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常用的 细 菌染色方法 革 兰 染色抗酸染色细 菌基本形 态结 构 观 察细菌染色意义 由于细菌个体微小，基本上无色透明，故将其用适当染料染色观察，方能显示它的形态、大小、构造及染色特性等，在细菌鉴别上有重要意义。 革兰染色是细菌学中使用最广泛的一种染色方法，籍此染色法，可将所有细菌区分为两大类。细菌染色方法及原理常采用美蓝，结晶紫等碱性染料进行染色。多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型：碱性染料（ basic dye） 带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。 酸性染料（ Acid dye） 带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。革 兰 染色原理 细菌的等电点较低，约在 pH 2 5之间，故在中性、碱性或弱碱性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷，易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合，使细菌被染成紫色或红色。一、细菌染色标本片的制备 细菌染色检查，首先要进行细菌标本制备。制备细菌标本一般包括涂片、干燥、固定三步。固定的目的和方法 使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘得更牢固 可改变菌体对染料的通透性 加热固定可杀死细菌，比较安全 固定的方法将制成的标本匀速通过火焰三次革 兰 染色 染色： 初染 （结晶紫） 媒染 （碘液） 脱色 （酒精） 复染 （复红） 滤纸 吸干 油 镜镜检safraninCrystal violet染色步骤 结晶紫初染结晶紫初染 卢戈碘液媒 卢戈碘液媒 染 乙醇脱色 复红复染（）（）（）（）分 钟 水洗分 钟 水洗秒 水洗秒 水洗吸干Germ is stained violet or red结晶紫初染分钟 水 洗 碘液媒染 分钟 水 洗酒精脱色 秒 水 洗复红复染 秒 水 洗 滤纸 吸干 油 镜镜检抗酸染色法 (acid-fast stain) 分枝杆菌属的细菌（包括结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等）为抗酸性细菌，一般染色法不易着色，须用抗酸染色法。 注意事项涂片 要 略厚 加温染色或延长染色时间，加温时随时补加染色液分枝杆菌呈 红 色 (+)其他 细 菌和背景 为蓝 色 (-)。操作 过 程取痰液 涂片（略厚） 干燥 固定 石炭酸复 红 加温 染色 810分 钟 后 用 3%的 盐 酸酒精脱色 约 12分 钟 ，脱色 时轻摇 玻片，直到涂片 颜 色脱去 为 止水洗后，用碱性美 蓝 复染 1分 钟 水洗，印干 镜检形态：细长，略弯曲的杆菌，多聚集成团。无鞭毛 ,芽胞。染色性：不易着色，抗酸染色阳性。菌体呈红色，背景中其他物质蓝色。结核分枝杆菌 (M.tuberculosis)细 菌基本形 态结 构 观 察 基本形态 球菌 杆菌 弧菌 特殊结构 芽孢 枯
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