g试验与gm试验ppt课件

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版副标题样式* 1*G试验与 GM试验微生物室范会侵袭性真菌病 (invasive fungal disease, IFD)l 概念： 又称侵袭性真菌感染，是指真菌侵入人体组织、血液，并在其中生长繁殖导致组织损害、器官功能障碍和炎症反应的病理改变及病理生理过程。侵袭性真菌感染因素增加真菌感染的诊断诊断标准由危险因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学检查 4部分组成。根据真菌感染的可能性将诊断结果分为三个级别 : 确诊、拟诊和疑似。真菌感染的诊断l 临床特征 -特异性？l 影像学 -特异性？l 真菌涂片、培养 -特异性？敏感性？时间l 病理 -特异性！敏感性？l 早期、快速、特异、敏感、采样方便l G试验与 GM试验G试验检测范围l 检测底物：（ 1-3） -D葡聚糖l 诊断：侵袭性真菌感染（ IFD）l 检测频率：每周一至周五l 真菌细胞壁成分：念珠菌、曲霉、镰刀霉、毛孢子菌、卡氏肺孢子菌、支顶孢、组织胞浆菌等l 不能检测：结合菌（毛霉、根霉）、隐球菌G试验原理 -反应特异性G试验 -国产检测方法l 国产： MB-80（金山川）. 动态浊度法. cut-off：阴性 10ug/ml，中介 10-20ug/ml，阳性 20ug/ml，儿童阳性 50ug/mll 国产：湛江安度斯生物有限公司. 动态比色法. cut-off：阴性 100.5pg/ml，中介 100.5-151.5pg/ml，阳性 151.5pg/mll 标本：血浆G试验 -试剂盒l 鲎试剂来源：东方鲎、美洲鲎l 检测方法：动态比浊法、动态比色法l 试剂反应性不同，检测结果不同， cut-off值不同l 30名 AML、 MDS念珠菌血症患者l 连续 2次 G试验阳性，可提高特异性、 PPV（阳性预测值）l 确诊或拟诊 IFD，平均比临床症状出现早 10dG试验 -影响因素l 假阳性：. 抗肿瘤准备：蘑菇多糖、裂褶菌多糖. 免疫准备：白蛋白、球蛋白. 血透使用纤维素膜. 手术中使用棉纱垫、棉拭子等. 脂肪乳等l 假阴性：. 棘白菌素类：抑制 BDG合成G试验 -小结l 无热源采血管、清洁的检测环境l 高 NPV，连续 2次 G试验阳性，可提高特异性和 PPVl IFD早期诊断. 比出现临床症状体征早约 10天. 比 HRCT改变早约 9天l 敏感性与感染程度（真菌负荷量）相关l 念珠菌定植不引起 G试验升高l 动态反应感染程度和抗真菌治疗疗效l 儿童 BDG水平高于成人lGM试验GM试验l 诊断：侵袭性曲霉菌感染（ IA）l 检测底物：半乳甘露聚糖. 曲霉细胞壁成分. 菌丝在组织中生长时释放. 热稳定. 可溶性： serum、 BALF、 CSFl 检测频率：一周两次GM试验 -方法及原理l 伯乐试剂. 原理：双抗体夹心法，采用小鼠单克隆抗体 EBA-2，检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。l 天津贻诺琦. GM试验 -临床价值l 曲霉菌定植时很少释放入血，因此有利于鉴别侵袭与定植l GM释放量与菌量成正比，可反映感染程度l 连续检测 GM试验可作为治疗疗效的监测l 在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高l 非特异交叉反应：青霉较多、隐球菌GM试验 -27项研究荟萃分析l 推荐用于恶性血液肿瘤和 HSCT(造血干细胞移植 )受体l 不推荐用于 SOT（实体器官移植）受体GM试验 -假阳性l 抗菌药物：哌拉西林 -他唑巴坦. 采样：用药前，或药物浓度最低时l 高剂量使用激素l 透析：不能清除大份子 GMl 化疗的严重黏膜炎的患者. 谷类食物中的 GM抗原通过肠道入血l 儿童和新生儿：假阳性占 83%. 母乳或配方食品中双歧杆菌与 GM有交叉反应l 交叉反应真菌：青霉、拟青霉、隐球菌、头状地霉、组织胞浆菌等GM试验 -假阴性l 抗真菌药物. 三唑类 -降低 GM水平. 米卡芬净 -升高 GM水平（能够破坏真菌细胞壁，但不能清除）l 低侵袭性曲霉菌病l 低曲霉负荷量GM试验 -小结l 早期、快速、 高特异性l GM水平反映曲霉负荷量l 推荐用于恶性血液肿瘤、 HSCT患者l IPA可考虑 BALF标本，并适当提高折点l 曲霉脑病可考虑 CSF标本l 动态变化 指导抗真菌药物使用l 结合患者 临床情况 进行分析G+GM-缩小病原谱病例一l 男性， 55岁，因 “反复喘息发作 31年，复发伴发热 1月 ”入院l 既往史：支气管哮喘，过敏性鼻炎，糖尿病l 查体： 37.6 ，双肺散在哮鸣音，未及湿罗音l 实验室检查：l -血常规： WBC 10.6109/L,N 51.5%,E 15.2%l -ESR 78mm/h,CRP 94.9mg/Ll -PPD皮试（ -）l -血 ANA（ -）l -血清 GM测定：阳性（ 3.1930.5）l -痰真菌涂片及培养（ -），细菌培养（ -），抗酸（ -）l -肺功能：重度阻塞性通气功能障碍，低氧血症，支气管扩张试验（ -）l 诊断：过敏性支气管肺曲霉病（ ABPA）l 治疗及转归：抗炎、解痉、化痰、平喘，伊曲康唑 +甲强龙静脉滴注；治疗后第三天出黑黄色痰栓，此后痰量渐少，气急好转，疗程两周后改伊曲康唑口服，激素递减。病情稳定后出院l 治疗后化验l -血常规： WBC 6.0109/L,N 86.5%,E 0%l -ESR 7mm/h,CRP 2.7mg/L病例二l 肝炎，右肺实变，右胸腔积液l 支气管镜做细菌、 TB、真菌，血培养结果均阴性l 8月 20日. 痰涂片：在中性粒细胞内可见革兰阳性球菌少量. 痰培养：光滑念珠菌. 治疗：特治星 +万古霉素. PCT 7.9ng/mlPCT(ng/ml)变化情况l WBC内可见革兰阳性球菌 +光滑念珠菌 不能脱机l 8月 2