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文档简介

1、(3)根据蛋白质的传记特性,分离传记电泳可根据支架分为薄膜传记电泳、凝胶传记电泳等。离子交换层分析法、离子交换机交换机等带电荷的蛋白质吸附在离子交换剂上后,根据吸附力大小顺序连续去除。(4)根据配体特异性分离,亲和层析方法:将配体分子共价与色谱柱的固定材料相结合,蛋白质混合物通过色谱柱时,目标蛋白与配体相结合,然后去除杂蛋白,用含有玻璃配体的洗涤剂代替目标蛋白。3蛋白质分子中氨基酸序列的测定,多肽链的分离(尿素,婴儿分离),二硫化键的破坏(甲酸氧化切割等),氨基酸成分分析(水合茛或Edman反应),N末端残基的鉴定(Sanger方法), 4-二硝基氟苯(DNFB)反应,与异硫氰酸酯(PITC)

2、反应蛋白的初级结构:肽、肽键、活性多肽和初级结构晶体蛋白的空间结构:二级结构单元(-螺旋,-折叠,-角蛋白分子量测定维持蛋白质空间结构的力量是什么?4、蛋白质结构和功能之间关系的简要说明?第二章核酸化学、核苷酸(Nucleicacid)是以核苷酸(nucleic acid)为基本构成单位的生物大分子,携带和传递遗传信息。脱氧核糖核酸(DNA)核糖核酸(RNA)核糖核酸(RNA),1869年,Miescher博士论文测量淋巴细胞蛋白质组成时,发现了在稀酸和盐溶液中不溶解的沉淀物,结果在所有细胞的核中发现了。第一,核酸研究的简要历史,1879年,Kossel经过10年的努力,发现核中有4个茄子组件

3、: A,T,C,g。1889年,Altman提出将核变成“核酸”,他已经意识到它是“核”牙齿“核酸”和蛋白质的复合体。1909年Levene发现酵母的核酸中含有核糖。1930年,Levene发现动物细胞的核酸含有特殊的核糖,即脱氧核糖,错误的概念:植物核酸含有核糖,动物核酸含有脱氧核糖。牙齿错误的概念一直持续到1938年,这时才清楚地知道RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸-核糖-磷酸”的骨架结构,解决了DNA分子的线性问题,并在1935年主张牙齿四茄子核苷酸的聚合物是构成核酸的基本单位。1944年,Avery于1928年恢复了Griffith的细菌转化实验,证明DNA是遗传

4、物质。1952年Hershey Chase的噬菌体感染实验进一步证明了DNA是遗传物质。1950 Chargaff,E和Hotchkiss,R.D使用纸色谱详细分析DNA的组成部分,结果根据A=T,G=C,A G=C T 1953年Watson,Crick牙齿DNA,几周后,1957年,Meselson Stahl用密度梯度草原深度法证明了半保存复制假说。1958年,Kornberg收到了纯度很高的DNA聚合酶(DNA聚合酶),牙齿酶需要模板DNA。1960年,Cairns拍摄了正在复制的细菌DNA的全景照片。1970年发现了第一种DNA限制性内切酶。1972年建立了DNA重组技术。1978年

5、建立了DNA的双脱氧核糖核酸序列分析方法。1990年启动了人类基因组项目。1994年中国人类基因组项目宣布,2003年开始了人类基因组项目,完成了测序任务。二、核酸的分类和分布、功能、(脱氧核糖核酸,DNA)、(核糖核酸,RNA)、脱氧核糖核酸,核糖核酸,3.1核酸的分子组成RNA: D-核糖,有些是少量的D-2-O-甲基核糖DNA: D-2-脱氧核糖,核酸中核苷酸中戊糖的原子数变成了1,2,3。五碳糖的立体结构,3.1.2碱基(含氮碱),嘧啶和嘌呤环的每个原子编号都用当前国际上普遍使用的统一编号碱基的英文名称前三个字母表示。Ade、Gua、Cyt、Ura和Thy也可以用英文名字的第一个字母来

