暑期科研实习总结.doc

2010年赴中国科学院广州生物医药与健康研究院暑期科研实践报告XXX（XXX大学XXX学院 XXX班）引子很久前就想借学院举办的暑期科研实践活动走出校园，零距离去接触真正的科研，看看科研的世界到底是怎么样的。出于对医学和生物学的热爱，我在列表中选择了广州生物医药与健康研究院。并开始做联系的准备。一开始了解到研究院不招收低年级本科实习生，我很失望和迷茫。但身为这个实习小组的组长，除了自己特别想去，还肩负着十余名同学的实习机会。我不放弃，通过邮件电话等方式，在研究院院长和科教处老师的帮助下，终于获得了这个机会。通过有限的资源了解了研究院后，我选择了XX教授的实验组，主要研究干细胞与再生医学，而IPS正是其中一项。并且了解到国内iPS的研究在国际上不落人后，某些领域还处于领先地位，来自中科院广州生物医药与健康研究院的裴端卿教授就是其中突出的耕耘者之一。第一次接触可诱导的多能干细胞（IPS）是在XX老师的细胞生物学这门课上，课间五分钟小演讲中一位同学提到的。IPS是通过在分化的体细胞中表达特定的转录因子以诱导体细胞的重编程而获得的可不断自我更新且具有多向分化潜能的细胞。干细胞的培养与运用在医学领域有着举足轻重的作用，近年来iPS的发现与发展更是为人类疾病的治疗，也为胚胎干细胞应用上的伦理道德问题找到了一个出路。我对这个领域的研究很有兴趣，想深入学习相关内容，于是抓住了这个机会。初来乍到就这样，怀着兴奋和好奇，7月21日，我跨进了研究院的大门。第一印象：非常安静和整洁，一切都那么井然有序，又仿佛能感觉到大脑急转的步伐和思想碰撞的声音。我知道，在这份安静底下，其实很多人在紧锣密鼓地忙碌着。办完报到手续之后，在实验室小组长陈捷凯师兄的带领下，我来到了“体细胞重编程研究组”。边听着师兄的介绍，我打量着这块地盘。宽敞的分子实验平台和看起来“机关重重”的细胞间，就在实验室对面的研究员办公室，以及位于楼层另一边的电子阅览室，我那为期24天的暑期科研实践就将在这三点一面铺展开来。到这工作不久的XX师兄很热情地接待我们，在这个人生地不熟的地方，顿时感觉很亲切。师兄简单地跟我们交流了生物学的一些话题，介绍了IPS的概况，又教我们查阅文献的方法和几个很实用的网站，我如获珍宝。实践证明，这些基本的学习手段和知识在日后的实习过程中发挥了很大的作用。实习印记拾掇l 读文献开始的两三天，每天的任务就是看文献，包括全英的论文。很早就听不少师兄姐说过，去实习第一要培养的是读文献的能力，果然如此。每天都只是看论文，确实挺单调，有个别同学动摇了，甚至第二天就退出了。我觉得很可惜，同时也更坚定了自己要坚持努力的决心。我坚信，无论做什么，用心了就总会有收获，眼光也不能只放在当下。面对一个对自己来说几乎是全新的东西，花时间先去了解它那是必须的，为以后更深入的学习和实践打下基础，这很合理。否则刚开始就动手操作，也不知从何做起，就算操作很正确也只是行尸走肉不知其意义何在。另一个也是因为自己兴趣所在，读得也津津有味。累了就时常想起自己的师兄曾用三天自学完一本全英教程，以此来激励自己。但我能力有限没能达到那个自学水平。这几天的埋头阅读，虽说不能百分百掌握所接触的内容，但对IPS这一领域，比起以前，总算有了个较清晰的轮廓，心里有底了。l 交流、取经在学校学生工作中打拼了两年，觉得自己适应新的环境和新面孔的能力还可以。然而在研究院实践开始挺长的一段时间后我才感觉适应了那里的氛围。