2018届高三生物二轮专题复习 专题十 生物技术实践 考点1 微生物的利用与酶的应用学案(新人教版)

1、专题10生命技术实践试验点1微生物的利用和酶的应用。1.大肠杆菌的培养和分离(试验)。以尿素为氮源的微生物分离(试验)。果汁中的果胶和果胶酶(试验)。4.-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测(视觉实验)。5.果酒和果醋的制作(视觉试验)。泡菜腌制和亚硝酸盐的测定(试验)。植物组织培养(试验)。试验点1微生物利用及酶学应用1.微生物利用的对错判断(1)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后，培养皿应放在照明培养箱中培养()从属营养微生物表明不需要光。(2)消毒的原则是杀死材料表面的微生物，同时减少消毒剂对细胞的危害(3)在下图中，甲是下划线分隔法中最重要的部分，乙是操作的结果。每划一条线，

2、都要烧接种环。每个虚线的起点(第一个虚线除外)是第一个虚线的终点()提示虚线分隔时，每个虚线的起点(第一个虚线除外)不是第一个虚线，而是最后一个虚线的终点。(4)筛选可降解尿素的细菌的培养基中，唯一的氮源(5)能分解尿素的细菌，在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，从而降低培养基的酸性()提示徽章的ph值必须高。2.酶应用的对与错判断(1)在果胶生产中使用果胶酶，可以提高果肉的果汁率，提高果汁的清晰度。()(2)酶的活性受温度、pH、酶用量等因素的影响()提示酶的数量对酶的活性没有影响。(3)果胶具有将植物细胞捆绑在一起的作用，可溶于乙醇()提示果胶不能溶于乙醇。(4)固定化-淀粉酶进行淀粉水解实

3、验时不考虑温度()提示温度对酶活性的影响。(5)固定化-淀粉酶可以永久使用()这表明固定化酶可以持续使用，但不能永久使用。(6) -淀粉酶固定化实验结束后，将固定化柱放在常温下即可()固定化柱提示必须低温保存。一、微生物分离两种茄子常用方法的比较项目底线分隔法涂布分离法工作原理连续下划线。下划线后，线端细菌的数量比线的开始部分少，因此每次从最后下划线结束开始，细菌数量就会增加，逐渐减少，最终得到单个细菌繁殖的菌群将菌液进行一系列梯度稀释，然后将稀释度不同的菌液分别涂在琼脂固体培养基的表面进行培养。在稀释度足够高的菌液中，聚集在一起的微生物可以分散成单个细胞，在培养皿盘子表面形成单个菌群操作工具

4、接种环玻璃刮刀使用要求用的时候要坐车放在70%的酒精里，需要的时候烧吧分离特征操作简单，不容易分离，得到单细胞。操作复杂，容易分离，得到单菌落分离结果(图标)相同点将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，在培养基表面形成单个菌落，使菌种得到净化错误警告虚线分离操作注意事项(1)第一条下划线，每次下划线之前，最后一条下划线之后都需要烧焦的接种环。(2)燃烧接种环并冷却后，才加入菌液，温度太高，避免杀死菌种。(3)虚线时，不要将最后一个区域与第一个区域连接。(4)划线力的大小要适中，不要让力太大，培养基撕裂。二、大肠杆菌培养和分离工作1.原理(1)接种于LB液体培养基，快速分裂增殖。(2)通过下划线分

5、离法或涂布分离法将要检查的微生物样品接种到LB固体培养基上，样品中的每个细胞或孢子就会生长，形成单个菌落。2.过程第三，以尿素为氮源的微生物的分离1.实验原理(1)筛选以乙醚为氮源的微生物，使用以乙醚为唯一氮源的选择性培养基进行培养。(2)一些细菌合成的脲酶可以分解尿素，用作其生长的氮源。(3)细菌合成脲酶将尿素分解为氨，提高培养基的碱性，提高pH值，使添加酚红指示剂的培养基发红。2.程序四、酶的应用果胶和果胶酶果胶的两种茄子说明：(1)果胶的作用：粘附细胞；(2)果胶的鉴别方法：果胶不能溶于乙醇，液滴中沉淀95%的乙醇。探讨酶活性的最佳条件和量的实验设计。(1)影响果胶酶活性因素的实验分析实

