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文档简介

抗原抗体反应,抗原抗体反应是抗原和相应抗体之间所发生的特异性结合反应,这种结合具有高度特异性,它既可以发生在体内,也可以发生在体外。,发生在体内的抗原抗体反应,是机体体液免疫效应的表现方式,具有溶菌、杀菌、中和毒素及调理吞噬的作用。,发生在体外的抗原抗体反应,根据抗原的物理性状(可溶性Ag或颗粒性Ag)及参加反应的物质不同,可分为沉淀反应、凝集反应、中和试验及补体参与的反应等由于抗体都来自于血清,因此,我们将体外的抗原抗体反应又称为血清学反应。,本章讲的抗原抗体反应就是指发生在体外的抗原抗体反应,抗原抗体反应原理,1.Ag、Ab能特异性结合:(内因) Ag、Ab能特异性结合,是由于Ag表位(抗原决定簇)和Ab Fab段(V区)之间的特异性结合,二者在空间结构上是严格互补的。,2.Ag、Ab结合的动力:(外因),静电引力(又称库仑引力): 它是指抗原和抗体分子上带有相反电荷 -NH3+或-COO之间的相互吸引力。 例如Ab分子上赖氨酸离解层中含有 -NH3+,Ag分子上天门冬氨酸离后含有 -COO,这两者之间就可相互吸引而产生静电引力。 该力的大小与两个电荷间距离的平方成反比。距离越近,静电引力就越强。,范得华力(又称电子云力): 该力是原子与原子、分子与分子间所具有的一种吸引力。当Ag、Ab两分子外层轨道上的电子相互作用时,电子云由于偶极摆动而产生吸引力,从而促使Ag、Ab的结合。 该力大小小于静电引力。,氢键: 该力是由于分子中的H原子和电负性较大的O、N、S原子间的相互吸引而形成的。 Ag( -NH2、 -COOH 、-OH 、-SH) Ab ( -NH2、 -COOH 、-OH 、-SH) 可形成氢键桥梁,促使Ag、Ab的结合。 氢键对于维持生物大分子(AgAb)的形态和结构有重要作用。它的大小大于范得华力。,疏水作用力: Ab是蛋白质,Ag少数是多糖,多数也是蛋白质,那么它们就是胶体物质,在水溶液中就带有 -NH3+或-COO极性基团,从而带上正电或负电 ,成为亲水胶体。 当Ag表位和Ab Fab段相互靠近时,亲水层消失,排斥掉两者间的H2O分子,促进Ag、Ab的结合。 疏水作用力在整个Ag、Ab反应中提供的作用最大。,抗原,抗体,抗原抗体复合物(免疫复合物)聚集在一起,亲水胶体,疏水胶体,在高浓度电解质(如NaCl等)存在的条件下,NaCl可先与Ab分子结合(在Ab未与Ag相遇时) ,排斥H2O分子,从而使Ab蛋白质优先沉降,称为盐析现象,由于抗原抗体反应不含有共价键,因此抗原抗体反应不为化学反应,不产生新的物质。 AgAb AgAb,抗原抗体反应特点,1.特异性: Ag、Ab的结合实质上是抗原表位和抗体可变区之间的结合。Ab 可变区可形成一个平穴槽,Ag则楔状嵌入,由于两者在化学结构和空间结构上的互补,使得它们的结合具有特异性。 这种结合如同钥匙与锁的关系,一把钥匙只能开相应的一把锁.,交叉反应,交叉反应(cross-reaction)-抗体对具有相同或相似抗原表位的不同抗原的反应称为交叉反应。,B,A,交叉反应并没有违背Ag、Ab特异性结合的原则,其产生的先决条件是存在共同Ag表位。 交叉反应的意义:1. 免疫学诊断:(利用交叉反应)eg 外斐氏反应等:用变形杆菌OX19、OX2、OXk作抗原查血清抗体,诊断斑疹伤寒(立克次氏体感染所致)2.可造成免疫病理损害:eg 链球菌感染后易导致肾小球肾炎,其原因为链球菌与人体肾小球基底膜有共同Ag表位所致。,2.最适比例:,Ag、Ab的结合并不是在任何比例下都进行得充分、完全的。要形成我们肉眼可见的反应(如沉淀、凝集现象等),就涉及到最适比例问题。以沉淀反应为例:在一排试管中加入等量的Ab,然后依次向各管加入递增量的可溶性Ag,根据形成的沉淀物及抗原抗体比例可见:(图),:Ab过剩区,又称前带,此时,上清液中Ab过剩,大多出现的是可溶性抗原抗体复合物。:Ag过剩区,又称后带,此时,上清液中Ag过剩,大多出现的也是可溶性抗原抗体复合物。:是Ag、Ab合适比例范围,又称等价带。在这一带中,Ag、Ab反应充分,形成的沉淀物快而多;其中有一管Ag、Ab反应速度最快、形成的沉淀物最多,上清液中几乎没有游离的Ag或Ab存在。这时候,抗原抗体之间的比例称为最适比(顶点处)。,这种现象的产生,可以用网(晶)格学说来解释:当Ab过剩时,形成的是小分子复合物, 肉眼看不见;当Ag过剩时,形成的也是小分子复合物,肉眼看不见;当Ag、Ab比例恰当时,形成的是大分子复合物(网格状),肉眼可见。,利用沉淀反应对不同来源的抗血清比较后,发现抗体根据等价带范围不同可分为两种类型:R型抗体:它以家兔免疫血清为代表,具有较宽的抗原抗体合适比例范围,只有在Ag过剩时,才出现可溶性抗原抗体复合物。大多数小动物的免疫血清属于该类型。 H型抗体:它以马免疫血清为代表,抗原抗体合适比例范围较窄,在Ag、Ab过剩时,都可出现可溶性抗原抗体复合物。人和多数大动物的免疫血清属于该类型。,3.可逆性:,Ag、Ab结合形成抗原抗体复合物,这一过程是一个动态平衡,在一定的条件下,反应是可逆的:AgAb AgAb,其主要原因为Ag、Ab结合是非共价键结合,不为化学反应。,抗原抗体反应的影响因素,自身因素: 1Ag:与Ag的理化性质、抗原表位的数目及种类有关; 2. Ab:与Ab的来源有关:是R 型抗体或H 型抗体; 与Ab的特异性、亲合性有关; 与Ab的浓度有关。,外界环境条件:1电解质:一般实验室所用电解质都是生理盐水(0.9% NaCl),浓度不能过高。浓度过高,会使Ab蛋白质优先沉淀而出现盐析现象。 2PH:一般为PH 6-8,当PH3时,可出现颗粒性的非特异性凝集,称酸凝集;当PH过高,可造成碱变性。 3温度:抗原抗体反应的常用温度为37C。,抗原抗体反应的类型,分5大类:沉淀反应;凝集反应;

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