清洁验证从hplc到toccv-hplc to toc may 2016_cn_final1

1、使用总有机碳TOC方法进行清洁验证通用电气分析仪器2016ImImagaigniantaiotnioant awtowrko. rk内容 分析方法的选择 专属性对比非专属性方法 使用总有机碳（TOC）进行清洁验证、确效和监测CVVM（CVVM, Cleaning Validation, Verification, and Monitoring ） 总有机碳（TOC）方法的使用 我的限值是什么？2分析方法的选择采用什么检测方法？4属性检测方法仅检测活性成分高效液相色谱HPLC、酶联免疫吸附ELISA、质谱分析Mass、原子吸收AA、气相色谱法GC有机物/活性成分/清洁剂TOC 总有机碳离子/缓冲

2、液/清洁剂/无机物/酸/碱电导率，紫外线-可见酸/碱pH 酸碱值微生物微生物限度（Bioburden）微生物的降解内毒素（Endotoxin）分析方法的考虑因素目标是采用最简单的技术，其适合并可以判定合理5分析物仪表 有机物还是无机物？分析速度（分析样品数量） 是否溶于水或其他溶剂？运行成本 在清洁环境中稳定吗？在线适用性 是否会在一定pH值下水解或可用的仪表氧化？ 是否会因为清洁时候的温度而降解？专属性和非专属性分析方法的选择 非专属性方法 专属性方法 分析技术 气相色谱法 电导率 元素分析法 重量分析法 感官分析法（外观、气味） 分光光度测定法 滴定分析法 紫外线/可见 红外中红外、近红外

3、、探头 质谱/迁移谱 光学显微镜;扫描式电子显微镜 质谱 离子色谱 微生物检测方法（大多数为药典要求） 内毒素 微生物限度 生物膜Cotte-Rodriguez, Ismael. Sampling and Analytical Methods for Cleaning Applications-From Development to Validation, IVT Cleaning Validation andCritical Cleaning Processes Conference, August 2015.Cotte-Rodriguez, Ismael. 清洁应用（从开发到验证）的采样和

4、分析方法，源于IVT清洁验证和关键清洁过程会议， 2015年8月。6酶联免疫吸附检测酶免疫分析高效液相色谱HPLCHPLC系统溶 剂HPLC色谱柱注射器 数据 检测器 废液泵7HPLC/UPLC分析结果1) 样品通过一种液体传输，并与色谱柱相互作用。2) 不同的化合物花费不同的时间。3) 各化合物显示一个面积（峰）。4) 峰面积相当于物质的量。前面的峰是什么物质？ 峰10又是什么物质？保留时间（分钟）8/articles/2013/02/uhplc-ms专属方法对比非专属方法有机物的常用检测方法 专属性方法即：气相色谱GC、高效液

5、相色谱HPLC、离子色谱IC、电泳 非专属性方法即：总有机碳TOC、电导率Conductivity、紫外吸UV收法10设备在生产或清洗后的残余污染物是什么？原料药API在下一批产品当中的污染物专属性方法微生物检测法11设备在生产或清洗后的残余污染物是什么？原料药API 赋形剂清洗剂在下一批中的污染物降解产物专属性方法 非专属性方法微生物检测法12我的工艺是干净的不是吗?色谱图显示API的峰值很小或没有峰值。我假设我的设备是干净的。出处：总有机碳法用于复方丹参装囊滴丸清洁验证的可行性研究，中成药，周庆凯，2012年11月。13取样点高压液相色谱UPLC1未检测到峰23415信号小，难于定量，LO

6、Q16信号小，难于定量，LOQ17181920你检测到所有物质了吗？ *总有机碳合格标准= 1.0 ppm C出处：总有机碳法用于复方丹参装囊滴丸清洁验证的可行性研究，中成药，周庆凯，2012年11月。14取样点高压液相色谱UPLCTOC 总有机碳(ppm)*1未检测到峰8.1920.4831.763.7415信号小，难于定量，LOQ2418.516信号小，难于定量，LOQ18.61720.81820.81920.820专属性对比非专属性方法专属性方法告诉你，目标分析物清洗到什么程度了。非专属性方法告诉你，所有的产品，包括降解产物，清洗到什么程度了。目标是采用最简单的技术，其适合并可以判定合理

