细胞和分子免疫学课件模板-027(共74)

1、细胞和分子免疫学 课件模板-27,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,转化生长因子-（transforming growth factor-,TGF-)是属于一组新近发现的调节细胞生长和分化的TGF-超家族。这一家族除TGF-外，还有活化素（activins)、抑制素（inhibins)、缪勒氏管抑制质（Mullerian inhibitor substance,MIS)和骨形成蛋白（bonemorpho-genetic proteins,BMPs）。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,TGF-的

2、命名是根据这种细胞因子能使正常的成纤维细胞的表型发生转化，即在表皮生长因子（EGF）同时存在的条件下，改变成纤维细胞巾壁生长特性而获得在琼脂中生长的能力，并失去生长中密度信赖的抑制作用。TGF-与早先报道的从非洲绿猴肾上皮细胞BSC-1所分泌的生长抑制因子是同一物。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,1.TGF-的产生 （1）机体多种细胞均可分泌非活性状态的TGF-。在体外，非活性状态的TGF-又称为latency associated peptide（LAP），通过酸外一时可被活化。在体内，酸性环境可存在于骨折附近和正在愈合的伤口。蛋白本科的

3、裂解作用可使TGF-复合体变为活化TGF-。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的TGF-，如成骨细胞、肾脏、骨髓和胎肝的造血细胞。TGF-1在人血小板和哺乳动物骨中含量最高；TGF-2在猪血小板和哺乳动物骨中含量最高；TGF-3以间充质起源的细胞产生为主。 （2）活化后T细胞或B细胞产生TGF-水平比静止细胞明显为高。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,（3）几科所有肿瘤细胞内可检测到TGF-mRNA。神经胶质细胞瘤在体内可分泌较高水平的TGF-。 2.T

4、GF-的分子结构和基因1985年TGF-的基因克隆成功，并在大肠杆菌内得到表达。在哺乳动物至少发现有TGF-1、TGF-2、TGF-3、TGF-12四个亚型。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,在鸟类和两栖类动物还分别存在着TGF-4和TGF-5，对后两者的生物学作用所知甚少。 TGF-是由两个结构相同或相近的、分子量的12.5kDa亚单位借二硫键连接的双体。人TGF-cDNA序列研究表明，单体的TGF-112氨基酸残基是由含400氨基酸残基的前体份子（per-pro-TGF-)从羧基端裂解而来。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-

5、）,五、转化生长因子-（TGF-）：,pre-pro-TGF-N端含有一个信号肽，在分泌前被裂解掉，成为非活性状态的多肽链前体（pro-TGF-)，通过改变离子强度、酸化或蛋白酶水解切除掉，成为非活性状态的多肽链前体（pro-TGF-)，通过改变离子强度、酸化或蛋白酶水解切除N端部分氨基酸残基，所剩余的羧基端部分形成有活性的TGF-。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,TGF-1与TGF-2有71%氨基酸同源性，TGF-1与TGF-3有77%同源性，TGF-2与TGF-3有80%同源性。TGF-与TGF-超家族其化成员有3040%同源性。 人T

6、GF-1、TGF-2和TGF-3的基因分别定位于染色体19q3、1q41和14q24，均含有7个外显子，核苷酸序列有高度同源性，所编码的前体分子C端者有9个保守的Cys，提示TGF-1、TGF-2和TGF-3基因可能来自一个共同的祖先基因。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,人和小鼠TGF-1的同源性高达99%，表明在不同种属中TGF-都具有重要的生物学功能。对其人TGF-1基因调控区进行了研究，发现该基因5端序列包含5个明显的调控区：一个类增强子（enhancer-like)活性区，二个负调控区和二个启动子区。 3.TGF-受体许多细胞表面都

7、有TGF-受体。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,大鼠成纤维细胞系NRK-49F和BALB/c 3T3细胞表面TGF-受体亲和力Kd值为5.614*10-11M，每个细胞TGF-结合点约1.61.9*104。在淋巴细胞表面，TGF-RKd值15.1*10-12M。T细胞、B细胞每个细胞TGF-R数约250，活化后受体数量可增加56倍，但Kd值无明显变化。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,造血细胞表面TGF-R对TGF-1亲和力要比TGF-2明显为高，这可能解释了造血细胞对TGF-1反应要比T

8、GF-2更为敏感。TGF-1、2和3结合细胞表面相同的受体。 最近发现TGF-R存在着、型三种形式，分子量分别为53kDa、7085kDa和250350kDa，。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,、型TGF-R均为糖蛋白，它们和TGF-1的亲和力要比和TGF-2的亲和力大1080倍；型受体是一种蛋白聚糖（proteoglycan)，它与TGF-1、TGF-2、TGF-3的亲和力近似，是为TGF-主要的受体，可能在TGF-发挥生物学功能中起着主要作用。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,TGF-

