螺旋体ppt课件

螺旋体,第21章,概述,螺旋体特点细长、柔软、螺旋状，运动活泼；原核细胞型微生物；基本特征与细菌相似。介于细菌与原虫之间。,运动特性,有轴丝（内鞭毛或周浆鞭毛），在壁膜之间，沿原生质柱的长轴缠绕其上 运动方式：1、沿长轴旋转，快速前进2、屈曲伸缩前进3、螺旋状或蛇状前进。,抵抗力,抵抗力弱，干燥、日光，煮沸，低浓度的化学消毒剂均可使其很快死亡。钩端螺旋体较其它致病螺旋体抵抗力强,名称 螺旋数 螺旋特点 举例,致病螺旋体的螺旋特点,密螺旋体属 814 规则，细密； 两端尖直,疏螺旋体属 310 不规则,苍白密螺旋体苍白亚种（即梅毒螺旋体）,钩端螺旋体属 数十个 规则，更细密； 一端/两端呈钩状,问号状钩端螺旋体,回归热疏螺旋体 伯氏疏螺旋体,致病螺旋体的分类,属和代表菌 引起人类疾病 传播方式或媒介,密螺旋体属（Treponema） 苍白密螺旋体苍白亚种 梅毒 性传播 苍白密螺旋体地方亚种 地方性梅毒 黏膜损伤 苍白密螺旋体极细亚种 雅司病 皮肤损伤 品他密螺旋体 品他病 皮肤损伤疏螺旋体属（Borrelia） 伯氏疏螺旋体 莱姆病 硬蜱 回归热疏螺旋体 流行性回归热 体虱 赫姆疏螺旋体 地方性回归热 软蜱 奋森疏螺旋体 咽峡炎、牙龈炎 条件致病钩端螺旋体属（Leptospira） 问号状钩端螺旋体 钩端螺旋体病 接触疫水,包括：-问号状钩端螺旋体（L. interrogans）-双曲钩端螺旋体（L.biflexa）,第一节 钩端螺旋体属,一起 洪水型 钩体病 暴发流行 的调查,西南镇 江心洲 居民 种植经济作物、捕鱼和内河运输。有养猪习惯。 1994年67月，江心洲经历一次超50年特大洪水的袭击，30天内连续遭到两次洪水淹没。居民经常接触洪水。,全洲2331人，发病45例，全部病例均有发热，寒战26例，头痛33例，肌痛25例，腓肠肌痛17例，乏力37例，表浅淋巴结肿大29例，眼结合膜充血14例，其它尚有腹痛，腰痛，皮肤粘膜出血，黄疸。22例发现尿蛋白、红细胞、白细胞及颗粒管型，余正常。临床分型：流感伤寒型42例，黄疸出血型2例，肺出血型1例。本次钩体病是洪水后呈暴发性流行，病例集中，水到来后11天，就形成了发病高峰，符合随水而来”洪水型暴发流行。流行原因是无免疫力人群接触了有钩端螺旋体污染的水。从血清学和病原学证实猪是本市钩体病的主要传染源。,（一）形态染色 纤细，螺旋细密、规则，暗视野显微镜下象一串发亮的微细珠粒；一端或两端呈钩状；使菌体呈C、S或8字型；运动活泼，G，不易着染；Fontana镀银染色法染成棕褐色。,一、生物学性状,镀银染色,（二）培养 营养要求复杂，常用含兔/牛血清的柯索夫（Korthof）培养基，适宜生长温度为2830，若1113能生长的为非致病双曲钩端螺旋体 需氧或微需氧； 在人工培养基中生长缓慢。,一、生物学性状,（三）抵抗力 干热抵抗力弱。 对常用消毒剂敏感。 对青霉素敏感。 在湿土或水中可存活数月。,一、生物学性状,（四）抗原分类 问号状钩端螺旋体至少可分为25个血清群、273个血清型，其中我国至少有19个血清群、75个血清型，是血清型最多的国家常见分型： 波摩那群、黄疸出血群、犬群、七日热群 波摩那群分布最广 黄疸出血群（赖型）毒力最强。,一、生物学性状,二、致病性与免疫性,（一）致病物质 1.内毒素 主要致病物质，与G-菌相似，但毒性较低 2.溶血素 溶解红细胞-贫血 出血 黄疸 血尿3.粘附素 能以菌体一端或两端粘附细胞 4.细胞毒性因子(CTF) 注射小鼠，肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。 5. 胶原酶,（二）所致疾病 钩端螺旋体病：人畜共患传染病，动物源性疾病。自然疫源性疾病。流行病学：1、传染源（储存宿主）：鼠和猪2、传播途径：经水传播，黏膜或皮肤侵入 经食物、经胎盘胎儿流产、经吸血昆虫3、流行季节：夏秋季雨季4、流行类型：稻田型（鼠）、雨水/洪水型（猪）,鼠南方稻田型钩体病的主要传染源,猪北方洪水型或雨水型钩体病的主要传染源,流行病学： 5、地区性：三多鼠、猪、水 6、职业性：农民、渔民、矿工、饲养员、牧 民、屠宰工、下水道工人、打猎 者、旅游者等列为易感人群,20岁的生命礼赞,抗洪英雄 李向群,致病性 病情的轻重与钩体的型别和机体的免疫状态有关。,致病机制及临床类型,临床特点 三大症状：寒热、身痛、一身乏 三大体征：眼红、腿疼、淋巴大 是各型早期共有的症候群免疫性 体液免疫为主，病后获得对同型钩体的持久免疫力。,病 例,患男，18岁，农民，主诉：头痛、发烧4天，咳嗽3天。