血小板浓缩制品PRPPRFCGF综述

1、血小板浓缩产品血小板作为一种多功能细胞，不仅在血栓形成和止血中发挥作用，而且在血管生成、组织修复和炎症中发挥重要作用。血小板被激活后，可以释放多种生物活性物质，在促进组织愈合中发挥重要作用。目前，经过几代人的发展，有几种血小板浓缩产品：富血小板血浆(PRP)、富血小板纤维蛋白(PRF)和浓缩生长因子(CGF)。1.发展历史1984年，As s . o . I . o . n2和其他人发现从人血浆中提取的富含血小板的血浆(PRP)含有多种生长因子。当PRP与氯化钙和牛凝血酶混合时，各种生长因子从血小板的颗粒中释放出来。然而，使用牛凝血酶常常伴随着抗凝血因子和的抗体的形成，并且存在危及生命的凝血障

2、碍的可能性3。作为第二代浓缩血小板，富血小板纤维蛋白(PRF)是由Choukroun生产的。PRF是一种富含纤维蛋白的凝胶，由从患者静脉提取的新鲜血液制成，属于新一代血小板浓缩物。无需任何生物添加剂，制备简单。在离心分离制备PRF的过程中，血小板被激活，大量脱颗粒细胞中包含的重要生长因子被释放4。集中生长因子(CGF)首先是由萨科5开发的。像猪繁殖与呼吸综合征一样，CGF是由静脉血制成的。然而，这两种技术的离心速度是不同的。与脉冲重复频率不同，CGF技术使用2400至2700转/分的速度，从静脉血中分离细胞。因此，CGF富含纤维蛋白的凝块比PRF中的凝块更大、更粘，纤维蛋白含量也更高。二、详细

3、介绍1 PRP1.1 PRP制备方法及组成结构PRP最初是在1984年由阿森松岛2提取和制备的，它是在梯度离心和分层后位于白细胞上方的富含血小板的血浆部分。它在全血中含有70%以上的血小板，可以加入凝固剂(通常是10%的氯化钙和凝血酶)形成凝胶。活化后，血小板颗粒释放多种生长因子。如转化生长因子- (TGF-)、骨形态发生蛋白(BMPs)、血小板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(血管内皮生长因子)、表皮生长因子(表皮生长因子)和成纤维细胞生长因子(FGF)。这些生长因子在PRP的浓度非常高，根据不同的制备方法，是体内正常浓度的几倍甚至数百倍9-11。PRP

4、血浆成分中的纤维素、纤连蛋白和透明质酸可用作生长因子的载体，也是非常好的细胞粘附分子。1.2 PRP现状在过去的20年里，PRP逐渐应用于临床实践，包括促进软组织愈合和骨再生。应用领域主要是整形外科和创伤外科12，13。1998年，马克思首次将PRP引入口腔医学领域，并逐渐成为口腔医学的研究热点之一。其中，PRP在口腔种植学中对骨增量做了大量的研究，并得到了大多数人的肯定。然而，PRP的应用一直存在争议，其焦点在于其疗效的稳定性14-19和其使用的安全性。后者是最尖锐的矛盾。这种矛盾产生于在制备PRP的过程中需要加入不同种类的凝血酶和抗凝血产品，这被认为会导致免疫排斥的发生和传染病的传播。2

5、PRF2.1 PRF的制备方法和组成结构为了延续PRP的优势并避免争议，法国科学家Chukroun在2000年提取并制备了新一代自体血产品Chukroun富血小板纤维蛋白(Chukroun的PRF)20。Choukroun氏PRF是一种富含血小板的纤维蛋白凝胶，其静脉血经离心和分层后位于贫血小板血浆和红细胞碎片层之间。在制备过程中，Choukroun氏PRF的纤维蛋白原缓慢聚合形成三分子三维网络结构，其凝胶结构具有疏松、大孔、弹性好的特点，并保留了大量血小板和生长因子。传统的PRP是一种四分子结构，而PRF产生的纤维蛋白是一种三分子三维网状结构，具有松散的凝胶结构、大孔和高弹性。组织细胞和循环

6、血液中的干细胞可以更快地生长，细胞因子也会大量延迟，并与纤维蛋白发生化学结合。作为基质的纤维蛋白为细胞附着、迁移和分化提供了有利的场所22。生长因子主要包括转化生长因子- (TGF-)、血小板衍生生长因子-ab (PDGF-AB)、胰岛素样生长因子- (IGF-)等。由于纤维蛋白原在Choukroun氏PRF中的缓慢聚集，血小板和生长因子通过化学键与PRF中的纤维蛋白原结合，这有利于它们的充分协同作用21。纤维蛋白基质还含有大量的免疫细胞，这些细胞可能参与炎症反应的调节。2.2 Chou kroun PRF促进骨再生的机制和机理Choukroun的PRF依赖于血小板中粒子释放的多种生长因子。生

