纯化水检验规程

1、1 目的建立纯化水（代号：E-001）分析方法，规范纯化水的检测操作和结果判定。2 范围 适用于所有取样点纯化水的检测。3 责任 3.1 QC分析员：实施本SOP的内容。3.2 实验室负责人：确保本SOP在QC实验室得到有效实施。4 定义和术语不适用5 程序 5.1 性状：目测，鼻嗅。5.1.1 可接受标准：本品为无色的澄清液体；无臭。5.2 酸碱度（Ch.P）5.2.1 试剂甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4mL使溶解，再加水稀释至200mL，即得。变色范围：pH4.26.3（红黄）。溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠

2、溶液3.2mL使溶解，再加水稀释至200mL，即得。变色范围：pH6.07.6（黄蓝）。5.2.2 检验步骤：取本品10mL，加甲基红指示液2滴，观察颜色变化，应不得显红色；另取10mL，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，观察颜色变化，应不得显蓝色。5.3 亚硝酸盐（Ch.P）5.3.1 试剂稀盐酸：取盐酸234mL，加水稀释至1000mL，即得。对氨基苯磺酰胺（磺胺）的稀盐酸溶液（1100）：取磺胺1g，加稀盐酸使成100mL。盐酸萘乙二胺溶液（0.1100）：取盐酸萘乙二胺0.1g，加水使成100mL。标准亚硝酸盐溶液：取亚硝酸钠0.750g（按干燥品计算），加水溶解并稀释至100mL，摇匀，精密

3、量取1mL，加水稀释成100mL，摇匀，再精密量取1mL，加水稀释成50mL，摇匀，即得（每1mL相当于1g NO2）。5.3.2 检验步骤：取本品10mL，置纳氏管中，加磺胺的稀盐酸溶液1mL及盐酸萘乙二胺溶液1mL，溶液产生的粉红色与标准亚硝酸盐溶液0.2mL，加无亚硝酸盐的水9.8mL，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000002%）。5.4 不挥发物（Ch.P）将待测用蒸发皿置于105干燥箱中恒重，取出后在干燥器中冷却30min，称重；取本品100mL置于该蒸发皿中，水浴上蒸干后，在105干燥至恒重，取出在干燥器中冷却30min后称重，其遗留残渣量应不得过1mg。5.5 氨（

4、Ch.P）5.5.1 试剂碱性碘化汞钾试液：分别取碘化钾10g，加水10mL溶解后，缓慢加入二氯化汞的饱和水溶液，随加随搅拌，至生成的红色沉淀不再溶解，加氢氧化钾30g，溶解后，再加二氯化汞的饱和溶液1mL或1mL以上，并用适量的水稀释使成200mL，静置，使沉淀，即得。用时倾取上层的澄明液应用。氯化铵溶液：取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释至1000mL。5.5.2 检验步骤：取本品50mL，加碱性碘化汞钾溶液2mL，放置15分钟后；如显色，与氯化铵溶液1.5mL，加无氨水48mL与碱性碘化汞钾试液2mL制成的对照液比较，不得更深（0.00003%）。5.6 硝酸盐（Ch.P）5

5、.6.1 试剂硫酸：AR级10%的氯化钾溶液：取氯化钾10g，加水使成100mL。0.1%二苯胺硫酸溶液：取二苯胺0.1g，加硫酸100mL使溶解，即得。标准硝酸盐溶液：取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100mL，摇匀，精密量取1mL，加水稀释成100mL，再精密量取10mL，加水稀释成100mL，摇匀，即得（每1mL相当于1g NO3）。5.6.2 检验步骤：取本品5mL置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4mL与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1mL，摇匀，缓缓滴加硫酸5mL，摇匀，将试管于50水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液0.3mL，加无硝酸盐的水4.7mL

6、，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000006%）。5.7 重金属（Ch.P）5.7.1 试剂7mol/L盐酸溶液：取盐酸63mL，加水适量使成100mL，摇匀。2mol/L盐酸溶液：取盐酸18mL，加水适量使成100mL，摇匀。5mol/L氨溶液：取浓氨水（14.5mol/L）34.5mL，加水适量使成100mL，摇匀。醋酸盐缓冲液（pH3.5）：取醋酸铵25g，加水25mL溶解后，加7mol/L盐酸溶液38mL，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100mL，即得。硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使成100mL，置冰箱中

7、保存。临用前混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15mL、水5.0mL及甘油20mL组成）5.0mL，加上述硫代乙酰胺溶液1.0mL，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。标准铅贮备溶液：称取硝酸铅0.1599g置1000mL量瓶中，加硝酸5mL与水50mL溶解后，用水稀释至1000mL，摇匀。标准铅溶液：当天使用，精密量取标准铅贮备液10mL，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得，当日使用(每1mL相当于10g的Pb)。5.7.2 检验步骤：取本品100mL，加水19mL，水浴蒸发至20mL。放冷，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL和水适量使成25mL，加硫代乙酰胺试液2mL，摇匀，

8、放置2分钟。与标准铅溶液1.0mL加水19mL用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.00001%）。5.8 总有机碳（Ch.P/EP/USP）按总有机碳检查法224-SOP-C测定。5.9 电导率（USP）按电导率测定法223-SOP-C测定。5.10 微生物检测（USP）5.10.1 微生物限度检测：样品组：取1mL纯化水至100mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，混合均匀，并过滤。加入100mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，过滤。用无菌镊子取出滤膜，菌面向上贴于R2A培养基平板上，倒置于20-25的环境中培养5天。阴性对照组：取200mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，过滤。将滤膜菌面向上

9、贴于R2A培养基平板上，倒置于20-25的环境中培养5天。5.10.2 可接受标准：100CFU/mL5.10.3 控制菌检测：大肠埃希菌样品组：取1mL纯化水至100mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，混合均匀，并过滤。加入100mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，过滤。用无菌镊子取出滤膜，接种于90mL胰蛋白胨大豆肉汤培养基中，混合均匀，于3035培养18-24h。阴性对照组：取200mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，过滤。取出膜，接种于90mL胰蛋白胨大豆肉汤培养基中，混合均匀，于3035培养18-24h。阳性对照组：取100mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液过滤，加入100mLpH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，加入菌液（10-100cfu），过滤。接种于90mL胰蛋白胨大豆肉汤培养基中，混合均匀，于3035培养18-24h。选择和分离培养：将培养规定时间后（样品组、阴性对照组、阳性对照组）的胰蛋白胨大豆肉汤培养基从培养箱中取出，摇晃混匀，转移上述预培养物1mL胰蛋白胨大豆肉汤培养基到100mL麦康凯肉汤中，于4244培养2448h。培养结束后，取麦康凯肉汤培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，3035培养1872h。5.10.4 结果判断：若麦康凯琼脂培养基上有菌落生长，根据微生物鉴定613-SOP-C和API鉴定612-SOP-C进行分离、纯化及鉴定，确证是否为大肠埃细菌。若麦