类风湿因子检测方法在类风湿关节炎诊治中的应用分析.doc

类风湿因子检测方法在类风湿关节炎诊治中的应用分析 陈丹萍摘要 目的 探讨血清的速率散射比浊法、酶联免疫吸附（ELISA）法与乳胶凝集法对类风湿关节炎（RA）的诊断价值。方法 应用三种方法对56例类风湿关节炎（RA）患者、非类风湿关节炎（RA）患者56例及20名正常人进行RF检测。结果 56例类风湿关节炎（RA）中酶联免疫吸附法阳性45例，阳性率为80.4%，速率散射计量法40例，阳性率71.4%，胶乳法阳性28例，阳性率为50.0%，三法检测结果呈平行关系，非类风湿关节炎（RA）患者可有RF升高，但呈低滴度与RA患者的RF含量差异有显著性（P0.01）。结论 三种方法都有具有特异性，但速率散射比浊法支持早期RA的倾向性诊断。ELISA法检测RF重复性好，试剂稳定，敏感性好，不需特殊仪器设备，适于基层医院推广运用。乳胶凝集法操作简单、快速、成本低，但影响因素多，敏感性差，只能检测IgM类RF，影响因素多，且只能定性，对病人疗效观察有一定局限。关键词 类风湿关节炎 类风湿因子 速率散射比浊法 酶联免疫吸附法 乳胶凝集法 RF对于类风湿关节炎的诊断有重要的参考价值，故而探测提高RF检测敏感性和特异性实验方法很有必要，在国际通用的美国风湿病学会（ARA）1987年修订的RA诊断标准中，类风湿因子（RF）是RA唯一的实验室血清学诊断指标。近年来我们采用速率散射比浊法和酶联免疫吸附（ELISA）法检测患者血清中类风湿因子（RF）阳性率明显高于乳胶凝集法，对的诊断具有很高的特异性，且可用于的早期诊断1。现报告如下。1 资料和方法1.1 检测对象及分组 类风湿关节炎（RA）患者56例，均为我院住院及门诊病人，时间为2008年月至2010年月，其中男性29例，女性27例，年龄为16岁65岁，平均年龄为40岁。患者经临床确诊均符合1987年美国风湿病协会()修定的诊断标准2。对照组为其他病种血清56例和30例正常健康体检者。非类风湿关节炎（RA）患者中男性32例，女性24例，年龄为22岁58岁，平均年龄为40岁。1.2 仪器、试剂和方法RF检测酶联免疫吸附试验（ELISA）法，试剂由德国欧蒙公司提供，吸光度用BIO-RAD MODEL 550酶标仪检测。操作过程按全国临床检验操作规程操作3。RF检测速率散射比浊法，采用美国贝克曼库尔特公司产ARRAY-360型全自动特种蛋白分析系统及配套试剂,严格按仪器说明书操作。结果20IU/ml判为阳性；乳胶凝集法采用上海捷门生物技术合作公司提供的试剂盒，亦严格按其试剂说明书操作。1.3 统计学处理 所有资料由SPSS13.0软件进行分析，组间比较采用检验；计数资料行2检验，以0.05为有统计学意义。2 结果 56例RA患者三种检测方法结果比较见表1，三种方法均阳性相关性比较见表2。组别例数nRF速率散射比浊法n(%)RF乳胶凝 n(%)集法RF酶联免疫法（ELISA） n(%)RA组5640(71.4)28(50.0)45(80.4)非RA组563(5.35)4(7.14)37(66.07)健康对照组30000表1 各组通过三种方法检测血清RF结果注：类风湿性关节炎组与非类风湿性关节炎组及正常对照组比较，较经2检验，p0.05有显著性意义。表2 三种方法皆阳性结果RF含量分析31（n）RF 乳胶凝集法RF(IU/ml)速率散射法 （ s）（(99(RF(IU/ml)酶联免疫吸附法（ s）（ELISA）（ELISA）81:467.5613.9110812.9141:8116.2341.73128.925.6491:16217.98103.5615874.91注：三法相关分析 胶乳法检测的31例阳性患者的RF滴度与同组ELISA法定量测定、速率散射法结果呈平行关系，三者有非常显著相关（P0.01）。3 讨论 RF是一类针对人或动物IgG分子Fc抗原决定簇的抗体，是以变性IgG为靶抗原的自身抗体，不与正常IgG发生凝集，多见于类风湿关节炎患者。RF包括IgM、IgG、IgA和IgE四种类型，其中以IgM型为主5。RF对于类风湿关节炎的诊断有重要的参考价值，故而探测提高RF检测敏感性和特异性实验方法很有必要。通过对三种方法结果分析，我们发现酶免疫法（ELISA）RA组阳性率最高，明显高于同组的速率散射法和乳胶凝集法，但敏感性差异较大。56例类风湿关节炎（RA）患者，乳胶凝集法只测出28例，这与RF的Ig类型和非活动期RA有关。其他病种56例中RF增高，是因为RF也象抗核抗体（ANA）一样，并不是RA独有的特异性抗体。在系统性红斑狼疮（SLE）患者约有50%RF阳性，在其他结缔组织病如干燥综合征（SS）、硬皮病、慢性活动性肝炎以及老年人中均可有不同程度的阳性率，但呈低滴度。与类风湿性关节炎病人的RF含量差异有显著性(P0.01)，为临床提供了诊断意义，由于ELISA法检测RF重复性好，试剂稳定，敏感性好，不需特殊仪器设备，适于基层医院推广运用，目前是临床检测RF的优选方法4。国内赵超王雪等认为速率散射定量检测是目前临床实验室对RA早期诊断不错的方法1。ELISA法可检出不同Ig类型的RF,在酶标记抗体时，可分别标记IgM、IgG或IgA，而IgM-RF对RA诊断价值最高。总之，三种方法各有其优缺点，可以互为补充5，不同方式联合检测可以提高RA诊断特异性。参考文献1赵超，王雪，类风湿因子定量检测在类风湿关节炎诊治中的应用J，实用医技杂志,2005,12（5）:1345.2Lugbre K, Mader AW, Richmond RK.Cristal structure of the nucleasome core particle at 2.8 a resolution J.Nature, 1997, 389:251-261. 3叶应妩，全国临床检验操作规程M.2版.南京:东南大学出版社