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文档简介

4 液相色谱法测定食品中苯并(a)芘 食品中苯并(a)芘在的测定方法有薄层层析法、荧光分光光度 法、气相色谱和液相色谱法，这里介绍液相色谱法。 4.1 原理 本法主要是利用样品经过提取、皂化或者液一液分配以及柱 层析净化，除去脂肪类物质、色素和多环芳烃以外的其他物质后 ，再通过液相色谱仪中的色谱柱，将苯并芘从多环芳烃物质中分 离出来。求出样品中苯并芘的含量。 4.2 仪器 (1)液相色谱仪： 色谱柱：ODS柱，柱长250mm，4mm； 柱温：30； 流动相：75甲醇； 流速：2mLmin 。 (2)检测器：荧光检测器，激发波长369nm，荧光波长405nm。 4.3 操 作 步 骤 (1)定性测定 用微量注射器吸取一定量的苯并芘标准溶液和样 液，注入色谱仪内，根据苯并芘的出峰保留时间和样品中加标准 样产生重叠情况进行定性。 (2)标准曲线的绘制 用微量注射器准确吸取每1mL含1g的苯 并芘标准溶液1、2、3、4、5uL按照上述实验条件进行操作，以 获得相应的色谱图。然后，分别测量各个色谱的峰面积。以峰面 积为纵坐标，标准苯并芘量为横坐标，绘制标准曲线。 (3)样品的测定在上述实验条件下，吸取一定量经过柱净化的 样品提取液，注入液相色谱仪中进行分离、分析，测得峰面积， 然后从标准曲线上查出相应于此面积的苯并芘含量。 4.4 结果计算 X= 式中：X苯并芘含量，gg； A从标准曲线中查出相当于苯并此的标准量，g； m样品的质量，g； P点样体积与样品浓缩体积的比值。 4.5 说明及注意事项 (1)本法所用试剂及配制方法、样品的提取、净化步骤参照荧光 分光光第二篇食品理化检测技术度法。 (2)高效液相色谱分离多环芳烃的效果与洗脱液的比例、柱温
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