6、验原则：遵循单变量原则、对比原则，严格控制变量，尽量减少无关变量的影响。实验原理：果胶酶活性受温度、pH或酶抑制剂的影响，最佳温度或pH时活性最高，果肉的汁液排出率，果汁的清晰度与果胶酶活性大小呈正相关。(2)三次实验的变量分析实验名称(目的)收购参数变量注意事项果胶酶的温度探索活性的影响温度果汁量(清晰度)气质和酶的混合温度相同温度梯度越小，实验结果越准确。苹果泥和果胶酶的量在每个试管中必须相同pH必须是最佳pH果胶酶的pH值探索活性的影响PH果汁量(清晰度)温度应该是最佳温度pH梯度可由NaOH和盐酸控制。用玻璃棒搅拌，使反应充分进行探讨果胶酶的含量。果胶酶的量果汁量(清晰度)在准备苹果均

7、质化后，迅速加热，使苹果均质液中的果胶酶变性温度、pH最合适，不应改变。固定化酶的生产原理和方法4.固定化和淀粉水解检测-淀粉酶在容易错误警告的实验过程中，两次洗涤的目的。-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验过程中，固定化酶柱的洗涤两次相关。目的在第一次固定-淀粉酶时，冲洗未吸附的玻璃-淀粉酶。第二次洗涤是对实验结束时没有反应的淀粉和产物的洗涤，目的是为了下一次固定化酶柱的持续使用而去除牙齿物质。在两次洗涤过程中，均使用10倍柱体积的蒸馏水洗涤固定化酶柱。疑问型微生物的培养和分离1.(2016江苏，25)漆酶属于木材分解酶类，广泛应用于环境修复、农业生产等领域。下图是分离、纯化和保存漆酶菌

8、株的过程。以下相关叙述正确(多重选取) ()A.生活水含有大量微生物，是分离产酶菌的首选样品。B.在选择性培养基中添加漆酶的气质，应通过菌落特征筛选出生产漆酶的菌落C.在涂层板上生长的菌落再画一条线，使其更加纯净D.倾斜培养基含有大量营养素，可以在室温下长期保存变种回答BC分析漆酶降解“树”、漆酶菌株存在于“树”丰富的地方，生活污水中含有大量微生物，但不一定包含漆酶产生菌。漆酶高产菌株可降解木质素，筛选培养基中添加木质素，筛选漆酶高产菌株，筛选时可通过菌落特性筛选漆酶高产菌落。在铜版板上生长的菌落再画线，使其更纯净。c是对的。倾斜培养基含有大量营养素，可以在低温下长期保存变种。d错误。2.下图

9、是“大肠杆菌培养和分离”实验的基本程序。请回答以下问题。A.准备培养基- B .灭菌- C .扩大培养(液体培养基)- D .下划线分离培养(固体培养基)- e .保存菌种(1)A过程除了在一般用途的细菌培养基(_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(2)D过程与C过程相比，培养基中添加的物质是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)D过程结束后，菌形成_ _ _ _

10、_ _ _ _(4)植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作，以下不适合蒸压()A.接种环和镊子B.三角病和光球病C.发芽培养基和根培养基D.用于培养的幼茎和芽答(1)LB液体渗透压前(2)琼脂4 C (3)(单)菌群清除污染杂菌(或纯化菌)(4)D分析(1)LB液体培养基是通用的细菌培养基，LB固体平面培养基用于下划线分离，形成单菌落。氯化钠的作用是维持培养基的渗透压。调整酸度后才能灭菌，灭菌后调整酸度会产生新的污染。(2)在液体培养基的基础上添加一定量的琼脂，可以形成固体培养基。菌种要保存在4冰箱里。(3)划线分离，一个菌体繁殖一个菌落。(4)高压蒸汽灭菌常用于培养基、培养器材等灭菌，培养用

11、幼茎和芽不能进行任何灭菌操作。否则细胞会死亡。问题2分离以乙醚为氮源的微生物。3.目前土壤中分离出以乙醚为氮源的细菌，实验过程如下。 请回答。(1)要分离土壤中可以分解尿素的细菌，请将土壤_ _ _ _ _ _ _ _(2)接种后，在37 的孵化器中培养Petri盘子_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。如果培养基中含有脲酶的细菌，则在该菌落周围_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)培养基成分上最重要的特征是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