7、长因子可以诱导成骨细胞迁移、增殖和分化，促进骨愈合。Choukroun氏PRF还富含分散的免疫细胞，可释放多种炎症因子，并可能参与炎症调节，从而减轻周围软组织的炎症反应，具有抗感染能力。Dohan等人提出Choukroun的PRF不仅含有大量的血小板，而且还能增强机体的防御反应23。在制备Choukroun氏PRF的过程中，没有向收集的血液中添加抗凝血剂，并且没有使用凝血酶和氯化钙来诱导血小板活化和纤维蛋白聚合，模拟生理凝固过程，并且发生类似于形成天然纤维蛋白网络的缓慢聚合，形成三维网络结构24。这种网络结构便于营养物质和氧气在细胞周围扩散，为成骨细胞的迁移、增殖和分化提供场所；网状结构还可以

8、为骨愈合提供支架。与PRP相比，Choukroun的PRF具有更强的成骨能力。和玲等人认为Choukroun的PRF具有逐渐释放生长因子并将其保持在高水平的生物学特性25，从而显示出优越的成骨能力。孙洁等人的研究表明，Choukroun氏PRF中的大部分血小板外膜是完整的，大量粒子是完整的和未破裂的，从而证明PRF中的大量血小板仍处于不完全活化状态26。同时，Dohan DM和其他人认为PRF的网络结构将血小板和生长因子与化学键结合起来24。因此，随着纤维蛋白的逐渐溶解，结合的生长因子被缓慢释放，结合的血小板被活化后脱颗粒释放，使生长因子持续发挥作用，延长生长因子的作用时间，增强成骨效果。其他

9、研究表明，在实验期间，Choukroun氏PRF中的大量免疫细胞也可以将Choukroun氏SPR中释放的TGF-和血管内皮生长因子保持在高水平27。以上研究证明Choukroun的PRF具有良好的成骨能力。2.3 PRF促进软组织愈合的作用首先，富含PRF的生长因子可以协同作用，促进I型胶原和纤连蛋白的合成，促进基质细胞的趋化和增殖，并刺激成纤维细胞和血管内皮的分化和增殖29，在组织愈合过程中发挥重要的调节作用。其次，PRF作为基质的三维网络结构为细胞附着、迁移和分化提供了有利的场所28，从而使循环血液中的组织细胞和干细胞能够更快地生长到其中。此外，这种结构具有良好的弹性和大孔，有利于营养物

10、质和氧气的扩散，加速愈合过程。第三，大量延迟的血小板和生长因子与纤维蛋白化学键合。这种特殊的结构与各种生长因子有很强的亲和力，使得生长因子释放缓慢，延长了PRF在伤口中的作用时间30。一些研究表明，PRF的三维结构可以容纳大部分白细胞，调节炎症反应，并使多种细胞因子缓慢而持续地释放，这对组织修复有积极作用31-33。2.4 Chou kroun PRF的突出特点：制备操作简单；制备过程不需要添加抗凝血剂和凝血酶产品，并且可以在植入前和植入过程中进行，没有交叉感染的风险34，并且使用安全；完全取自自体血，经济方便；制备过程模拟自然凝固过程，制备的纤维蛋白凝胶的分子结构与天然血凝块中的纤维蛋白相似

11、；富含血小板和各种细胞因子，具有促进组织愈合的能力；它含有免疫细胞释放的炎症因子和修复介质，并具有调节炎症反应和抵抗感染的能力35。在制备过程中，突出的一点是不添加生物制剂，只需要简单的离心，从而避免了过去血液制品中存在的伦理道德争议和疾病传播的风险。就生物学特性而言，它富含具有调节组织修复能力的血小板和激活后释放的各种细胞因子36，如转化生长因子1、血小板衍生生长因子-AB、PDGF-AB、血管内皮生长因子(VEGF)和胰岛素样生长因子- (IGF-)，可有效调节成骨细胞、成纤维细胞和其他与组织修复密切相关的细胞的增殖、分化和凋亡37-40。最值得注意的是，Choukroun氏PRF的制备过

