消除杂菌污染的常用方法是将未接种的培养基放入培养箱中。以下关于微生物培养或纯化的说法是错误的()a.微生物在培养前应该消毒和接种b.培养基中溶解氧的变化会影响酵母的繁殖和代谢途径c.大肠杆菌的纯化和培养包括两个阶段：培养基的制备和大肠杆菌的纯化分离自养微生物的

6、方法是使用纤维素作为唯一碳源的培养基分析：选择d。在培养微生物之前，培养基应灭菌，通常是用高压蒸汽灭菌。接种前应注意冷却。当分离自养微生物时，空气中的co2可以用来代替向培养基中添加碳源。下列操作中，需要使用接种环的是()a.板划线操作b .梯度稀释操作c.涂层板操作d .换向板操作分析：选择a。划线操作需要接种环。涂布板操作的错误是()a.在酒精灯的火焰上燃烧涂抹器，直到它燃烧成红色b .在培养基表面滴少量菌液c、点燃火焰上沾有少量酒精的涂布机，冷却8-10秒后再次使用d、包衣时旋转培养皿，使包衣均匀答：答酵母培养基通常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，它会抑制微生物的生长，因为(

7、)a.碳源供应太充足b.葡萄糖不是酵母的原料c.改变酵母培养液的酸碱度d.细胞将经历质壁分离分析：选择d。当培养基中葡萄糖浓度增加时，培养液的渗透压也会增加，这将导致细胞浆壁分离。用涂层分离法计数样品中的活菌数，并将结果与实际值()进行比较a.高于实际值b.低于实际值c.与实际值相同d.它可能高于或低于实际值分析：选择b。用涂膜分离法计数活菌数时，由于一些细菌在培养过程中会死亡，许多细菌会聚集在一起，导致它们的菌落聚集在一起，只能算作一个，这将导致统计结果低于实际值。将准备好的培养基灭菌()a.燃烧灭菌b .高压蒸汽灭菌c.干热灭菌法分析：选择b。高压蒸汽通常用于对制备的培养基进行灭菌。一个研

8、究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。以下说法是正确的()a、将培养基装入培养皿中，灭菌b.改变划片角度后，划片前烧掉接种环c.接种的培养皿必须在光培养箱中培养d .在培养过程中每隔一周观察一次分析：选择b。培养基灭菌后分装于培养皿中；在改变划片角度前，先烧孕育环，冷却后从最后一次划片的末端开始划片；接种的培养皿应在培养箱中培养，通常每12小时或24小时观察一次。关于平板划线操作的陈述不正确()a.首次燃烧接种环，以避免培养物被可能存在于接种环上的微生物污染b.在每次划线之前，在最后一次划线之后，燃烧接种环以杀死接种环上的残余应变当在第二个区域标记时，接种物上的菌株分析：选择c。接种环第一

9、次被烧毁，以避免接种环上可能的微生物污染实验过程。在每次划线之前，在最后一次划线之后，燃烧接种环以杀死接种环上的残余菌株，从而防止污染接种过程。在第二个区域标记时，接种环上的菌株来自第一个接种区域。标记后焚烧接种环可以及时杀灭接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作人员，使实验过程更加安全。可以将一些物质加入培养微生物的培养基中，以分离所需的微生物。在以下选项中，前者是添加到培养基中的物质，而后者是可分离的微生物，其中正确的是()a.氢氧化钠和酵母b.盐酸和放线菌c.适量的青霉素和霉菌d.适量的曙红-亚甲蓝和大肠杆菌分析：选择c。氢氧化钠和盐酸是强碱和强酸，酵母和放线菌都不能生存。加入曙红-

10、亚甲蓝的培养基用于鉴定大肠杆菌，但不能分离大肠杆菌。适当的青霉素对原核生物有抑制作用，但对真核生物的生命活动没有影响。以下对发酵过程中灭菌的错误理解是()a.为了防止杂菌的污染b.细菌在接种前应该消毒c.培养基和发酵设备必须灭菌d.灭菌必须在接种前进行分析：选择b。在发酵过程中，要严格防止杂菌的污染，否则培养的微生物将无法正常生长。接种前，实验所需的培养基、器具和工具应灭菌，但菌种不能灭菌。广东省微生物菌种保藏中心的微生物有10000多种，其中大部分是自己“饲养”的，少数是进口的。以下关于“培养”细菌的说法是正确的()a.“阳”在词干中具有筛选、培养和保存的意义b.在培养基中加入青霉素可以筛选

