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文档简介
1、实验一 实验室环境和人体表面微生物的检查,一、目的要求 1证明实验室环境与体表存在微生物; 2比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型; 3体会无菌操作的重要性。,二、基本原理 平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分,当取自不同来源的样品接种于培养基上,在37温度下培养,12天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖,形成一个可见的细胞群体的集落,称为菌落(colony)。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点,因此,可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。,三、器材 肉膏蛋白胨琼脂平板,无菌水,灭菌棉签(装在试管内),接种环,试管架,酒精灯,记号笔,标签纸,废物缸。,四、操作步骤
2、每组在“实验室”和“人体”两大部分中各选择一个内容做实验,结果供全班讨论。 1写标签 根据实验要求,每组准备4只培养皿,按课本P6要求写好标签和做好记号。,2实验室微生物的检查 (1)空气 将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在当时做实验的实验室,移去皿盖,使琼脂培养基表面暴露在空气中;将另一肉膏蛋白胨琼脂平板放在无菌室或无人走动的其他实验室,移去皿盖。1h后盖上2个皿盖。,(2)实验台、桌面和门旋钮 。 (a)取棉签 根据课本P7,左手拿含有棉签的试管,在火焰旁用右手的手掌边缘和小指、无名指夹持棉塞(或试管帽),将其取出(图-2,B),将管口很快地通过煤气灯(或酒精灯)的火焰,烧灼管口;轻轻地倾斜试管
3、,用右手的拇指和食指将棉签小心地取出(图-2,C)。放回棉塞(或试管帽)(图-2,D),并将空试管放在试管架上;,(b)弄湿棉签 左手取灭菌水试管,如上法拔出棉塞(或试管帽)并烧灼管口,将棉签插入水中,再提出水面,在管壁上挤压一下以除去过多的水分,小心将棉签取出,烧灼管口,放回棉塞(或试管帽),并将灭菌水试管放在试管架上; (c)取样 将湿棉签在实验台面上擦拭约2平方厘米的范围; (d)接种 将棉签迅速从平板开启处伸入,在标有E区域滚动一下,立即闭合皿盖,弃去棉签;,(e)重复步骤(a)、(b)、(c),在门旋钮和桌面取样,完成F、G的接种; (f)在H区接种无菌水作为对照。,3人体表面微生物的检查 (1)手指(洗手前与洗手后) (a)移去皿盖,将未洗过的手指在平板A区域轻按,而后迅速盖上皿盖; (b)用洗手液洗净双手,自然干燥后,在平板的B区域上轻按,迅速盖上皿盖;,未洗的手,漂洗的手(只用清水),洗净的手(用皂液),洗净的手(用消毒剂),(2)头发 将你的12根头发轻轻放在平板的C区域,迅速盖上皿盖。 (3)鼻腔 (a)按照实验台检查法的步骤(a)和(b),用湿棉签在鼻腔内滚动数次,立即在D区域轻轻摩擦23次,迅速盖上皿盖。,(4)培养 将以上实验的平皿底面朝上,放在37温度下培养12天,取出观察,记录并分析结果。,五思考题 (1)比较各种来源的样品,哪一种样品的
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