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  • 简介:HPLC 培训教程 高 效 液 相 色 谱 我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表: 数量 方法 项目 1985 年版 1990 年版 1995 年版 2000 年版 鉴别 9 34 150 检查 12 40 160 HPLC 法 含量测定 7 60 117 387 鉴于 HPLC 应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用 HPLC。 I.概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase) 中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase) 发生作用(吸附、分配、离子
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  • 简介:§5 气相色谱法原理Gas Chromatography,教学目的: 1.掌握色谱法的基本原理,概念和踏板理论,速率理论 2.了解色谱法的定性,定量测定方法 3.了解GC的特点 4.了解气相色谱仪的组成 5.掌握如何选择分离操作条件 6.了解GC的应用 7.掌握有关计算 重点: 踏板理论,速率理论,分离操作条件,检测器 学时:6学时,§3-1 概述,3.1.1. 色谱法:一种分离技术 1. 由俄国植物学家Tsweett创立 2.原理 使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动 的(固定相),另一相(流动相)携带混合物流过此固定相,与固 定相发生作用,
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  • 简介:气相色谱分析方法的建立步骤在实际工作中,当我们拿到一个样品,我们该怎样如何定性和定量,建立一套完整的分析方法是关键,下面介绍一些常规的步骤:1、样品的来源和预处理方法GC 能直接分析的样品必须是气体或液体,固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂中,而且还要保证样品中不含 GC 不能分析的组分(如无机盐),可能会损坏色谱柱的组分。这样,我们在接到一个未知样品时,就必须了解的来源,从而估计样品可能含有的组分,以及样品的沸点范围。如能确认样品可直接分析。如果样品中有不能用 GC 直接分析的组分,或样品浓度太低,就必须进行必要的预处理,包括采用一些预分离手段,如各种萃取技术、浓缩和稀
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  • 简介:1407 高效液相色谱技术(HPLC)高效液相色谱(HPLC:High  Performance Liquid Chromatography )是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术,是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。国际市场调查表明,高效液相色谱仪在分析仪器销售市场中占有最大的份额,增长速度最快。高效液相色谱的优点是:检测的分辨率和灵敏度高,分析速度快,重复性好,定量精度高,应用范围广。适用于分析高沸点、大分子、强极性、热稳定性差的化合物。其
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  • 简介:高效液相色谱仪原理及应用实验指导书贵州大学精细化工研究开发中心(绿色农药与生物工程重点实验室)1. 实验类型:设计型实验(研究性实验)2. 课时安排:6 课时3. 实验目的和意义:通过学习高效液相色谱仪的构成和使用方法,及其在定性、定量分析中的应用,培养学生严谨的科学态度、细致的工作作风、实事求是的数据报告和良好的实验习惯(准备充分、操作规范,记录简明,台面整洁、实验有序,良好的环保和公德意识) 。培养培养学生的动手能力、理论联系实际的能力、统筹思维能力、创新能力、独立分析解决实际问题的能力、查阅手册资料并运用其数据资料的能力以及归纳总结的能力等。4. 实验原理高效液相色谱
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  • 简介:气相色谱仪原理色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。 色谱法的最早应用是用于分离植物色素,其方法是这样的:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。此时,玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗,随着石油醚的加入,谱带不断地向下移动,并逐渐分开成几个不同颜色的谱带,继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素,并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 现在的色谱法早已不局限于色素的分离,其方法也早已得到了极大的发展,但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。 一、
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  • 简介:酵母RNA的提取及组份鉴定与核酸的定量测定,目的要求,(1)了解并掌握稀碱法提取RNA的原理和方法。 (2)了解核酸的组分并掌握其鉴定方法。 (3)学习紫外线(UV)吸收法测定核酸浓度的原理。,实验原理,由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也很各异。一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中。向水层加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析出,此法能较好的除去DNA和蛋白质。上述方法提取的RNA具有生物活性。工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA,用这两种方法所提
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  • 简介:实验  酵母 RNA 的提取及组份鉴定与核酸的定量测定 【课前预习】1. 为什么用稀碱溶液可以使酵母细胞裂解?2.如何从酵母中提取到较纯的 RNA?3.干扰 RNA 的提取的物质有哪些并设计排除这些干扰的实验。4.干扰紫外线(UV)吸收法测定核酸浓度实验的物质有哪些?【目的要求】1. 了解并掌握稀碱法提取 RNA 的原理和方法。2. 了解核酸的组分并掌握其鉴定方法。3. 学习紫外线(UV)吸收法测定核酸浓度的原理。【基本原理】由于 RNA 的来源和种类很多,因而提取制备方法也很各异。一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用
