第05章 芳酸类药物的分析.ppt

1、,胺,芳胺 芳伯氨基,羧酸,芳酸,第五章 芳酸及其酯类药物的分析,常见的芳酸及其酯类药物,水杨酸类,贝诺酯,苯甲酸类,氨甲苯酸,羟苯乙酯,丙磺舒（pKa3.4）,布美他尼,其他芳酸类药物,氯贝丁酯,酚磺乙胺,第一节 结构与性质,一、结构分析,包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐,共同点：苯环、羧基,不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）,二、性质,（一）物理性质,（1）固体 具有一定的熔点,（2）溶解性 游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。,（二）化学性质,1. 芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在36之间，属中等强度的酸或弱酸；,X、NO2、O

2、H等吸电子取代基存在使酸性增强,CH3、NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱,邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强,2. 芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。,3. 芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。,4. UV,5. IR,6. 取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化偶

3、合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。,7. 色谱法制剂分析,第二节 鉴别试验,一、FeCl3反应,具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物,直接：水杨酸、对氨基水杨酸钠、双水杨酯、水杨酸二乙胺、酚磺乙胺、对乙酰氨基酚,水杨酸 ChP（2000） 鉴别 （1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,间接：阿司匹林、贝诺酯,阿司匹林 ChP（2000） 鉴别 （1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,二、重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚

4、（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯,三、水解反应,1. 分解产物的反应,苯甲酸盐,四、特殊反应,2. 与汞离子及茚三酮反应,3. 氧化反应 含硫的药物,4. 异羟肟酸铁反应,六、IR,五、UV,第三节 特殊杂质检查,一、阿司匹林中水杨酸的检查,1. 杂质来源 原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）,2. 检查方法 对照法 反应原理 三氯化铁反应 限量 原料：0.1%； 阿司匹林片：0.3%； 阿司匹林肠溶片：1.5%； 阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）,其他杂质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）,二、对氨基水杨酸钠中间氨基

5、酚的检查,1. 杂质来源 原料残存、脱羧产生,2. 检查方法 ChP（2000） 含量测定法（双相滴定法）。,利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离后，在乙醚中加水适量，用盐酸滴定，控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚限量。,USP（24） 离子对HPLC法（内标法）,三、双水杨酯中有关物质的检查 BP（1998）TLC 水杨酸：杂质对照品法 有关物质：高低浓度对比法,1. 杂质对照品法,方法：,供试品供试品溶液,杂质对照品对照品溶液,判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点,优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强；,缺点：需要杂质对照品。,2.

6、高低浓度对比法,方法：,判断：, 供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）, 控制杂质斑点个数，控制杂质种类,缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度差、直观性差。,优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液；,四、羟苯乙酯中有关物质的检查 BP（1998）反相TLC 高低浓度对比法,五、酚磺乙胺中氢醌的检查 ChP（2000）HPLC法,六、 氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查 GC,第四节 含量测定,一、中和法,1. 直接滴定法 pKa36,阿司匹林 ChP（2000） 取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显

7、中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,（1）测定方法及计算 Ka=3.2710-4 反应摩尔比为11,（2）讨论 中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言, 优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸） 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定,2. 水解后剩余滴定法 酯的一般含量测定方法,阿司匹林,USP（24）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（

8、0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。,2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O,剩余滴定：,水解：,反应摩尔比为12 优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰,羟苯乙酯含量测定亦可用此法,3. 两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片 氯贝丁酯,如阿司匹林片的测定：,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性

9、）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,第一步 中和,第二步 水解后剩余滴定,水解：,2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O 反应摩尔比为11 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰,剩余滴定：,氯贝丁酯：消除供试品中共存的酸性杂质,片剂含量测定结果的计算,剩余滴定

10、法,3. 双相滴定法 芳酸碱金属盐,如苯甲酸钠 ChP(2000),溶剂：水乙醚,取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。,乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底 滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层

11、，使滴定反应完全，终点清晰。,优点：消除了反应产物的干扰,5. 非水碱量法 芳酸碱金属盐 冰醋酸作溶剂 高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂 结晶紫作指示剂指示终点 或电位法指示终点,6. 缩合后酸碱滴定法 氨甲苯酸 加入甲醛使与氨甲苯酸作用，生成Schiff碱后，用碱液滴定,氨甲苯酸 取本品约0.3g，精密称定，加水30ml，加热使溶解，放冷，加甲醛与甲酚红指示液，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液显淡紫色，并将滴定结果用空白试液校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于15.12mg的C8H9NO2。,二、亚硝酸钠滴定法 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的