6、表示。但是两者之间的嘧啶碱不同。RNA主要含有细胞色素C和尿嘧啶U DNA,还含有细胞色素C和胸腺T(5-甲基尿嘧啶)、胺式移民异质性、碱基的相互变种异构性、细胞素、氨基、氨基、氨基、睾酮、睾酮、睾酮等。一些核酸有少量其他修饰碱,也称为微量碱或稀有碱。碱在细胞中经过多种修改后,其产物经常起到信号转导分子、营养因子、辅酶等作用,对核酸结构的稳定性起着重要作用。碱的结构特征,嘌呤碱,吡啶碱分子都含有共轭双键体系,被紫外线吸收(260 nm左右)。3.1.3核苷,糖和碱之间的C-N键,称为C-N糖苷键。核苷,戊糖和含氮碱生成的糖苷。核糖1碳原子通常与嘌呤碱中的9氮原子或嘧啶碱中的一阶氮原子连接,而西

7、斯、反核苷、反核苷、核苷、核苷通常用单个字符符号表示:A,G,U,C核苷在单个字符符号之前是小写D:D:dC,3.1.4核苷酸(ribonucleotide),(1)核苷酸的结构和功能,核苷酸和磷酸二磷酸二酯结合在一起,核苷酸是核苷酸的磷酸酯,核苷酸的核糖是三个自由羟基2-,3-,例如,如果5-腺苷酸Cp是2-磷酸酯,则pA应表示为:2-鸟苷酸,体内腺苷酸AMP能与1分子磷酸结合产生2磷酸腺苷,各种核苷酸三磷酸(ATP,GTP,CTP,UTP)是体内RNA合成的直接材料。各种脱氧核糖三磷酸(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)是体内DNA合成的直接材料。核三磷酸化合物对生物体的能量代谢有重

8、要作用。UTP是糖的转化和合成CTP参与磷脂的合成GTP的蛋白质合成,ATP的性质,ATP分子的最显着特征是含有两个高能磷酸键。ATP水解,能释放很多自由能。ATP是生物体内最重要的能量转换中间体。ATP水解释放的能量用于促进生物体的各种能量需求生化反应。ATP也是很好的磷酸化剂。磷酸化反应的基质可以是一般有机分子,也可以是酶。磷酸化基质分子具有高能量(活化分子),是许多生化反应的活化阶段。环化核苷酸cAMP和cGMP,cAMP(3,5-环化腺苷酸)和cGMP(3,5-环化鸟苷酸)的主要功能是细胞的第二信使。CAMP和cGMP的环磷酯键是高能结合。PH7.4,cAMP和cGMP的水解能量约为4

9、3.9 KJ/mol,远远高于ATP水解。3,5-循环腺苷酸,3,5-循环鸟苷酸,腺苷酸是部分辅酶的结构成分,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(辅酶),烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(辅酶),(1)核苷酸的性质,(,可以利用碱紫外线吸收的差异鉴定各种核苷酸。当pH在第一磷酸基和碱环解曲线的交点时,两个茄子解度相同,第二磷酸基还没有解。牙齿pH是牙齿核苷酸的等电点。当pH值小于等电点时,整个核苷酸带正电荷,当pH值大于等电点时,整个核苷酸带负电荷,3.2核酸的一级结构,DNA和RNA都带无分支的多核苷酸长链,链中每个核苷酸的3-羟基相邻的核苷酸otid的5-otid,结束:5段,3个团体方向:5段,3段链:碱基链:由相排列的戊糖和磷酸组成的1,核苷酸连接方法:3,5磷酸二酯连接,2,核酸的基本结构形式:核苷酸链,初级结构,戊糖和磷酸不断重复,因此也可以用碱基序列表示核酸的初级结构。一级结构的书写:P表示磷酸基团,位于核苷酸符号的左侧,表示磷酸和糖环的5-羟基结合,右侧表示核酸酶的水解

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