山风组培苗生产技术规程（征求意见稿）

38 西壮族自治区 地方标准  5/T 2017 山风 组培苗生产技术规程  征求意见稿）  2017 -  布  2017 -  施  广西壮族自治区质量技术监督局    发布   2017 I 前   言  本标准按照  2009 给出的规则起草。  本标准 由广西壮族自治区卫生 和计划生育委员会 提出。  本标准由广西 卫生 标准化技术委员会归口。  本标准起草单位：广西壮族自治区药用植物园。  本标准主要起草人 ：    2017 1 山风组培苗生产技术规程  1 范围  本标准规定了 山风 （ C.）组培苗生产的术语 与 定义、 组培苗生产 技术、 营养袋（杯）苗生产技术 、 包装与运输和生产档案。  本标准适用于广西壮族自治区 境 内 中药材山风 组培苗的生产。  2 规范性引用文件  下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文 件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。  095  环境空气质量标准  285  农药安全使用标准  084  农田灌溉水质标准  国家药品监督管理局第 32 号令（ 2002 年）  中药材生产质量管理规范（试行）  3 术语 与 定义  下列术语 与 定义适用于本 标准 。   组培 （瓶） 苗  应用植物 组织培养 技术，以植物组织 或器官 为外植体，无菌接种于培养基，在适宜 的 光温条件下，依次经一定时间的无菌 丛生芽 诱导、继代和生根培养，再经过一段时间的 炼苗移栽 而生成的 幼苗 。  继代苗  将诱导产生的芽、苗、愈伤组织 或 胚状体 等培养物重新分割 ， 接种到新鲜培养基上进一步扩大培养而生成的幼苗。  营养袋（杯）苗  将组培 苗 经炼苗后移栽于营养袋（杯）中，经过一段时间的生长而 生 成具有完整根茎叶结构的幼苗。  4 组培苗生产 技术  植体来源  选择 物种鉴定准确 、来源清楚、健壮、无病虫危害、性状稳定的 山风 植株。   2017 2 植体采集  间  连续晴天 2 午 9时 11时。  位  带 顶芽 或 腋芽的 嫩茎 ， 长 5 10  录  填写采集记录表， 记 录采集号、采集地点、生长环境、采集时间、采集人，建立 外植体采集 信息档案 ， 见附录 A。  植体 保存  通常 即 采即用。 保存时间 超 过 1 h， 用干净湿润 的纸或纱布 包 裹 保湿或置于冰壶 保存 。  植体 灭菌  处理  将外植体 剪 成 2 3 置于 烧杯中，用 洗洁精溶液浸泡 10 期间用毛笔 轻 轻 刷洗，流水冲洗 15 可进行 灭菌 。  菌  在超净工作台上， 用 75 酒精浸泡外植体 5 s 10 无菌水清洗 1次 ， 再用 氯化汞浸泡，搅拌 8 然后 用无菌水清洗 3次 4次， 用 无菌滤纸吸干表面水分 后，将材料切成 带顶芽或一个腋芽的茎段 (约长 0.5 注意切去接触 过 氯化汞溶液的带 伤口茎段 。  植体接种  在超净工作台上，将已 灭菌 的带 顶芽或 一个 腋芽 的 茎段斜插入诱导培养 基 中， 见附录  培苗培养  养 条件  初代和继代增殖培养的基本培养基为 根培养的基本培养基为 1/2 养基均附加 糖和 琼脂， 制分装后，于 121 灭菌 20 养条件为 26 、光照强度 2 000 照时间 10 h/d。  代诱导培养  在超净工作台上， 将已 灭菌 的外植体接种到诱导培养 基 中 ， 见附录 每瓶接种 3个外植体 。培养 7 d 15 待外植体诱导出的丛生芽长至约 5  代培养  在超净工作台上， 将初代 诱导培养长出的 丛 生 芽分 割 成 含顶芽或一个腋芽的茎段 ， 转接到 增殖培养基 上， 见附录 每瓶接 种 3个 5个 茎段 。继代培养周期 20 d。   2017 3 根培养  在超净工作台上， 挑选继代 苗中叶片展开、生长健壮、 株 高 2 单芽 转接 于生根培养基 上，见附录 瓶接种 2株 5株 ， 15 根系长 1.0  可开盖炼苗 。  5 营养袋（杯）苗生产技术  地要求  环境空气质量 应符合 095 的规定，灌溉水的使用应符合 084 的规定 。  质  选取 炭土 3:1） 为基质。移栽前 24 h 48 高锰酸钾 溶液 进行消毒。  器规格  营养袋（杯） ，规格 为 7 10  12  栽前炼苗  将 组培 瓶苗 移至大棚 或 温室 内炼苗 3 d 5 打 开 瓶 盖继续炼苗 2 d 3 d，打开瓶盖后注意早晚喷雾以防止组培苗萎蔫。  培 苗移栽   栽时间  春季、初夏或秋季。  苗  用 自来 水漂洗干净组培瓶苗根部残留的培养基。  栽  将 组培 苗栽入营养袋（杯）基质中间，轻压根部，淋透定根水， 应确 保根不外露，根土密接，植株固定不倒 。  常管护  湿度条件  温度 20 28 。移栽后 30 d 内，空气相对湿度保持在 85 90 ，以后 保持 在 65 70 ，晴天需用遮光度 50 的遮阳网遮 荫 。  肥  组培 苗 长出新叶起 ， 每隔 7 d 10 的 含氮 叶面 肥 1次。 遵循先稀 后浓，勤施薄施的原则。  要病虫害防治   2017 4 按 285的规定执行，移栽初期每隔 20 d 30 次，并根据病虫害状况针对性防治。  圃苗规格  当 幼苗长出 5片 以上 新叶 ，且 生长健壮、无 检疫对象范围 内病虫 为 害即符合出圃要求 。  6 包装与运输  培瓶苗  将 经过开盖炼苗的 组培瓶苗 清洗干净 根部 培养基后 ，整齐 装入 保鲜盒或塑料泡沫箱内，并加胶带密封 。 长途运输应有保湿、降温、防风、防晒、防雨措施 。 运输环境温度 15 30 ， 避免 阳光直射和剧烈颠簸， 装运 时间不超过 48 h。  养袋（杯）苗  将 营养 袋（杯）苗装入竹筐或塑料筐内， 装运时应有序叠放 。 长途运输应有保湿、降温、防风、防晒、防雨措施 ，宜在阴天或夜间运输， 装运时间不超过 3 d。  装标识  外包装上应有清晰、牢固的标识，标识的内容含生产单位、产地、品种名称、经营许 可证编号、 检疫证书 、数量、包装日期、联系方式等。  7 生产档案  参照 国家药品监督管理局第 32 号令（ 2002 年） 中药材生产质量管理规范（试行） 中  “ 第九章  文件管理 ”相关规定执行 ，并 对 组培苗生产 的 各环节进行 记 录 ， 见附录 B。   2017 5 A  A  附  录  A （ 规范 性附录）  采集记录表  编号：  序号  采集号  采集地点  生长环境  采集时间  采集人  备注  附  录  B （ 规范 性附录）  生产记录表  编号：  序号 /批次  数量  （ 株）  日期  施肥  病虫害防治  负责人员  炼苗  移栽  出圃  种类  施用时间  浓度  方法  种类  施用时间  浓度  方法    2017 6 B  B  附  录  C （资料性附录）  培养基配方