7、15利用总有机碳TOC分析法进行清洁验证、确效和监测情况已改变“A specific analytical method (HPLC/ELISA) for products (or APIs) is not usuallyan appropriate technique to determine whether the cleaning process iseffective.”“一种用于分析各种产品（或API）的专属性方法（HPLC/ELISA）通常不是 确定清洗过程是否有效的最佳方法。”“Because of the degradation of the active ingredient

8、s in the cleaning processes formanufacturing, the most common practice is to use TOC as the analytical procedure to indicate the removal of products, cleaning agents, excipients, or anypotential contaminates.”“由于在生产清洗过程中的有效成分出现降解问题， 所以最常见的做法是利用总有机碳分析法表示产品、清洗剂、赋形剂或任何潜在污染物的清除情况。“Cleaning process opera

9、tional parameters (inputs) can be controlled to ensurepredictable and acceptable performance as evidenced by appropriate measurements like non-specific methods (outputs).”“可通过调节清洗过程操作参数（输入数据），利用合适的检测方法，如：非专属性方法（输出数据），证明此清洁过程可预测和可接受的表现。”“TOC can be used for all stages of cleaning validation, includin

10、g design, qualification, validation maintenance as well as for investigations.”“ 总有机碳分析法适用于清洁验证的所有阶段，包括设计、确认、验证维护和调查。”17质量保证QA/质量控制QC前景为什么专属性方法被用于清洁验证？历史上，一直使用的质量控制检测方法历史上的法规关注活性物质1993年，在药典专论中还未提及总有机碳分析法现在我们可采用总有机碳TOC分析法专题检测（纯化水和注射用水） 通过检测确认清洁有效性看到存在的所有有机碳，不仅仅原料药API18法规前景总有机碳TOC分析法是在评估清洁有效性时，检测污染物残留

11、的一种可接受的方法自1993年美国食品药品监督管理局US FDA出版清洁验证检验指南（inspection guide on cleaning validation ）以来，多项研究已发表，证明了总有机碳分析法在检测污染物含量方面可以胜任。总有机碳分析法适合质量保证检测、设备放行、USP水放行、棉签采样、淋洗采样、原位清洗（CIP）应用和在线过程控制。总有机碳和电导率分析法可代替专属性品种和清洗剂残余检测法。References: USP Total Organic Carbon 美国药典 总有机碳 Guide to Inspections of Cleaning Validation, 19

12、93 清洁验证检测指南，1993版/Drugs/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/ucm124777.htm EU GMP Vol 4, Annex 15 Qualification and Validation (2015 revision) EU GMP第4卷，附件15鉴定和验证（2015版） PDA Technical Report 29, Points to Consider for Cleaning Validation (Revised 2012) 美国食品药品监督管理局技术报告第29期清洁验证

13、考虑事项（2012年修订）19世界各地采用总有机碳分析法进行清洁验证、确效和监测的国家有哪些？比利时德国意大利斯堪的纳维亚半岛西班牙英国美国中国20应用行业LinkedIndiscussions 领英社交网络讨论GSK葛兰素史克制药Lilly礼来制药RocheWyeth /Pfizer辉瑞/惠氏制药罗氏制药Amgen美国安进Proctor &Gamble宝洁公司Industryvalidation consultants行业验证咨询公司EsteeLauder雅诗兰黛 以及更多21总有机碳分析法适用于清洁验证、确效和监测 证明原料药API、赋形剂、降解产物、清洗剂和其他污染物已减少至预设的水平

14、药典专章检测 全球法规认可 在世界各地和行业内广泛采用 比专属性方法效率更高 总有机碳TOC分析法是一种很有价值的分析工具22总有机碳分析法的实施如何做出改变？有些工作已完成Design 设计第 1阶段新的清洗工艺Validation 验证第 2阶段HPLC或ELISA改变At-Line转换为TOC分析法TOC 方法在线分析Verification 确效第 3阶段重新评估/缩小差距清晰的路线24实施总有机碳TOC分析法HPLCTOC仪器确认相似方法方法验证相似方法采样相似方法回收率研究相似方法限值计算相似方法清洁验证CV协议和报告相似方法样品准备消耗时间运行简单分析方法复杂简单分析时间10-3

