浙江大学生物化学实验甲 血清谷丙转氨酶测定(King氏法).ppt_第1页
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文档简介

1、血清谷丙转氨酶测定,1、原理 转氨作用：将-氨基酸的氨基通过酶促作用转移 到-酮基上，生成相应的酮酸与氨基酸的反应。催化这 一反应的酶称为转氨酶。 转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。在肝、心、 肾等组织中，谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT） 的活性均较高。在正常的新陈代谢过程中，血清内两种 酶维持一定水平的转氨酶活性（即正常值）。,血清谷丙转氨酶测定,当肝、心、肾等组织发生病变时，由于组织细胞肿 胀、坏死导致大量的酶释放到血流中，从而引起血清谷 丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶(GOT)活性显著升高。因 此测定这些酶的活性对某些疾病的临床诊断具有重要的 参考价值。 本试验用丙氨酸和-酮戊

2、二酸为底物(基质液成分) 经血清谷丙转氨酶作用生成谷氨酸及丙酮酸。丙酮酸与 2， 4-二硝基苯肼作用生成2，4-二硝基苯腙，此物在碱性 条件下呈棕红色。根据棕红色的深浅与同样处理的丙酮 酸标准液进行比较，即可计算出酶的活性。其反应过程 如下：,血清谷丙转氨酶测定,0,血清谷丙转氨酶测定,King氏法谷丙转氨酶活性单位：每毫升血清在37 与pH7.4的基质液作用60分钟，生成1umol丙酮酸为一个活 力单位。临床检验取血清量为0.1，报告数据以100ml血清 计算，因此实际侧得结果乘1000即可。 2、实验材料及试剂 实验材料：动物或人血清 实验试剂：丙酮酸标准液要求临用前配制；其它试 剂的配制见P188。 3、试验结果的处理,血清谷丙转氨酶测定,、标准曲线的制作 以表1中的A520为纵坐标，酶活性单位为横坐标，绘 制标准曲线。 、样品中转氨酶活性的计算 a、标准曲线测定法 根据样品管的A520（已减去空白管的）查标准曲线 ，即得每100ml血清中转氨酶的活性单位数。 b、标

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