病史：入院前4天在田间劳动时，突然头痛、发烧、周身不适，小腿酸痛。入院前3天开始咳嗽、痰中带血，症状逐日加重。病前曾参加稻田抢收，同村有5人患同样症状疾病。查体：体温41度，脉搏132次/分，呈急性重病容，腹股沟淋巴结肿大、有压痛，腓肠肌压痛阳性，右肺有少许湿罗音。实验室检查：X线胸片，两肺布满模糊之絮状斑影。思考与讨论：患者可能感染了何种病原体？通过什么途径感染的？如何治疗和预防？,三、微生物学检查法,（一）标本采集 发病10天内取血液；2周后取尿液；脑膜刺激者取脑脊液。（二）直接镜检：暗视野、镀银染色（三）分离鉴定 接种至Korthof培养基，置28孵育阳性标本在2周内可见培养液呈轻度混浊；暗视野显微镜检查有动力，则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。,（四）动物接种 敏感方法，尤适用于有杂菌污染的标本。接种于幼龄豚鼠或金地鼠腹腔，35天后用暗视野显微镜检查腹腔液；或36天取心血检查并作分离培养。（五）血清学诊断 病初和发病后第34周各采血清一次。,显微镜凝集试验(MAT)：目前常用 用钩体标准株或当地流行株作型特异性抗原，与病人血清混合，37孵育2 h，暗视野显微镜观察，可见钩端螺旋体凝集成小蜘蛛状。一般效价在1:300以上或晚期血清效价有4倍以上增高有诊断意义。间接凝集试验 可溶性钩端螺旋体属特异抗原，吸附于乳胶或活性炭成为颗粒性抗原，与病人血清中相应抗体作用，可出现肉眼可见的凝集。,（六）分子生物学诊断 DNA探针杂交 用PCR扩增,防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理疏通水道，晒田，不喝生水，不要到动物池塘洗衣服接种多价钩体疫苗： 在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。治疗： 青霉素首选,四、防治原则,第二节 密螺旋体属,密螺旋体分类 苍白密螺旋体（T. pallidum） 苍白亚种(subsp. pallidum)：亦称梅 毒螺旋体，引起人类梅毒。 地方亚种（subsp. endemicum）：引 起非性传播梅毒（污染餐具传播） 极细亚种（subs. perternue）：雅司 病（皮肤损伤受染） 品他密螺旋体（T. carateum） 引起人类品他病本属主要介绍梅毒螺旋体。,梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性系统性疾病。几乎可侵犯人体所有器官，梅毒的临床表现极为复杂，在西方有“模拟大师”（great imitator）之称。1495年梅毒在欧洲广泛流行，约在1505年由印度传入我国广东，当时称为“广东疮”或“杨梅疮”。,男性患者，43岁，已婚，民工。全身及掌跖部位红斑1个月。1月前躯干突然出现红斑，无瘙痒，此后逐渐增多并发展到掌跖部，外用糖皮质激素软膏无效。1年来有婚外性伴，2月前曾有包皮糜烂，无明显疼痛，自行好转。 皮肤科情况：躯干、四肢对称分布玫瑰色斑疹，圆形或椭圆形，散在而不融合；双掌跖可见大小不一的大量鳞屑性环状斑疹。腋窝、腹股沟淋巴结无明显肿大。 实验室检查：RPR阳性，滴度164,案例,（一）形态染色 814个致密而规则的螺旋，两端尖直。运动活泼，圆柱体表面绕有34根周鞭毛，与运动有关。 普通染色不易着色，常用Fontana镀银染色法，菌体染成棕褐色且变粗。,一、生物学性状,（二）培养特性 目前人工培养方法尚未真正成功。 接种兔睾丸或眼前房，兔睾丸活体培养，但生长缓慢，多用来保存菌种；家兔上皮细胞中能有限生长，繁殖慢，约30h分裂一次。（三）抵抗力 抵抗力极弱，对冷、热及干燥特别敏感；血液中的螺旋体4放置3天后死亡，故冷藏3天以上的血液无传染梅毒的危险。,（一）致病因素 1.荚膜样物质 为酸性粘多糖，具有抗吞噬作用 2.主要外膜蛋白 粘附作用，激活人皮肤微血管内皮上的血管粘附分子-1（VCAM-1）和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达，促进T细胞增殖，释放炎症因子（TNF-和IL-1）。 3.透明质酸酶 分解透明质酸有利于扩散并造成组织损伤。,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病：人是唯一传染源，据感染方式分 1.先天性梅毒 亦称胎传梅毒，易致流产、早产或死胎；也可致先天畸形，出生后被称为梅毒儿，常呈锯齿形牙、间质性角膜炎、神经性耳聋等症状。