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文档简介
1、,兽医寄生虫与寄生虫病学实验室,蠕虫学粪便检查技术(三),蠕虫学粪便检查法,掌握贝尔曼氏幼虫分离法的操作技术 学会显微镜测微尺的使用方法 了解消化道线虫第三期幼虫的主要形态特征,目的与要求,器械 漏斗、漏斗架、胶头滴管、乳胶管、止水夹、温度计、载玻片、盖玻片、目镜测微尺、物镜测微尺、光学显微镜、离心机、离心管等。 材料 新鲜粪便、卢戈氏碘液、纱布,实验器材,一、幼虫分离法 贝尔曼氏法,实验内容与方法, 将乳胶管与玻璃漏斗连接,并用止水夹夹住,置于漏斗架;, 取1520g粪便于纱布中包好,置于漏斗中,加入约40 的温水,以没过粪便为准;, 排净管中气泡,静置1h;, 放出粪液于离心管中,1500
2、r/min离心3min,弃上清,吸取沉渣涂片镜检。,平皿法(适用于球状粪便) 取粪球310个,置于培养皿中,加入少量40左右的温水; 静置1015min,吸取皿底虫体,涂片镜检。,注意事项: 贝尔曼法检查粪便时,需将完整粪球放入,不必弄碎;所加温水必须充满整个装置,并浸泡住被检材料,中间不能有气泡或空隙。 贝尔曼法也可用于组织器官材料的检查,要求材料必须新鲜,且应尽量撕碎。,二、测微技术 1. 测微器的组成,目镜测微尺,物镜测微尺,2. 使用方法 将物镜测微尺置于镜台上,先用低倍镜观察,对准焦距后改为高倍镜,待看清物镜测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度和物镜测微尺的刻度相平行,并使两
3、尺的左边第一条线(零刻线)相重合,再向右寻找两尺的另一条重合线。分别计数两重合刻度之间目镜测微尺和物镜测微尺的格数。,左边重合线 (零刻线),右边重合线,目镜 测微尺,物镜 测微尺,目镜测微尺的校准,10m,3. 计算公式,目镜测微尺每格长度(m),物镜测微尺重合格数 10,目镜测微尺重合格数,例如,目镜测微尺20小格等于物镜测微尺3小格,已知物镜测微尺每格10 m ,则3小格的宽度为 3 10 30 m,那么相应地在目镜测微尺上每小格大小为 3 10 / 201.5 m 。,4.虫体的测量,取下物镜测微尺,将涂片置于载物台上,先在低倍镜和高倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺测量幼虫虫体长度。,测量弯曲虫体时,可通过转动目镜进行分段测量,之后相加即可。,注意事项,校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度)进行,而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新对目镜测微尺进行校正。,测量时如需使用油镜,必须在物镜测微尺上加盖玻片,以防格线模糊化。,三、消化道线虫第三期幼虫,仰口线虫与食道口线虫 (100),仰口线虫
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