高考生物二轮复习 专题2 微生物的培养与应用课件 选修1

专题专题 2 微生物的培养与应应用 判断下列说法是否正确： 1分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中 唯一的氮源( ) 2利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生 物进行计数( ) 3消毒和灭菌实质是相同的( ) 一、培养基及无菌技术 1种类：液体培养基、固体培养基。 2营养成分：一般都含有水、 、 、无机盐 和生长因子。 3无菌技术 消毒方法： 、巴氏消毒法和化学药剂消 毒。 灭菌法：灼热灭菌、干热灭菌、 灭菌。 碳源氮源 煮沸消毒法 高压压蒸汽 二、微生物培养的基本技术 1配制培养基：称量混合溶化调pH分装包扎。 2灭菌：加水加培养基密封排冷气维持压力取出倒平板(或 搁置斜面)。 接种环环、涂布器 平板划线线 稀释释涂布 1.高温无菌的原理是什么？ 提示： 高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失活，从而达到 灭菌的目的。 2用酒精消毒时，为什么70%的酒精杀菌效果最好？ 提示： 浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子 不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。 三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由 于它们能合成 ，这种物质在把尿素分解成无机 物的过程中起催化作用。 2统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用 法。 3实验流程：土壤取样制备 微生物的培 养与观察细菌的计数。 脲酶 稀释涂布平板法、显微镜直接计数 稀释液 刚果红 纤维二糖和葡萄糖 3实验流程：土壤取样、 、梯度稀释、将 样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上、挑选产 生 的菌落。 选择培养 透明圈 3.分离微生物的方法有哪些？ 提示： 从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种： (1)利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好”的原理，专门 在培养基 中加入该营 养物质，从而使它成为一种加富培养基。 (2)利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑 制物，经培养后，原来占优势 的微生物生长受抑制，而分离对象却可 乘机大大增殖，在数量上占优势 。 1微生物的营养：碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。 2微生物培养的无菌技术 进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭菌。 3微生物的纯化培养平板划线法与稀释涂布平板法 方法平板划线线法稀释释涂布平板法 注 意 事 项项 (1)接种环环的灼烧烧 第一次划线线前：接种环环上的 微生物，避免污污染培养物 每次划线线前：杀杀死残留菌种 ，保证证每次划线线菌种来自上次 划线线末端 划线结线结 束后：杀杀死残留菌种 ，避免污污染环环境和感染操作者 (1)稀释释操作时时： 每支试试管及其中 的9 mL水、移液 管等均需灭灭菌； 操作时时，试试管口 和移液管应应在离 火焰1 cm2 cm 处处 方法平板划线线法稀释释涂布平板法 注 意 事 项项 (2)灼烧烧接种环环之 后，要冷却后再进进 行操作，以免温度 太高杀杀死菌种 (3)划线时线时 最后一 区域不要与第一区 域相连连 (4)划线线用力要大 小适当，防止用力 过过大将培养基划破 (2)涂布平板时时 涂布器用体积积分数为为70%酒精消 毒，取出时时，让让多余酒精在烧烧杯中 滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布 器在酒精灯火焰上引燃不要将过过 热热的涂布器放在盛放酒精的烧烧杯中 ，以免引燃其中的酒精 酒精灯与培养皿距离要合适，移 液管管头头不要接触任何物体 方法平板划线线法稀释释涂布平板法 目的在培养基上形成由单单个菌种繁殖而来的子 细细胞群体菌落 培养 平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水 分更好地挥发挥发 ，防止皿盖上水珠落入培养 基造成污污染 1下列关于微生物的培养与应用的叙述错误 的是( ) A通过消毒不能杀死物体内所有的微生物 B利用平板划线法可以统计样 品中活菌的数目 C微生物所用的培养基的成分和植物组织 培养所用的培养基的成分不 同 D平板划线法和稀释涂布平板法常用于微生物的接种 解析： 消毒是指杀死部分对人体有害的病原微生物，但不一定能杀死 细菌的芽孢，故A正确；统计样 品中活菌的数目要用稀释涂布平板法， 平板划线法办不到，故B错误 ；不同的培养对象，所需的营养成分不同 ，培养基中所加入的物质就不同，故C正确；微生物接种最常用的方法 是平板划线法和稀释涂布平板法，故D正确。 答案： B 2如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方 法正确的是( ) A操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭 菌 B划线操作须在火焰上进行 C在5区域中才可以得到所需菌落 D在12345区域中划线前后都要对接种环灭 菌 解析： 本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环 进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是 在火焰边进 行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得 所需菌落。 答案： D 1筛选菌株 (1)原则：人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生 物的生长。 (2)菌株筛选 原理的比较 土壤中分解尿素的细细菌分解纤维纤维 素的微生物 常用选择选择 培养基进进行筛筛 选选，即提供有利于目的 菌株生长长的条件，如营营 养、温度、pH等，同时时 抑制其他微生物的生长长 刚刚果红红染色法，即在含有纤纤 维维素的培养基中，加入刚刚果红红 时时，刚刚果红红与培养基中的纤纤 维维素形成红红色复合物。当纤纤 维维素被分解后，该该复合物不能 形成，培养基中出现现以纤维纤维 素 分解菌为为中心的透明圈 2.