细胞周期和DNA倍体流式细胞术分析.ppt

1、细胞周期和DNA倍体流式细胞术分析,细胞周期和DNA倍体分析的原理,1、正常细胞DNA含量稳定在2C水平,2、性细胞DNA含量为1C,3、处于增殖期至分裂期细胞由 2C增加至4C,4、凋亡细胞丢失DNA,含量2C,组织细胞经荧光染料(碘化丙啶，PI)染色，用流式细胞仪测定细胞DNA含量，可得到细胞周期三个时相(G0/G1、S和G2/M期)DNA含量（），反映细胞的增殖状态和非二倍体（异倍体）的DNA含量,Diploid: 100.00 % Dip G1: 99.11 % at 48.86 Dip G2: 0.65 % at 97.72 Dip S: 0.23 % G2/G1: 2.00 %CV

2、: 1.91 Aneuploid 1: 0.00 % An1 G1: % at An1 G2: % at An1 S: 0.00 % G2/G1: %CV: DI:,【重要参数】,DI（DNA指数, 判断倍体数）=（标本G0/G1期细胞峰的平均荧光道数）/（正常二倍体细胞G0/G1期细胞峰的平均荧光道数） PI(增殖指数, 表示细胞的增殖活性)（%）（S + G2M）/（G0/G1 + S + G2M）100% SPF(S期细胞比率, 表示细胞的增殖活性)（%）= S /（G0/G1 + S + G2M）100%,DNA非整倍体的出现可能是癌前病变发生早期癌变的一个重要标志 在病理形态学不能做

3、出诊断前可提供确切诊断信息 DNA非整倍体的交界瘤应按恶性对待 形态学表现良性的肿瘤出现非整倍体提示恶变可能 DNA指数可作为判断间叶组织肿瘤良恶性的辅助指标,【临床意义】,【诊断瘤细胞的标准】,发现DNA异倍体，诊断为肿瘤； 如无明显异倍体，但有一个突出的4倍体细胞峰和15%的S期细胞，并伴有G0/G1峰的CV9%，诊断为肿瘤； 如无明显异倍体，但G0/G1峰的CV增大，并伴有10% 15%的S期细胞和一个突出的4倍体峰，诊断为可疑瘤。,Diploid: 76.12 % Dip G1: 100.00 % at 48.52 Dip G2: 0.00 % at 97.05 Dip S: 0.00

4、 % G2/G1: 2.00 %CV: 4.03 Aneuploid 1: 23.88 % An1 G1: 88.84 % at 56.71 An1 G2: 3.50 % at 108.52 An1 S: 7.66 % G2/G1: 1.91 %CV: 10.36 DI: 1.17,【临床病例】,肺癌 胸水,Diploid: 78.08 % Dip G1: 94.16 % at 48.21 Dip G2: 0.00 % at 96.42 Dip S: 5.84 % G2/G1: 2.00 %CV: 7.39 Aneuploid 1: 21.92 % An1 G1: 98.51 % at 58.

5、45 An1 G2: 1.49 % at 106.57 An1 S: 0.00 % G2/G1: 1.82 %CV: 5.42 DI: 1.21,宫颈脱落细胞，TCT发现少量异常细胞,Diploid: 97.61 % Dip G1: 97.74 % at 49.78 Dip G2: 0.02 % at 99.57 Dip S: 2.25 % G2/G1: 2.00 %CV: 6.49 Aneuploid 1: 2.39 % An1 G1: 84.90 % at 75.79 An1 G2: 15.10 % at 109.99 An1 S: 0.00 % G2/G1: 1.45 %CV: 3.66 DI: 1.52,肺癌 胸水,Diploid: 100.00 % Dip G1: 55.08 % at 46.83 Dip G2: 15.67 % at 92.69 Dip S: 29.25 % G2/G1: 1.98 %CV: 7.02,增殖旺盛的肿瘤细胞株,【标本采集要求】,新鲜脱落细胞、瘤组织请置生理盐水等等渗液体中； 骨髓、血液、灌洗液、胸、腹水等可直接送检。,【具体