9、R又名Endoglin，CD105，TGF-1和TGF-3为其主要配体。 型TGF-R胞浆区具有丝氨酸/苏氨酸激酶区。这种结构也见于活化受体（ActR）和ActRB。型TGF-受体本身缺乏蛋白激酶活性，对于其如何参与信号的传递还不清楚。当TGF-诱导增殖时G蛋白可能参与诱导过程，此外，TGF-促进Ca2+内流和胞内IP3水平的升高，激活PKC。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,4.TGF-的生物学作用起初对TGF-的生物学功能研究主要在炎症、组织修复和胚胎发育等方面，近年来发现TGF-对细胞的生长、分化和免疫功能都有重要的调节作用。TGF-1

10、、2和3功能相似，一般来说，TGF-对间充质起源的细胞超刺激作用，而对上皮或神经外胚层来源的细胞起抑制作用。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,（1）抑制免疫活性细胞的增殖：抑制IL-3、GM-CSF、M-CSF所诱导小鼠造血前体细胞和LTBMC的集落形成，并降低巨核细胞对IL-3T和CSF的反应性。抑制ConA诱导或ConA与IL-2、IL-6联合诱导的胸腺细胞增殖。抑制丝裂原、同种异体抗原刺激的T细胞增殖或IL-2依赖的T细胞生长。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,抑制SAC刺激后IL-2

11、依赖的B细胞增殖。 （2）对细胞表型的调节：抑制IL-2诱导的T细胞IL-2R、TfR和TLiSA1活化抗原的表达，对CD3表达未见有影响。抑制IFN-诱导黑素瘤细胞MHC类抗原表达。 （3）抑制淋巴细胞的分化：抑制IL-2和BCDF依赖的B细胞分泌IgM，促进B细胞分泌Ig类型转换为IgA和IgE。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,抑制混合淋巴细胞培养（MLC）中CTL、NK和LAK功能，这种抑制作用可被TNF-（小鼠MIC）或IL-2（人MLC）所逆转。抑制PBMC中NK活性以及NK细胞对TNF-的的以应性。抑制ConA和IL-2、IL-

12、6协同诱导小鼠胸腺MHC非限制杀伤性细胞的活性。 （4）抑制细胞因子产生：如抑制PBMC中IFN-和TNF-的产生。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,（5）其它调节作用：促进成纤维细胞、成骨细胞和雪旺氏细胞的生长。TGF-1、TGF-2促进人成纤维细胞IL-6的产生，其机理可能是通过对IL-6基因转录的调节。抑制上皮细胞、破骨细胞、内皮细胞生长和脂肪、心肌、骨骼肌的形成。TGF-可拮抗EGF的某些生物学功能。促进细胞外基质（ECM）如胶原蛋白、纤粘连蛋白的表达和抑制ECM的降解，对细胞的形态发生、增殖和分化过程起着重要作用，有利于胚胎发育和细

13、胞修复。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,动物体内实验表明，局部注射TGF-可以促进伤口愈合和典型肉芽组织形成。单核细胞和成纤维细胞的趋化剂，但不引起胶颗粒和氧化物的产生。抑制淋巴细胞与内皮细胞的粘附。促进嗜碱性粒细胞释放组织胺。 （6）TGF-1与原癌基因表：TGF-1能诱导c-sis的表达，但抑制c-myc的表达，这种诱导或抑制作用与作用细胞种类及TGF-的不同功能有关。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,如TGF-诱导成纤维细胞中c-sis基因表达，与促进其在软琼脂中生长有关；而对上皮角

14、朊细胞生长的抑制则与抑制c-myc基因表达有关。TGF-1、TGF-2和TGF-3在大多数生物学作用方面非常相似，但在有些作用方面可有很大差异，如TGF-2对血管内皮细胞和造血祖细胞的生长抑制作用仅为TGF-1和TGF-3的1%。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,TGF-在治疗伤口愈合，促进软骨和骨修复以及通过免疫抑制治疗自身免疫性疾病和移植排斥等方面有潜在的应用前景。 2-巨球蛋白的细胞因子载体效应2-巨球蛋白（2M）是由4个相同多肽亚单位靠链同二硫键和非共价键结合形成具有交叉结构的四聚体。每个亚单位内由半胱氨酸的巯基与邻近的谷氨酰胺残基的

15、羧基形成硫酸键。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,这种硫酯键易受蛋白水解酶裂解从而使2M构型变化增加其电泳迁移率，称为快型2M（F2M）硫酯键裂解可与含有巯基的细胞因子结合成复合物，出现细胞因子载体效应。 （1）IL-1：IL-1与2M结合的最佳条件为pH9.09.3，这种结合是可逆的，与2M结合的IL-1呈“隐蔽”状态，如果IL-1从复合物中释放出来，仍恢复自然的IL-1活性。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,（2）IL-6：2M与IL-6结合可保护IL-6，不易被胰蛋白酶、糜蛋白酶以及组织蛋白酶G的作用，从而处长血浆中IL-6的半衰期。呈结合状态的IL-6并不改变基生物学活性。 （3）THF-：2M可降低血浆中THF-的生物学活性，其机理除抑制THF-与其相应受体结合外，2M与THF-复合物可能被具有2M受体的吞噬细胞所清除。,细胞和分子免疫学：五、转化生长因子-（TGF-）,五、转化生长因子-（TGF-）：,(4)其它：2M还可作为巨噬细胞活化因子（MAF）、血小板衍生的生长因子（PDGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)的载