分离土壤中分解尿酸的细菌实验报告

1、分离土壤中分解尿酸的细菌实验报告分离土壤中分解尿素的细菌和计数制作：邹霖1.实验目的：从土壤中分离出能够分解尿素的细菌，计数2.实验原理： a. 培养基中加入唯一氮源 - 尿素，能分解尿素的细菌自身能够合成脲酶，能够分解利用尿素中的氮元素， 从而能够生存繁殖；不能分解尿素的细菌的繁殖受到抑制， 从而达到分离出土壤中能分解尿素的细菌的作用。 b.使用酚红鉴定尿素是否被分解 .co(nh2)2 分解产生 nh3 使溶液显碱性 .如果尿素被分解，则酚红会显红色， c. 分解原理 .co(nh2)2+h2o=脲酶 =co2+nh3d.稀释涂布平板法. 将菌液进行一系列的梯度稀释， 然后将不同稀释浓度的

2、菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞， 从而能在培养基表面形成单个的菌落。e.计数菌落，一个或几个细菌可以繁殖为一个肉眼可见的菌落 （计数结果低于实际细菌数）3.提出问题：尿素分解后nh3 的产生是否会影响实验？4.做出假设：尿素分解后nh3 的产生会影响实验。5.实验材料用具： 超净工作台、 取样铲、试管、锥形瓶、恒温培养箱、培养皿、高压蒸汽灭菌锅、 酒精灯、酒精、无菌水、地面以下 3-8cm处的土壤、培养基 a（磷酸二氢化钾 1.4g 磷酸氢化二钠 2.1g 水合硫酸镁 0.2g 葡萄糖 10g 尿素 1g 琼脂 15g

3、）培养基七b（牛分离土壤中分解尿酸的细菌实验报告肉膏蛋白胨培养基）涂布器、干热灭菌箱、烧杯、胶头滴管6.实验步骤：1.对实验用具消毒灭菌；按配方称取上述物质，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000ml 。2.配置好培养基后， 将培养基 a.b 倒置都放入恒温培养箱中培养 1d ，取出后观察是否产生了菌落，若无，则继续下一步实验。若有，重做 (_)3.系列稀释：将分别盛有 9ml 水的 5 只试管和 90ml 水的1 个锥形瓶灭菌，并按1010的顺序编号锥形瓶编号10。将 10g符合条件的土壤放入锥形瓶中，震荡锥形瓶，用移液管吸取1ml菌液，注入标有 10 的试管中，用手轻压移液管上的橡皮头，

4、吹吸三次，使菌液与水充分混匀。 以此类推，直到完成最后一只试管的稀释。 （注意：移液管需要经过灭菌，操作时，试管口和移液管应在离火焰12cm处）4.涂布平板：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中， 分别取 10.10 .10 中的少量菌液，分别各滴加到3 个培养基 a（总计 9 个）的表面，注明培养基种类，培养日期以及平板上培养样品的稀释程度，取少量无菌水滴加到1 个培养基中作为空白对照组， 取少量菌液滴加到培养基 b 中（判断选择培养基是否起到了选择作用），将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8-10s 。用涂布器将菌液均匀的涂布在每个培养基表面（每次涂布前都必须用酒精灯灼烧）涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。分离土壤中分解尿酸的细菌实验报告5.将培养基倒置并放入恒温培养箱中培养1-2d6.相同稀释程度的 3 个培养基统计其菌落数（30-300 ）取平均值。7.实验结果： 1. 空白对照组无菌落。2.培养