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第 19章 支原体Mycoplasma微生物学教研室概念:支原体是一类 缺乏细胞壁 的原核细胞型微生物,也是在 无生命培养基上生长繁殖的 最小 微生物 。其特点为细胞膜含固醇,能通过细菌滤器;高度多形性、形成分枝的长丝;含 DNA和 RNA,二分裂繁殖等。柔膜体纲支原体目支原体科 无胆甾原体科 螺原体科支原体属 脲原体属主要病原性支原体n 肺炎支原体 M.pneumoniaen 人型支原体 M. Nominisn 生殖器支原体 M.genitaliumn 穿透支原体 M . penetrausn 溶脲脲原体 U.urealyticum第一节 概 述一、生物学性状1. 形态结构最小的原核细胞生物;球形、球杆形、长丝状及分枝状等 多种形态;G-,着色困难,常用 Giemsa染色法染成淡紫色。特殊的顶端结构 :粘附宿主上皮细胞表面,与支原体的致病有关。2. 培养特性 :荷包蛋样菌落培养基中含人或动物的血清 (1020%)及酵母浸液。多数支原体能在鸡胚绒毛尿囊膜或细胞培养中生长。固体培养基:2 7天长出直径约 10 600m的典型的 “ 荷包蛋样 ” 菌落 :低倍镜下见菌落呈圆形,心致密隆起,深入琼脂,外周由颗粒包绕。液体培养基:清亮需用放大镜需用放大镜 /低低倍显微镜观察倍显微镜观察支原体是污染细胞培养的重要原因之一鉴别点 支原体 细菌 L型细胞壁缺失原因 在遗传上与细菌无关 与原菌相关,可以回复细胞膜 含高浓度固醇 细胞膜不含固醇 培养特性 需要胆固醇 大多需要高渗培养 菌落大小 生长慢,菌落小 菌落稍大 ( 0.61.0) 液体培养 液体培养混浊度极低 一定混浊度,可附壁支原体与细菌 L型的异同点n 不同点缺乏缺乏 细细 胞壁,形胞壁,形 态态 多多 样样 ,能通,能通 过滤过滤 菌器。菌器。固体培养固体培养 菌落呈荷包蛋菌落呈荷包蛋 样样 或或 颗颗 粒状。粒状。临临 床表床表 现现 相似相似 间质间质 性肺炎、泌尿生殖道感染、不育性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等等n 相同点支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性肺炎支原体 + 红细胞 肺炎、支气管炎人型支原体 + 泌尿生殖道感染生殖器支原体 + 泌尿生殖道感染穿透支原体 + + 红细胞 条件感染CD4+T细胞 多见于艾滋病巨噬细胞 溶脲脲原体 + 泌尿生殖道感染 流产及不孕不育3、生化反应溶脲脲原体分解尿素产氨,是酚红变红,液体清亮,为阳性(右)(四) 抗原结构 来自细胞膜,胞膜外层蛋白质是主要抗原,常用生长抑制试验 (GIT)与代谢抑制试验(MIT)鉴定。GIT是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上, 经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现象。MIT是将支原体接种在含有抗血清培养基中,若抗体与支原体型一致,则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。(五)抵抗力(五)抵抗力 对对 脂溶剂化学消毒剂敏感,对结脂溶剂化学消毒剂敏感,对结晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力;晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力; 对影响细胞壁合成的抗生素如青对影响细胞壁合成的抗生素如青霉素类天然耐受,但对干扰蛋白霉素类天然耐受,但对干扰蛋白质合成的抗生素如强力霉素等敏感。质合成的抗生素如强力霉素等敏感。二、致病性与免疫性顶端结构与宿主细胞上受体结合而粘附于细胞上荚膜或微荚膜的抗吞噬作用产生毒性代谢产物超抗原,刺激炎症细胞分泌大量细胞因子粘附、侵入 CD4 T淋巴细胞(穿透支原体)免疫性免疫性体液免疫:抗膜蛋白的抗体包括体液免疫:抗膜蛋白的抗体包括IgM、 IgG和和 SIgA细胞免疫细胞免疫 :主要是特异性:主要是特异性 CD4 Th1细胞分泌细胞因子细胞分泌细胞因子 第二节 主要致病性支原体一 肺炎支原体n是下呼吸道重要的致病性支原体,所引起的人类支原体肺炎占细菌性肺炎 50%左右,其病理变化以间质性肺炎为主,又称之原发性非典型性肺炎。症状轻,与胸片严重程度不符(一)致病性1.主要经飞沫传播, 但大多数发生于夏末秋初, 5 15岁青少年发病率最高 。2.含特殊的顶端结构 : P1表面蛋白( 170 kDa)和 P30( 32 kDa)为主要的粘附蛋白,使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。3.肺炎支原体具有超抗原作用,能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(如 TNF-、 IL-1、 IL-6)引起组织损伤 。致病性与免疫性所致疾病 -支原体肺炎n 传播途径 n 经飞沫传播n 发病年龄 n 儿童及青少年多见n 潜伏期 2 3Wn 临床表现n 发热(约 39 )、头痛、 持续性顽固咳嗽 、胸痛等。一般经 3 10d主要症状消失,但咳嗽可以持续 1个月之久。免疫性免疫性血清特异性血清特异性 IgM、 IgG及及 SIgA和致敏的和致敏的淋巴细胞淋巴细胞 ;呼吸道局部黏膜产生的呼吸道局部黏膜产生的 SIgA对防止再对防止再感染有较强保护作用感染有较强保护作用 ;出现出现 IgE介导的介导的 I型超敏反应,促使哮型超敏反应,促使哮喘病急性发作喘病急性发作 (一)分离培养痰或咽拭子接种在 SP-4培养基,挑选可疑菌落 ,经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定,进一步鉴定需用特异性抗血清做 GIT与 MIT实验。三、微生物学 检查 法三、微生物学 检查 法(二)血清学检查(二)血清学检查冷凝集试验冷凝集试验 :即用病人血清与人即用病人血清与人 O型血型血 红细胞红细胞 或自或自身身 红细胞混合,红细胞混合, 4 过夜时可发生凝集,过夜时可发生凝集,而在而在 37 时时 这种凝集又分散解离开,但这种凝集又分散解离开,但仅

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