设置对照 (1)目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的 可信度。 (2)方法：证明培养基未被污染，用空白培养基作对照。 证明选择培养基的选择作用，用基础培养基接种等量同种菌液作对照 。 3分离纤维 素分解菌的实验过 程中，下列操作有误的是( ) A经选择 培养后将样品涂布到鉴别纤维 素分解菌的培养基上 B富集培养这一步可省略，但培养的纤维 素分解菌少 C经稀释培养后，用刚果红染色 D对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维 素的培养基上 答案： A 统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 原理：利用特定细菌计数板或血球计数板，在显微镜下计算一定容积 的样品中微生物数量；方法：用计数板计数；缺点：不能区分死菌 与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) 原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源 于样品稀释液中的一个活菌。通过统计 平板上的菌落数，就能推测出 样品中大约含有多少活菌。 计算公式：每克样品中的菌数(CV)M，其中C代表某一稀释度下 平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) ，M代表稀释倍数。 (2017西铁一中模拟)下列是关于“检测 土壤中细菌总数”实验 操作的叙述，其中错误 的是( ) A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭 菌后倒平板 B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各 组平板上 C将实验组 和对照组平板倒置，37 恒温培养2448小时 D确定对照组无菌后，选择 菌落数在300以上的实验组 平板进行计数 解析： 本题以“土壤中细菌的计数”为命题点，考查对 基础知识的 识记 情况。为防止培养皿盖上凝结的水珠落在培养基表面造成杂菌污 染，应将平板倒置。在细菌计数时，为保证实验结 果的准确性，应至 少涂布三个平板，选择 菌落数在30300的平板进行计数；然后求出平 均数，再根据对应 的稀释度计算出样品中的细菌数。 答案： D 1.(2017南昌一中质检 )在做分离分解尿素的细菌实验时 ，A同学从对应 106培养基上筛选 出大约150个菌落，而其他同学只选择 出大约50个菌 落。产生A同学结果的原因可能有( ) 土样不同 培养基污染 操作失误 没有设置对照 A B C D 答案： A 消毒与灭菌的区别 灭灭菌 方法 条件结结果常用方法 消毒 较为较为 温和 的物理或 化学方法 仅杀仅杀 死物体表面 或内部一部分对对 人体有害的微生 物(不包括芽孢孢 和孢孢子) 煮沸消毒法，还还有 化学药剂药剂 (如酒精、 氯氯气、石炭酸等)消 毒、紫外线线消毒 灭灭菌强烈的理 化因素 杀杀死物体内外所 有的微生物，包 括芽孢孢和孢孢子 灼烧灭烧灭 菌、干热灭热灭 菌、高压压蒸汽灭灭菌 关于灭菌和消毒的理解不正确的是( ) A灭菌是指杀灭环 境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B消毒和灭菌实质 是相同的 C接种环用灼烧法灭菌 D常用灭菌方法有灼烧灭 菌、干热灭 菌、高压蒸汽灭菌等 解析： 灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 答案： A 2.细菌培养过程中，分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同 的处理方法，这些方法可依次用于消灭或杀灭 哪些部位的杂菌( ) A接种针、手、培养基 B培养基、手、接种针 C手、接种针、培养基 D培养基、接种针、手 答案： B 1用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( ) 可以用相同的培养基 都需要使用接种针进 行接种 都需要在 火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌 A B C D 解析： 平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基；平板划线法 采用接种针进 行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作；纯化 时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培 养基；平板划线法一般用于分离而不是计数。 答案： C 2有关稀释涂布平板法的叙述中，错误 的是( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落 答案： D 3关于纤维 素分解菌选择 培养的正确叙述是( ) A可以增加纤维 素分解菌的浓度 B可以减少纤维 素分解菌的浓度 C所用培养基是固体培养基 D所用培养基是平板培养基 答案： A 4有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同 学欲从受原油污染的土壤中筛选 出能高效降解原油的菌株。回答问题 ： (1)在筛选过 程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源 的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于_培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 _和_。 (3)为了筛选 出高效菌株，可比较单 菌落周围分解圈的大小，分解圈大 说明该菌株的降解能力_。 (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验 室常用的灭菌方法有灼烧 灭菌、_和_。无菌技术要求实验 操作应在酒 精灯_附近进行，以避免周围环 境中微生物的污染。 解析： (1)从受原油污染的土壤中筛选 出能高效降解原油的菌株，使 用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择 培养基，通过控制碳源这种 营养成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生 长。(2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。 (3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小 ，来判断菌株降解原