12、程促进了纤维蛋白的缓慢聚合，这使得Choukroun氏PRF中的各种细胞因子有足够的时间和条件与纤维蛋白分子化学键合，并相互发挥协同作用41，这将大大减少细胞因子的损失，增强其生物学功能。由于Choukroun的PRF的生物学功能取决于其特殊的分子结构，分子结构也是其突出的特征之一。Choukroun氏PRF的纤维蛋白聚合过程缓慢而自然，产生的纤维蛋白分子为三分子结构和三维网络，形成的凝胶疏松、孔隙大、弹性好。这是不同于PRP的Chou kroun PRF的显著特征。由于PRP是由人工添加凝血酶引发的纤维蛋白聚合，聚合速度快。因此，产生的纤维蛋白是一种四分子结构，相对致密，不利于细胞因子的滞后

13、和细胞的生长。2.5总结Choukroun的PRF在牙种植领域具有以下优势：1 .完全取自自体血液，不添加任何人工生物制品，既避免了伦理纠纷，又避免了血液交叉感染的风险；2.富含血小板和生长因子，具有促进骨组织再生的功能；3.富含大量免疫细胞，能缓解组织愈合过程中的炎症反应，具有抗感染能力；4.Choukroun的PRF形成的网络结构有利于成骨细胞的迁移、增殖和分化，充分发挥生长因子的作用，为组织愈合提供支架；5.制备过程简单易操作。3 CGF3.1的制备方法集中生长因子(CGF)首先是由萨科5开发的。像猪繁殖与呼吸综合征一样，CGF是由静脉血制成的。然而，这两种技术的离心速度是不同的。首先，

14、从病人身上采集10毫升静脉血，并将其注入试管。灌装后，不要摇晃，立即将其放入Medifuge(意大利西尔弗隆特)离心加速器的转鼓中。设定CGF准备计划。旋转12分钟后，可以看到试管分为三层(顶层是血清，中间是纤维蛋白层，底层是红细胞和血小板)。血清被分离并储存在一个特殊的储存容器中。分离CGF并储存在稀释的抗菌溶液(林可霉素600毫克)中。底层的红细胞和血小板立即储存在富含红细胞、血小板、铁、钙等基本元素的容器中，可用于制备截骨术中的填充物，从而将生物材料与自体骨混合。CGF被切成1-2mm的颗粒，然后依次与收集的红细胞和骨替代材料混合。为了增加混合物的柔软度，可以加入一些血清。使用专用收集设

15、备(意大利Silfradent)旋转约6秒钟，混合搅拌均匀，将高密度的粘贴胶嵌入骨缺损处。此外，CGF具有很强的可塑性。通过压缩，冷凝物可以是由冷凝物本身的破裂产生的薄膜或碎片的形式。通过用手术钳按压获得CGF隔膜，然后将CGF隔膜应用于受损区域。因为隔膜具有一定的附着力和弹性，这些区域可以粘合和愈合。手术结束时，可以用一点血清清洗伤口。3.2 CGF的主要成分和生物特征CGF的功能取决于其高浓度的各种生长因子和纤维蛋白原。在制备CGF的过程中，血小板被特殊的变速离心激活，其中血小板粒子释放多种生长因子，促进细胞增殖、基质合成和血管生成，纤维网状支架可以支撑生长因子诱导的新组织。浓缩生长因子包

16、括血小板衍生生长因子(PDGF)、转移生长因子-(TGF-)、胰岛素样生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(血管内皮生长因子)、表皮生长因子(表皮生长因子)、成纤维细胞生长因子(FGF)、骨形态发生蛋白(BMPs)等。他们各自的角色是：(1)血小板衍生生长因子-PDGF是一种相对分子量约为30 kD的糖蛋白，首次发现于血小板的颗粒中，也可由巨噬细胞和上皮细胞合成和分泌。PDGF是最先出现在伤口中的生长因子，可以促进结缔组织的修复和再生42。血小板中有三种PDGF异构体：PDGF、PDGF和PDG，它们主要以PDGF异二聚体的形式存在于人体内。当身体受损时。PDGF从脱颗粒的血小板中释放出来，从而激活其靶细胞(如巨噬细胞、成纤维细胞、骨髓干细胞等)的细胞膜受体。)，细胞质中的信号蛋白获得高能磷酸键，激活后引发一系列反应。包括促进伤口细胞的有丝分裂、形成功能性毛细血管、吞噬巨噬细胞和释放生长因子等。PDGF主要具有促有丝分裂作用，作为促有丝分裂因子，它在损伤部位高度表达，可促进