12、药物,三、紫外分光光度法 1. 直接紫外分光光度法 酚磺乙胺注射液 ChP（2000）,精密量取本品适量（约相当于酚磺乙胺0.25g），置200ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2m1，置100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于305nm的波长处测定吸收度，按C10H17NO5S的吸收系数（ ）为159计算含量。,注射液含量测定结果的计算,紫外分光光度法 吸收系数法,2. 过滤后的紫外分光光度法 丙磺舒片,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9100）4m1，置70水

13、浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（ ）为338计算。,紫外分光光度法 吸收系数法,3. 柱分配色谱紫外分光光度法 USP（24）阿司匹林胶囊 可同时定量测定阿司匹林和水杨酸 （1）水杨酸的限量测定 固定相：FeCl3 SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量 （2）含量测定 固定相：NaHCO3 AAS、SA保留 冰醋酸洗脱，280nm测总量,4. 离子交换后紫外分

14、光光度法 氯贝丁酯 强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，对照法定量测定氯贝丁酯含量,原料药 对照法,四、HPLC 1. 阿司匹林栓剂 ChP（2000） 离子抑制色谱法 内标法定量,2. 对氨基水杨酸钠 USP（24） 离子对反相HPLC 内标法定量,3. 丙磺舒 USP（24） 离子抑制色谱法 外标法定量,4. 酚磺乙胺 ChP（2000） 正相HPLC 内标法定量,98：80鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（C） A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾,95：129. 乙酰水杨酸片剂可采用的测定方法为（CD） A. 非水滴定法 B. 水解后剩余滴定

15、法 C. 两步滴定法 D. 柱色谱法 E. 双相滴定法,98：134测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（BC） A. 重量法 B. 酸碱滴定法 C. 高效液相色谱法 D. 络合滴定法 E. 高锰酸钾法,99：81. 两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是（A） A. 18.02mg B. 180.2mg C. 90.08mg D. 45.04mg E. 450.0mg,反应摩尔比为11,T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 c滴定液浓度，mol/L M被测物的摩尔质量，g/mol n1mol样品

16、消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1n,96：78苯甲酸钠的含量测定，中国药典（1995年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（D） A. 水乙醇 B. 水冰醋酸 C. 水氯仿 D. 水乙醚 E. 水丙酮,99：83. 双相滴定法可适用的药物为（E） A. 阿司匹林 B. 对乙酰氨基酚 C. 水杨酸 D. 苯甲酸 E. 苯甲酸钠,99x：121125含量测定方法（中国药典1995年版）为 A. 直接中和滴定法 B. 两步滴定法 C. 两者均可 D. 两者均不可 99x：121阿司匹林片（B） 99x：122阿司匹林原料药（A） 99x：123. 对氨基水杨酸钠（D） 99

17、x：124. 阿司匹林栓剂（D） 99x：125. 阿司匹林肠溶剂（B）,例15 A两步酸碱滴定法 B直接酸碱滴定法 C两者皆是 D两者皆不是 1. 苯甲酸钠的测定（D） 2. 氯贝丁酯的测定（A） 3. 盐酸的测定（B） 4. 酸碱滴定法（C） 5. 阿司匹林片的测定（A）,例6. 采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，已知阿司匹林的分子量为180.2，所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为0.1mol/L，请问1ml氢氧化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是（C） A. 180.2mg B. 180.2g C. 18.02 mg D. 1.802mg E. 9.01mg,例7. 阿司匹林加碳酸钠试液加

18、热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是（C） A. 苯酚 B. 乙酰水杨酸 C. 水杨酸 D. 醋酸钠 E. 醋酸苯酯,例8. 水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是（D） A. pH10.0 B. pH2.0 C. pH78 D. pH46 E. pH2.00.1,例9. 两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（B） A. 测定阿司匹林含量 B. 消除共存酸性物质的干扰 C. 使阿司匹林反应完全 D. 便于观测终点 E. 有利于第二步滴定,例10对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是（B） A. 水杨酸 B. 间氨基酚 C. 氨基酚 D. 苯酚 E. 苯胺,例11. 能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有（A