15、0分钟12分钟清洁的证据仅原料药API所有化合物总体风险中低25方法开发26HPLCTOC1. 检查和识别分析物和基体的疏水性、极性和电离(pKa & pH)。2. 根据分析物和样品基体的独特特征， 色谱柱的选择基于分离该分析物的 保留机理。3. 选择一种与色谱柱相匹配的流动相。4. 优化液相色谱参数1. 简单运行样品，使用“自动试剂”模式，确定其特性。2. 必要时调整样品制备针对每种分析物重复上述步骤广泛的群体分析物哪些可以实现？27可实现的成果描述时间仪器确认IQ/OQ & PQ3-4天方法验证取决于内部要求和优先次序1-2周回收率研究棉签回收率1-2周技术论证内部论证更换为非专属性方法；

16、 桥接研究1-3周*取决于内部情况SOP更新新限值，新采样程序1-3周*取决于内部情况总共 1-3月我的限值是什么？历史样品分析限值药物有效剂量1234LD50总有机碳TOC限值MACSAL化合物限值SDI关键词缩写SDI = Safe Daily Intake of the residue，残留物安全日摄入量ADE = Acceptable Daily Exposure of the residue，残留物的可接受日接触量ADE = PDE = Permitted Daily Exposure PDE = 允许日接触量MAC = Maximum Allowable Carryover，最大允

17、许残留量SAL = Surface Area Limit，表面积限值ADE*EU Annex 15, PIC/S & ISPEs Risk-MaPP EU 附件15，PIC/S & ISPE 风险-MaPP29清洁验证以下潜在残留量低于预定限值，以证明清洁过程：APIs 原料药Excipients 赋形剂Cleaning agents 清洁剂Contaminants 污染物Microbial (e.g. Bioburden) 微生物（如：微生物限度）30我可以采用注射用水WFI和纯化水PW的限值吗？NO! * 不可以！*FDAs Guide to Inspections Cleaning Va

18、lidation美国食品药品监督管理局出版的清洁验证检查指南“Check to see that a direct measurement of the residue or contaminant hasbeen made for the rinse water when it is used to validate the cleaning process.在验证清洗过程时，要检查是否对冲洗水中的残留物或污染物 进行直接测量。For example, it is not acceptable to simply test rinse water for water quality (doe

19、s it meet compendia tests) rather than test it for potentialcontaminants.”例如：不允许简单检测淋洗水的水质（是否满足药典要 求？），还应进行潜在污染物测试。If you calculate a higher limit, then you can default to lower limit (e.g. WFI spec)如果你计算出一个高的限值，则默认你可以设定一个低限值（如：注射用水规格）。31限值应该为可行的适合待验证的清洁过程可完成的 通过清洁过程 通过目标残留量的分析方法可证实的 通过分析方法证实科学判断的限值

20、建立的基本原理应该记录并符合逻辑32可以使用默认限值吗？审计员可能问什么？为什么选择该限值？你的限值对你的工艺而言安全吗？部分公司采用默认限值 首先，采用科学的判定，获得一个限值 然后，他们可以使用一个低于这个计算限度的默认限度 他们可能采用一个常见限值或简单限值500 ppb（注射用水WFI规格）10 ppm（不超过10ppm）33医药（小分子）非无菌生产典型地对以下成分设定限值：药物活性成分、清洁剂、微生物限度无菌生产典型地对以下成分设定限值：药物活性成分、清洁剂、微生物限度、内毒素更多公司正努力证明总体清洁，不仅是原料药API34生物制药无菌生产典型地对以下成分设定限值蛋白质和降解产物（总有机碳TOC） 清洁剂（电导率）微生物限度内毒素（如：注射用水WFI规格）生物技术的一个关键问题是蛋白质在清洗期间出现降解现象