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文档简介

丙型肝炎的免疫测定目前最广泛的是抗HCV测定,多采用ELISA法筛检,已经经历了第一代、第二代和第三代试剂的发展过程。第一代是1990年美国ORTHO和ABBOTT公司用C100-3抗原生产出来的,并广泛应用于献血员的筛检及临床HCV感染的检测。随着对HCV研究的不断深入,HCV的特异性核心区抗原P22(C22)和NS3区抗原C33C表达成功,第二代试剂应用而生,灵敏度和特异性有所提高。第三代试剂所用的抗原由核心区的C22、NS3区的C33C、NS4区的5-1-1和C100及NS5抗原组成,检测的灵敏度和特异性又得到改善。尽管已经发展到第三代,但仍有不足,主要是由于批准上市的试剂中,包被抗原有多种不同的组合,而且每种抗原片段的浓度有较大差别,一旦出现抗原匹配不合或抗 原相互干扰而影响检测结果,造成判断困难,临床实际工作中存在大量的不确定和假阳性结果。丙型肝炎病毒核心抗原的检测可以直接从患者血清中查出病毒抗原, 将目前使用HCV抗体检测的窗口期(70天)缩短为平均35天左右,便于HCV感染的早期诊断和确认诊断。丙肝抗原(HCVcAg)丙肝抗体(HCVAb)丙肝RNA(HCVRNA)简要意义-没有感染丙肝病毒或早于14天感染,低于试剂最低检测灵感度-+-没有感染丙肝病毒或丙肝病毒感染后病毒已清除+-+丙肝病毒感染早期,丙肝抗体检测窗口期,有传染性-+早期丙肝病毒感染,12-14天感染,低于抗原最低检测灵感度,有传染性+-早期丙肝病毒感染,HCV RNA103个拷贝或RNA样本降解,有传染性+慢性丙肝病毒感染,有传染性抗原抗体联合检测的必要性:提高检出率减少抗检窗口期漏诊率(丙肝游离核心抗原检测时间段:感染后14天至70天可检出,70天后丙肝游离核心抗原消失丙肝抗体产生,抗体可检测时间段为70天后产生)。建议:抗原和抗体联合检测结果阳性时,应增加检测HCVRNA或增加其它HCV确认实验,实验结果应动态监测或检测两次以上都是阳性结果时即可确诊。1病毒复制更为理想的新的指标:是一种比HBeAg更为先进可靠的病毒复制的指标。 2弥补因病毒变异和其它原因造成的五项检测的缺陷:病毒变异后,虽然其病毒仍要复制,但乙肝五项检测结果HBeAg阴性/HBeAb阳性。造成临床上的误诊(认为此类病人没有病毒复制、不需要抗病毒治疗)。加查前S1抗原为阳性,则能提示病毒仍然在活动,应予以治疗。3乙肝病毒感染性强弱的指标:前S1抗原为阳性为病毒毒性强、容易入侵肝细胞的征象。4机体对乙肝病毒免疫反映强弱并由此引起的肝细胞免疫损害的指标(这是单纯检测HBVDNA所无法做到的。HBVDNA只是病毒复制的指标,但不能体现病毒的感染性及其所可能引发的免疫损害程度)。5乙肝病毒血清学最早指标:早于表面抗原出现、早于转氨酶升高。6空窗期的补检措施、筛查献血员必要项目之一。7干扰素敏感与否的参考指标:治疗前、前S1抗原滴度低者,干扰素敏感,治疗过程中前S1抗原滴度下降明显。治疗前、前S1抗原滴度高者,干扰素不敏感,治疗过程中前S1抗原滴度下降不明显。8乙肝治疗有效的最早转阴指标,早于HBeAg阴转。9预示乙肝预后的最准确指标:前S1抗原与肝脏的病理进展高度相关。前S1阴转,预后好;前S1抗原持续阳性,则较易进展为肝硬化甚至肝癌。这一指标比E抗原与HBVDNA更能提示乙肝病人的预后。10乙肝病毒携带者母婴传播的可能性评估。HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAbPre-S1Ag简要意义乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗体乙型肝炎e抗原乙型肝炎e抗体乙型肝炎核心抗体乙肝病毒前S1抗原HBsAg是乙肝病毒标志物,阳性提示乙肝携带;HBeAg、pre-S1Ag、阳性提示乙肝病毒复制活跃,传染性强,是治疗疗效评价的重要指标;HBsAb、HBeAb阳性提示机体产生免疫力抵抗病毒,趋于恢复。-没有乙肝病毒感染,不具备免疫力-+-接种疫苗,乙肝恢复,具备免疫力+-表面抗原携带;急性乙肝病毒感染潜伏期后期+-+-+急性乙肝早期,病毒复制,有传染性强+-+-+急慢性乙肝,病毒复制,有传染性强+-+-急慢性乙肝,没有传染性或传染性弱+-+-急慢性乙肝,没有传染性或传染性弱+-+急慢性乙肝,病毒复制有传染性,乙型肝炎E抗原变异-+-乙肝核心抗隐性携带,有乙肝既往有感染史-+-急性乙肝恢复期或既往有感染史-+-+-乙肝恢复期或既往有轻度乙肝病毒感染史+-+-慢乙肝病毒感染携带,没有传染性或传染性弱+-+急性乙肝趋于恢复,表面抗原携带,病毒复制,有传染性强-+提示乙肝病毒早期感染,有传染性前S1:1.主要存在于完整乙肝病毒表面2.肝细胞膜上存在有前S1蛋白受体 3.诱导乙肝病毒吸附在肝细胞表面4.促使病毒进入肝细胞内关键词:乙肝检查结果模式乙运用 TRFIA 对乙肝五项进行定量 检测极 大地弥补了酶标法定性检测的不足,成为乙型肝炎血清学标志 物现代 临床检验的发展方向,新波公司为此研制了 HBV 的 TRFIA 试剂盒,并获得国家批准文号,这是一个可喜的成果,它将推动我国乙肝防治工作和进展,同时亦将推动 TRFIA 技术的普遍应用。 TRFIA 在 HBV 感染诊断及免疫力监测方面的定量检测具有如下优越性: 极大地提高了检测的灵敏度 时间分辨荧光免疫定量技术( TRFIA )检测 HbsAg 灵敏度可达 0.2ng/ml, 而酶标( EIASA )检测的灵敏度是 2ng/ml ,极大地提高检测的灵敏度。因此,在急性乙肝早期能及早检出 HbsAg ,确证 HBV 感染,缩短窗口期;其次,可发现低浓度 HbsAg 携带者;在部分慢性乙肝患者中,由于机体缺乏对 HBV 包膜蛋白的免疫应答, HbsAg 表达较低,酶标检测可出现 HbsAg 和 HbsAb 均阴性的情况, TRF 技术则可避免这些情况的发生,为正确判断病情提供依据。 能动态观察疗效和监测病情 1 )定量分析 HBsAg 和 HBsAb 的浓度变化,可预见急性乙肝是否处于恢复期。如 HBsAg 浓度降低, HBsAb 浓度逐渐升高,可说明病情正往恢复期发展;反之, HBsAg 浓度处于较高水平或上升趋势,而 HBsAb 一直处于较低水平,则易发展为慢性乙肝或病毒携带者。 2 )定量分析 HBeAg 和 HBeAb 的浓度变化,可反映病情变化和治疗效果。定量测定能明确检测 HBeAg 向 HBeAb 转换的时期,即表现为 HBeAg 浓度下降和 HbeAb 升高的过程。高浓度的 HBeAg 还可间接提示病毒处于高复制状态,具有较高的传染性。高浓度的 HBeAb 一方面提示病情好转,而在某些时候(如肝功能指标很差)则可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关。 3 )HBcAb 浓度的高低可反映病毒感染的状态。高浓度的抗 - Hbc 提示乙肝急性感染,恢复期浓度降低。慢性 乙肝呈抗 - Hbc 持续高浓度。而低浓度的抗 - Hbc 一般为恢复期或既往感染。 4 )有利于对慢性肝炎活动性或非活动性的判断。非活动性慢性乙肝各项指标相对稳定,活动性往往呈现进行性变化。 关键词:时间分辨技术定量乙肝两对半 肝 两 对 半 简 明 临 床 意 义 HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb 简明临床意义 + - - - - 急性HBV感染潜伏期后期,病毒携带者 + - + - - 急性乙肝早期,传染性强 + - + - + 急、慢性乙肝,病毒复制活跃,传染性强 + - - - + 急、慢性乙肝 + - - + + 急、慢性乙肝,传染性弱 - - - - + HBV隐性携带者,窗口期,有既往感染史 - - - + + 急性HBV感染恢复期或有既往感染史 - + - - - 接种乙肝疫苗后或HBV感染后康复,已有免疫力 - + - + + 乙肝恢复期,已有免疫力 检验项目 正常参考 临床意义 乙肝表面抗原(HBsAg) 2ml不抗凝全 血 阴性 HBV病毒感染的依据 梅毒非特异性抗体(TRUST) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性时建议加做“梅毒确证试验” 梅毒确证试验(TP-Ab,TPPA) 2ml不抗凝全 血 1:80 增高:梅毒的主要诊断指标 肥达氏反应(Widals) 2ml不抗凝全 血 O、A、B1:80H1:160 O、H增高:伤寒病;A、B、C增高:副伤寒病(双份血清测定,后次凝集价增高更有诊断价值) 外斐氏反应(Weil-Felix) 2ml不抗凝全 血 1:160 增高:流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病 冷凝集试验 2ml不抗凝全 血 1:32 增高:冷凝集素病、支原体肺炎、原发性非典型性肺炎、免疫性溶血性贫血 嗜异性凝集试验 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、白血病 抗EB病毒壳抗原IgA(VCA-IgA) 2ml不抗凝全 血 1:5 增高:EB病毒感染、鼻咽癌 抗EB病毒早期抗原IgA(EA-IgA) 2ml不抗凝全 血 1:5 增高:EB病毒感染、对鼻咽癌的诊断比VCA-IgA特异性好 肺炎支原体抗体(A-PM) 2ml不抗凝全 血 1:40 增高:支原体肺炎 艾滋病抗体(抗-HIV) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:HIV感染、非特异性试验,只用于初筛试验 结核抗体(Tb-Ab) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:各种结核病 抗核抗体(ANA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:SLE、混合性结缔组织病、硬皮病、皮肌炎、干燥综合症、RA、慢活肝等 ENA多肽抗体谱 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:SLE、混合性结缔组织病、硬皮病、皮肌炎、干燥综合症等 抗双链DNA抗体( ds-DNA抗体) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:诊断SLE较特异性的诊断指标 抗平滑肌抗体(SMA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:自身免疫性(狼疮样)肝炎、慢活肝、原发性胆汁性肝硬化 抗线粒体抗体(AMA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:原发性胆汁性肝硬化、慢性肝炎、肝硬化等 抗胃壁细胞抗体(PCA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:伴萎缩性胃炎病变的恶贫,胃溃疡、胃癌、单纯性萎缩性胃炎、甲亢、甲低、IDA等 抗肾上腺抗体(AAA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:慢性肾上腺皮质功能减退(阿狄森氏病) 抗角质蛋白抗体(AKA) 2ml不抗凝全 血 阴性 AKA是RA高价值诊断指标与早期诊断指标 抗心肌抗体(HRA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:急性风湿热(肌纤维膜下型)、心肌梗塞、局部缺血性心脏病等 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:提示原发性小血管性疾病 抗蛋白酶3抗体(C-ANCA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:可做为韦格氏肉芽肿(WG)处于活动期的标志之一 抗髓性过氧化物酶(P-ANCA) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:坏死性新月体性肾小球肾炎、显微型多动脉炎等 抗DNP抗体 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:SLE尤其是活动性SLE D-栓溶二聚休(D-聚体) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:DIC、体内深静脉栓塞、心梗、肺梗塞、冠心病等 抗血小板抗体(PA-Ig) 2ml不抗凝全 血 IgG:0-108IgA:0-22IgM:0-40ng/102PA 增高:各种原因所致的血小板自身免疫性疾病 轮状病毒抗原(SRV-Ag) 2ml不抗凝全 血 阴性 阳性:急性轮状病毒胃肠炎 总补体溶血活性(CH50) 2ml不抗凝全 血 23-46IU/ml 降低:见于C1-C9任何一个成份缺陷 免疫功能 IgG 3ml不抗凝全血 8.00-17.00g/l 体液免疫功能监测,检测K或型Ig含量,K/比率可直接用于M蛋白的筛选,浆细胞恶性增殖时可有过多的轻链产生或重链的合成被抑制,K/比值变化明显 IgA 1.0-4.90g/l IgM 0.50-3.45g/l C3 0.90-1.80g/l C4 0.10-0.45g/l k轻链(KAPP) 2.00-4.40g/l 轻链(Lamb) 1.10-2.40g/l 尿肾功 尿IgG 2ml任意尿标本 0.00-10.0mg/l IgG增高为非选择性蛋白尿,表示病情RTRF增高为选择性蛋白尿,病情不太严重白蛋白尿是糖尿病性肾病的最早期临床表现,a1MU增多为肾小管性蛋白尿,轻链异常见于浆细胞恶性增殖,多发性骨髓瘤,巨球血症,肾淀粉样变,慢性肾盂肾炎,恶性淋巴瘤 转铁蛋白(TRFU) 0.00-2.40mg/l 尿白蛋白(AlbU) 0.00-30.0g/l a1微球蛋白(a1MU) 0.00-12.0mg/l k轻链 0.00-0.00mg/l 轻链 0.00-2.40mg/l 炎症指标 CRPm 3ml不抗凝全血 0-5.00mg/l CRPm,AAG,HPT,COR为急性时相反应蛋白,增设见于急性细菌、病毒或其它感染,非感染性炎症疾病如风湿热、组织损伤和坏死,COR对Wison和Menkes症的诊断最不意义 a1酸性糖蛋白(AAG) 0.50-3.20g/l 结合珠蛋白(HPT) 0.50-3.20g/l 铜篮蛋白(COR) 0.20-0.60g/l 风湿指标 类风湿因子(RF) 3ml不抗凝全血 0-10.0IU/ml ASL,ANDS为诊断链球菌感染的指标,RF见于类风湿关节炎,肝病和某些感染性疾病 ASO/抗O(ASL) 0-200IU/ml 抗脱氧核糖核酸酶B(ANDs) 0-200U/ml 新生儿免疫 CRPm 3m

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