12、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)下一步工作是在酒精灯火焰旁(多选) ()A.葡萄糖、琼脂糖等培养基成分B.倒置的平板C.涂层板D.微生物培养(5)与LB全营养培养基中的菌落数相比，尿素培养基中只有少数菌落的原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _答(1)无菌水320(2)反转的红环酚红指示剂(3)是尿素为唯一氮源的细菌，在(

13、4)BC (5)土壤中可利用尿素的细菌占土壤菌群中的极少数分析(1)涂布分离法首先要用无菌水稀释土壤样品一系列梯度，通常每盘20个以内的单体的那种稀释倍数最合适。(2)接种后，应将培养皿倒置，进行恒温培养。含有脲酶的细菌可以分解尿素，产生的氨使培养基呈碱性，使培养基中的酚红指示剂呈红色。(3)用来分离可利用尿素的细菌的培养基，要以尿素为唯一的氮源。(。(4)在微生物培养和分离的时候，逆板、导板都要在主灯火焰旁进行，防止杂菌污染。(5)元素培养基仅使用尿素作为氮源，元素培养基中生长的只是少数能够合成脲酶的细菌。4.为了获得能分泌脲酶的细菌菌种，一个生物兴趣小组的同学设计了以下培养和筛选方法。(1

14、)获得菌种：要获得更多能够分泌脲酶的细菌，请提取5-25厘米的浅土壤样品，以此种细菌的细胞呼吸方式在生态系统中_ _(2)将土壤样品放入无菌水中，制成悬浮液，准备如图所示的培养基。这里尿素在培养基中唯一能保证微生物生长的_ _ _ _ _ _ _ _ _培养基中添加尿素的方法是在其他成分的灭菌冷却后，提前_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _葡萄糖：0.05 gNacl: 0.24gK2hpo4: 0.24g琼脂糖：1.0 g酚红：0.5 g水：30毫升尿素：20米(包括2 g尿素)(3)使用酚红指示剂，可以检测细菌是否能分泌脲酶，这是尿素酶_ _ _ _ _ _ _

15、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(4)为了获得能分泌脲酶的单细胞，需要稀释土壤样品液，将少量稀释土壤液接种到培养基上，在培养基上培养时，需要将培养盘倒过来，原因是(5)为了从土壤中分离元素降解菌，采集和处理土壤样本，以下叙述是错误的()A.肥沃、湿润、动物粪便多的土壤中取样比较好B.采集的土壤必须经过高温灭菌，才能用于制作土壤稀释液C.准备土壤稀释液时，请使用无菌水。D.制造土壤稀释剂所用的各种仪器必须经过灭菌答(1)氧呼吸分解器(2)氮源G6玻璃砂漏斗固体培养基(3)将培养基中的尿素分解为NH3，提高周围pH，(4)防

16、止用掺杂分离法凝结的水滴从盘子盖子落到培养基上，从而产生污染(5)B分离使用乙醚作为氮源的微生物的注意事项(1)培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化(红)，显示尿素酶分解尿素的作用，证明牙齿菌株可以将尿素用作氮源。红色环区的大小表示脲酶活性的强弱和含量。红色面积越大，菌株利用尿素的能力越强。(2)在本实验中，准备固体培养基时，应使用琼脂糖，将琼脂作为絮凝剂渡边杏使用。因为琼脂是未精制的混合物，含有一定量的氮化合物。利用琼脂固体培养基，可以为细菌提供一定数量的尿所流氮源，尿素固体培养基可以大量生产以尿所为氮源的细菌，对以尿素为氮源的细菌的筛选不利。(3)尿素在高温下分解，因此尿素溶液的灭菌应采用G6玻璃砂漏斗过滤方法。另外，基本培养基经过高压蒸汽灭菌，冷却到60时，必须放回。(4)土样本必须从哺乳动物粪便所在的地方取来，因为动物粪便中有一定量的尿素，这些土壤通常含有大量分解尿素的细菌。(。问题3探究酶活性最佳条件和使用情况的实验设计。5.(2016温州中学检查)果胶酶促进果胶分解，瓦解植物的细胞壁和胞间层，使果汁更容易挤出，澄清浑浊的果汁