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  • 简介:果蔬维生素C含量测定及其分析,目的要求,要求学生在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上,在教师指导下,根据实验室条件,完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。培养动手能力,分析解决问题的能力和创新思维。,实 验 原 理,维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,缺少它时会产生坏血病,因此又称为抗坏血酸(ascorbic acid)。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近年来,发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力,并具有化学致癌物的阻断作用。,实验原理,维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。水果中以猕猴桃含量最多,在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰
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  • 简介:果蔬维生素C含量测定及其分析,目的要求,要求学生在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上,在教师指导下,根据实验室条件,完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。培养动手能力,分析解决问题的能力和创新思维。,实 验 原 理,维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,缺少它时会产生坏血病,因此又称为抗坏血酸(ascorbic acid)。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近年来,发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力,并具有化学致癌物的阻断作用。,实验原理,维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。水果中以猕猴桃含量最多,在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰
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  • 简介:实验  果蔬维生素 C 含量测定及其分析【课前预习】1.为了测得准确的维生素 C 含量,实验过程中都应注意哪些操作步骤?为什么?2.试简述维生素 C 的生理意义。【目的要求】 要求学生在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上,在教师指导下,根据实验室条件,完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。培养动手能力,分析解决问题的能力和创新思维。【基本原理】维生素 C 是人类营养中最重要的维生素之一,缺少它时会产生坏血病,因此又称为抗坏血酸(ascorbic  acid)。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近
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  • 简介:实验      蛋白质的定量测定方法,【实验预习】      1.试比较Folin酚法与考马斯亮蓝染料结合比色法的优缺点。      2 .试比较二喹啉甲酸法与Folin酚法的优缺点。      3.凯氏定氮法中在消化样品时,加入浓硫酸,硫酸钾和硫酸铜粉末的目的是什麽?     4.紫外吸收法测
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  • 简介:【实验预习】      1.试比较Folin酚法与考马斯亮蓝染料结合比色法的优缺点。      2 .试比较二喹啉甲酸法与Folin酚法的优缺点。      3.凯氏定氮法中在消化样品时,加入浓硫酸,硫酸钾和硫酸铜粉末的目的是什麽?     4.紫外吸收法测定蛋白质含量的原理是什麽?,实验   蛋白质的定量测定方法,一、Folin
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  • 简介:实验   蛋白质的定量测定方法【实验预习】1.试比较Folin酚法与考马斯亮蓝染料结合比色法的优缺点。2.试比较二喹啉甲酸法与Folin酚法的优缺点。3.凯氏定氮法中在消化样品时,加入浓硫酸,硫酸钾和硫酸铜粉末的目的是什麽?4.紫外吸收法测定蛋白质含量的原理是什麽?一、Folin酚试剂法(Lowry法)【实验目的】1.学习Folin酚试剂法测定蛋白质含量的原理。2.掌握Folin酚试剂法测定蛋白质含量的方法和操作。【实验原理】蛋白质中含有酪氨酸和色氨酸残基,能与Folin酚试剂起氧化还原反应。反应过程分为两步,第一步:在碱性溶液中,蛋白质分子中的肽键与碱性
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  • 简介:酵母RNA的提取及组份鉴定与核酸的定量测定,目的要求,(1)了解并掌握稀碱法提取RNA的原理和方法。 (2)了解核酸的组分并掌握其鉴定方法。 (3)学习紫外线(UV)吸收法测定核酸浓度的原理。,实验原理,由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也很各异。一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中。向水层加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析出,此法能较好的除去DNA和蛋白质。上述方法提取的RNA具有生物活性。工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA,用这两种方法所提
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