,染梅毒初生儿被弃 专家称可恢复健康,先天性梅毒皮肤黏膜损害,2.后天性梅毒：性接触传播 分三期 I期梅毒： 侵入皮肤黏膜3周后，外生殖器无痛性硬性下疳，直径约1cm。含有大量梅毒螺旋体，此时传染性极强。48周自愈。入血潜伏。23个月无症状潜伏期后进入第二期。,II期梅毒：传染性强，破坏性小。全身皮肤黏膜出现梅毒疹，周身淋巴结肿大，13个月后自愈，可复发，经24年，又可被激活进入第三期。,III期（晚期）梅毒：传染性小，破坏性大。感染2年（亦可达1015年）后，可侵犯内脏器官或组织，出现慢性肉芽肿病变。重症心血管及中枢神经病变，梅毒瘤、动脉瘤、脊髓瘤。,（三）免疫性 1.以细胞免疫为主。 2.传染性免疫： 当体内持续有螺旋体存在时， 对再感染有免疫力，一旦螺旋 体被杀灭，其免疫力亦随之消失。 3.产生两类抗体 特异性制动抗体 反应素：非特异性抗体，能与 生物组织中的类脂抗原（如牛心肌） 发生非特异性结合反应，可利用其进 行血清学诊断。,（一）标本采集 期梅毒：硬下疳渗出液 期梅毒：梅毒疹渗出液或局部淋巴结 抽出液 （二）显微镜检查 暗视野显微镜观察螺旋体的动力和形态 Fontana镀银染色法（三）血清学诊断,三、微生物学检查法,非特异性：非密螺旋体抗原试验 抗原（牛心肌心脂质）测血中的抗脂质抗体适用于：大量过筛方法：性病研究实验室的玻片实验法（veneral desease research laboratory, VDRL ） 和快速血浆反应素试验（rapid plasma reagin, RPR试验）。特异性：密螺旋体抗原试验 抗原（Nichols株螺旋体）螺旋体特异性抗体 优点：特异性强，可用作梅毒证实试验 方法：FTA-ABS、TPI、MHA-TP试验,三、微生物学检查法,预防：加强性卫生教育和严格社会管理。治疗：梅毒确诊后，宜用青霉素等药物及 早予以彻底治疗。治疗原则：早期，足量，正规。,四、防治原则,有310个稀疏而不规则的螺旋，运动活泼。 对人致病的主要有伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体、奋森螺旋体等。,第三节 疏螺旋体属,莱姆病的主要病原体。 1977年在美国莱姆镇（Lyme, a town of southeast Connecticut, USA）发现，从硬蜱及患者体内分离出伯氏疏螺旋休。 1985年我国在黑龙江省林区首次发现莱姆病，1988年从病人血液中分离出病原体，迄今已有十多个省和自治区证实。,一、伯氏疏螺旋体,（一）形态染色 两端稍尖，运动活泼，周浆鞭毛数不 等，与运动有关。 Giemsa或Wright染色均佳。,一、生物学性状,革兰染色,Wright染色,（二）培养特性 BSK培养：该培养基含长链饱和与不饱和脂肪酸、氨基酸、牛血清白蛋白及热灭活兔血清等丰富的营养物质。 微需氧，510CO2促进生长。分裂繁殖一代需1218 h。一般培养23周，长出细小而边缘整齐的小菌落。（三）分类 根据DNA-DNA同源性及16S rRNA基因序列分析结果，可将菌株分为10个不同基因种。,（一）致病性 能选择性吸附在胶原纤维相关的核心蛋白多糖。 在体外，它们能与整合素、锚定蛋白、粘多糖相结合。 在体内，表达脂蛋白能激活多种细胞，引起剧烈的炎症反应。,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病 莱姆病 经330天潜伏期，在叮咬部位可出现慢性移行性红斑（erythema migrans）。经23周，皮损消退，留有斑痕与色素沉着。 早期症状表现为乏力、头痛、发热、颈硬及关节炎等。晚期症状主要表现为慢性关节炎、神经系统与皮肤异常、心内膜炎等。,二、致病性与免疫性,（三）宿主及传播媒介 蜱（tick）： 在美国主要是肩突硬蜱和太平洋硬蜱，在欧洲主要是蓖子硬蜱，我国北方林区主要是全沟硬蜱。,二、致病性与免疫性,慢性移行性红斑,ELISA 方法简便，特异性和敏感性较高，为多数实验室所采用。 特异性IgM的主要靶抗原是表面蛋白（21 kDa和35 kDa）和鞭毛抗原（37 kDa和41 kDa），IgG抗体的靶抗原则为鞭毛蛋白（37 kDa和41 kDa）和外膜蛋白C（OspC，21 kDa）。 IFA PCR,三、微生物学检查法,疫区人员加强个人防护，避免硬蜱的叮咬。 灭活疫苗于1992年获准在美国家犬中使用。 人用重组蛋白疫苗（OspA、OspC）正在临床试验中。 早期莱姆病可口服四环素、强力霉素、羟氨苄青霉素及红霉素等。 晚期莱姆病由于多种深部组织损害，故一般用