11、出细菌c.在固体培养基上生长的单个菌落含有多种细菌d.各种细菌的保存在液体培养基中进行答：答金黄色葡萄球菌具有很强的致病性，常引起骨髓炎等。也可能导致食物中毒。以下实验后的错误方法是()a.燃烧接种环b.含细菌的培养基在倾倒前必须用高压蒸汽灭菌器灭菌c.含有细菌的培养基在倾倒前必须加热d.接种后，必须用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球擦拭分析：选用金黄色葡萄球菌有很强的致病性，所以操作时一定要安全。接种后，用肥皂洗手，并用75%酒精棉球擦拭，起到杀菌作用；燃烧接种环还可以杀死细菌，防止环境污染；高压蒸汽灭菌也能杀死培养基中的金黄色葡萄球菌。如果我们只加热有细菌的培养基，我们不能杀死所有的病原菌，

12、因为这种细菌有很强的耐高温能力，会污染环境。第二，非选择题根据所学内容回答问题：(1)在大肠杆菌培养过程中，除了营养条件外，还应考虑_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _和渗透压等条件。由于其体积小、结构简单、突变类型容易选择等特点。它经常被用作遗传研究的实验材料。(2)在微生物培养过程中，为防止杂菌污染，培养基和培养皿应_ _ _ _ _ _ _ _(填写“消毒”或“灭菌”)；操作员的手需要清洁和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _；静止空气中的细菌可以被紫外线杀死，原因是紫外线可以使蛋白质和_ _ _ _ _ _变性。(

13、3)如果用包被分离法计数活大肠杆菌的数量，为了使估计值更接近实际值，除了严格操作和多次重复外，还应保证待测样品的稀释度。(4)通常，获得的纯菌株也可以是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(6)如实验是以大肠杆菌进行的，则所用的培养基及其培养物必须用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

14、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _分析：(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、突变类型易选择、易培养、生命周期短等优点。在培养过程中，除了营养条件外，还应考虑温度、酸碱度和渗透压。(2)灭菌利用强大的物理和化学因素杀死物体内外的所有微生物，因此培养基和培养皿被灭菌。消毒使用温和的物理或化学方法，只杀死物体表面或内部的一些微生物。操作员的手需要清洗和消毒。紫外线可以使蛋白质变性，破坏脱氧核糖核酸的结构。(3)包被分离法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释倍数的菌液包被在固体培养基表面进行培养，并保证样品的稀

15、释比例合适。(4)获得的纯菌株也可以根据菌落特征如菌落形状和大小进行初步鉴定。(5)当培养大肠杆菌时，有必要在接种前检测培养基是否被污染。对于固体培养基，检测方法应该是将未接种的培养基在合适的温度下放置合适的时间，观察培养基上是否有菌落。(6)由于某些大肠杆菌会释放出一种强烈的毒素，这可能会对肠道造成严重的损害，所以用过的培养基及其培养物在丢弃之前必须进行消毒，以防止培养物的扩散。答：(1)温度和酸碱度易于培养，生命周期短(2)灭菌破坏了脱氧核糖核酸的结构(3)适当的比例(4)识别(或分类)(5)将未接种的培养基在合适的温度下放置合适的时间，以观察培养基上是否有菌落。(6)灭菌22.为了调查河

16、流的水质，一个研究小组测量了河流水样中的细菌含量，并进行细菌分离工作。回答以下问题：(1)团队使用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在包被和接种之前，随机取一些灭菌的空白平板，培养一段时间。这样做的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。然后，将1毫升水样稀释10

17、0倍，用涂布法将0.1毫升稀释液插入三个平板中；经过适当的培养，三个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此，可以得出结论，每升水样中的活菌数为_ _ _ _ _ _。(2)该小组使用平板标记法从水样中分离细菌。在操作过程中，接种环用_ _ _ _ _ _消毒。在第二次和随后的划线中，始终从最后一次划线的末端开始。这样做的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

18、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(3)在示意图a和b中，_ _ _ _ _ _ _ _代表通过稀释涂布平板法接种和培养后获得的结果。(4)将获得的菌株接种到液体培养基中并混合均匀，其中一些进行静态培养，而另一个进行振荡培养。结果表明，振荡培养的细菌比静态培养的细菌

19、生长速度快。原因如下：振荡培养可以增加_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _