对野生大黄藤中掌叶防己碱含量的测定方法的探究.doc

野生大黄藤中掌叶防己碱的提取方法初探彭正国 ( 云南省红河学院化学系2002级化学教育专业, 云南 蒙自 661100) 摘要:：采用冷浸法对大黄藤进行含量的分析，在实验中通过改变酸碱浓度，盐析浓度，以及选用不同树源和植株不同部位对掌叶防己碱提取量进行比较。得到结论：大黄藤中掌叶防己碱的提取量受酸碱浓度，盐析浓度的影响较大；不同树源和植株不同部位掌叶防己碱的含量不同。关键词： 冷浸法 野生大黄藤 掌叶防己碱1.前言 大黄藤为防己科植物，俗称“土黄连，伸筋藤，山大王，天仙藤，藤黄连，黄连藤”等。分布于我国广东，广西，云南等省区。黄藤记载于本草纲目，李时珍曰：“黄藤生岭南，状若防己。俚人常服此药，纵饮食有毒，亦自然不发。大黄藤的根和茎中含有较多量的生物碱，其主要成分为掌叶防己碱（即盐酸巴马丁，盐酸棕榈碱，非洲防己碱）分子式为C21H22NO4.HCI。主要性质：掌叶防己碱是一种黄色针状结晶，味极苦，易溶于热水，略溶于水，微溶于乙醇和氯仿，几乎不溶于乙醚。大黄藤在我国传统医学史上应用历史悠久，至今仍收载于中国药典（1997版），大黄藤性寒，味苦，其药理作用有：抗菌作用，降压作用，致浮肿作用，掌叶防己碱有明显的增加白细胞吞噬能力的作用。民间作清热解毒，抗菌消炎方面疗效显著。常用于疮肠肿毒、妇科炎症。外伤感染，菌痢，肠炎，呼吸道感染，泌尿系统感染，扁桃体炎，咽喉炎，结膜炎，热痢及黄疸等。本文讨论了酸碱浓度不同，盐析浓度不同，不同树源和植株不同部位，掌叶防己碱的提取量不同。2实验部分2.1.仪器与试剂 野生大黄藤的根、藤、表皮于2004年12月采集于中国云南红河州屏边、绿春，由红河学院化学系郭亚力教授鉴定。1%的醋酸 食盐 40%的氢氧化钠 80%的乙醇 6M盐酸(化学试剂都是分析纯)2.2提取流程 大黄藤切碎酸浸泡盐析碱中和粗碱醇热溶精制掌叶防己碱2.3. 实验方法2.3.1样品预处理 首先主要是对收购来的大黄藤进行物理加工，将其切碎，以便于浸泡中更好的提取，其过程纯属物理过程，再对它们的重量，直径，进行测量。 再次，是进行自然凉干，让它们保存良好的性状。最后，凉干后将其进行收藏。2.3.2. 冷浸取大黄藤100g，用1醋酸溶液冷浸24h，过滤后再加1醋酸溶液浸泡24h，合并冷浸液（约500ml600ml）。2.3.3盐析和碱化 冷浸液过滤，滤液中加食盐至8，搅拌使溶解，再用40氢氧化钠调至PH=8,此时溶液变为砖红色，并有黄色不溶物析出，静置，倾出上清液，离心后可得掌叶防已碱粗品。 2.3.4精制将粗掌叶防已碱置于是100ml三角精瓶中,加80%的乙醇50ml.加热使之溶解,倾出上层溶液,趁热过滤,继续用80%乙醇热溶液数次(每次20ml)直至溶液颜色变浅为止(3_4次),合并溶液,滴加6N盐酸调至PH=2,放置,即有金黄色针状结晶析出,抽滤,即得精制氯化掌叶防己碱,于70干燥后称重.母液适当浓缩,可再析出一部分氯化掌叶防己碱。 2.3.5称量将干燥的精制的掌叶防己碱在电子天平上进行称量，记录数据。3.结果与讨论3.1.PH值与盐析NaCl量对粗碱提取率的影响 将浸泡根的浸出液用双层纱布和脱脂棉过滤(滤液约600ml)，分为6份，PH值的调节和盐析用的NaCl量如下表，然后分别放置24小时，倾出上清液，下层用滤纸过滤，收集沉淀，干燥称重，得到粗碱量，结果如下： 表1 不同PH值与Nacl量对大黄藤粗碱提取率的影响 份数123456容量(ml)100100100100100100PH值6.56.58899NaCl575757粗碱量(g)0.560.811.120.780.88粗碱提取率(g100ml)0.560.81.001.120.780.88 由实验可知，虽然PH=6.5时所得的沉淀色黄，外观较好，但由于未达到生物碱(掌叶防己碱)沉淀PH值(碱性)，所以沉淀量少，且溶液仍存在大量细小混浊物，不易下沉，使过滤困难。虽然增加NaCl用量可使粗碱提取率接近PH8PH9时的提取率，但由于沉淀细小，过滤困难。所以不可取，而PH=9时，虽然沉淀集中，易于过滤，但沉淀为深污绿色，色外观差，且精碱得率并不理想，所以也不可取，从表中可见PH=8为较理想的PH范围。所得沉淀为黄绿色，且沉淀完全，上清液易分离，过滤也较易，相比于PH=9时又可节约用碱量。在以上3种PH条件下均可看出增大NaCl用量可相对提高粗碱的提取率。为了进一步证实以上结论，又用了根和茎的浸出液，又如下表进行了实验，得到的结果如下： 表2 不同PH值对大黄藤粗碱提取率的影响名称根浸出液（ml）茎浸出液（ml）容量（ml）300300300300PH值8989NaCl7777粗碱量（g）3.362.643.812.79粗碱提取率（g/100ml）1.120.881.270.93以上结果再次证明，在NaCl用量相同时，浸出液调PH=8时，粗碱提取率始终大于PH=9时。3.2大黄藤根与茎中粗碱和精碱含量的比较 利用上述实验结果，在各取100g大黄藤的根和茎用1醋酸浸泡后，合并各部分浸出液，加NaCl至含量7，搅拌溶解后，再加40氢氧化钠调至PH=8，放置24小时，倾去上清液，下层用滤纸过滤，收集沉淀，烘干，称量。根的粗碱重5.6g，提取率为5.6。茎的粗碱重6.35g，提取率为6.35。分别将以上根和茎中所提取粗碱用80乙醇热溶数次（34次）。适当浓缩提取，加浓盐酸调PH=2，冷却结晶，过滤干燥，根提取物得黄色针状晶1.72g，茎提取物得1.85g。以上干燥药材计精制掌叶防己碱的提取率分别1.72（根）与1.85（茎）。 由以上结果可见，在实验条件相同的情况下，大黄藤的不同部位的掌叶防己碱的提取率也不同。4.结论4.1 酸碱的浓度对粗碱的提取量及质量有很大的影响，酸碱浓度过高和用量偏多，得到的粗碱常是较黑硬。虽然得到的精碱多，但其含量较低，给下一步提取，精制带来重复性操作，回收溶剂后母液较难处理，溶剂损耗也大。所以，在实际生产当中，我们采用酸的浓度为1，用碱中和到PH=8为准，酸碱中和这一步应尽量将杂质去掉，这主要靠调PH值来实现。4.2 盐析浓度对粗碱提取率也有很大影响，盐析浓度不够，粗碱沉淀不完全，得到粗碱少，收率低。盐析浓度过大，常会造成不必要的浪费。在实际生产中，盐析浓度一般控制在8为宜。由以上结论可见，酸碱浓度，盐析浓度对大黄藤的粗碱提取率有很大的影响；不同树源和植株不同部位掌叶防己碱的含量不同。参考文献：1中国药典1997年版一部M,1997，524.2苗明，法定中医药理与临床M；北京，世界图书出版社，1998，16563周敏,杨秀兰,成中太,等，紫外分光光度法测定黄藤素注射液中盐酸巴马丁含量的探索4肖崇厚，等，中药化学，上海科学技术出版社，1997;1505中药化学成分提取分离手册，中国中医药出版社，北京，主编：杨云，冯卫生，1998，3103116南京药学院，中草药化学实验讲义，1980，207韦国锋，黄祖良,何有成等，从黄藤中提取制备延胡索乙素方法的改进Wild rhubarb rattan palm leaf abstraction method , root of fangji of alkali visit straight country for the first time Peng zhenng guo (Yunnan Province hong he university department of chemistry 2002 chemistry educational speciality, Yunnan Mengzi 661100) Summary : Adopt cold to soak law carry on analysis of content to rhubarb rattan , is it change sour alkali density to pass among experiment, the salt analyses the density, and select the position different from plant of different trees source for use and compare drawing amount of root of fangji alkali of the palm leaf. Get the conclusion: Rhubarb rattan palm leaf abstraction amount , root of fangji of alkali receive sour alkali density, salt analyse density of great impact; The content of