一开始，总觉得师兄姐们都好忙，在实验室做完实验，又回到办公室对着电脑分析实验或看文献，相互之间似乎很少有什么要交流，但也经常看到XX，XX师兄和XX师兄在一起讨论。每个人在办公室里那种专注和安静竟然让我有种想逃开的冲动，我想这是一个满是研究人员的房间里很正常的氛围吧，是我还没习惯罢了。加上因为办公室安排不下，开始的几天又只是看文献，大部分时间待在阅览室，跟师兄姐接触较少，想交流的时候又觉得不知从何问起。后来慢慢发现，其实是自己的主观意识先入为主，产生了敬畏心理，把师兄姐们抬得太高太难以接触了使自己把交流的主动性给丢了。而且我也再次感受到，好的交流也需要先成为朋友。后来越来越喜欢在实验室那边跟师兄姐们一起，发现其实师兄姐很愿意把自己知道的东西告诉我们，听多了就想得多，想多了就会问得多，自然就学到了更多。你希望别人怎么对你，你就怎么对别人，包括交流也是这样。而这一切都需要我们做到：主动。l 且行且思专业知识掌握得不多，对于很多常挂在嘴边的专业知识都听不懂，看不明。电子阅览室是待得最多的地方了，平时没有实验的时候，大多数就去那查资料，把不懂的东西搜一遍，以后在接触到相关内容的时候就不会摸不着头脑了，解决力所能及的问题，也不用连一些看似很常识化的专业知识都去麻烦师兄姐，在这个阅览室，确实学到了很多东西。在看和听的同时，要不断的思考，不要似懂非懂就放过去了。印象最深的就是学CHIP和甲基化检测这两个实验时，原理用途步骤都弄清楚后以为都懂了，再一想，根本不知道这两个技术是怎么服务于我们实验组现在IPS的研究中的。经过和其他师兄姐讨论，整理思路，找到最终不明白的地方，然后请教XX师兄终于弄明白，当时的感觉真是柳暗花明啊！失败也是科研常遇之事。失败不可怕，重要的是要懂得不要对自己摆架子，把心态放低去思考，寻找错根，这时候对自己要求一定要严格，每一个看似不可能出错的步骤都有可能。我们做的甲基化实验就失败了两次，从所制备的试剂到实验条件到最后PCR的引物一一怀疑，要一步一步把好关卡才能做好。并且无论多简单的步骤都不能偷工减料，否则事倍功半。关于做科研，感受最深的是，技术重要，但思维也很重要。科研者不仅知道怎么去做，最重要的是他知道为什么要这样做，知道需要这样做，他懂得怎样运用这些技术去达到自己的目的。所以在掌握操作技术时，最重要的还是要学会去想。另外，做科研要不断地去追寻最新的动态，不能只圈在自己的小世界里，但是，在摄入别人的成果时，要记住时刻保持质疑，敢于去质疑，全信则不如不信。师兄姐们在运用别人的成果之前，总要自己先验证，所谓实践是检验真理的唯一标准，用在这里也不为过。l 学无止境每周一次的小组会议也是印象比较深刻的。除了讨论各自的工作进展外，还有论文的分享。我很欣赏这一点，虽然实验组里的人都很经常看文献，但就算看同一篇文章也会有不同的理解和想法。每周的组会让一个人来分析一篇较新的课题组相关的论文，让其他成员学到自己不知道的东西，也交流了大家的想法，学习别人的思维方式。据说还会有相关的专业课题的讲授，让我深深感受到学无止境啊。术业有专功，每个人总有自己专长的，也就肯定有自己不懂的，只有不断地学习，才不会落后，懂得越多，也能更好的服务于自己的专长。实习日程时间内容摘要721l 报到l 了解实验室布局l 了解可诱导多功能干细胞（IPS）的概况l 了解基本的文献查阅、检索方法72223l 阅读IPS相关文献（体细胞重编程技术，什么是IPS，IPS的发现过程和获取方法，IPS的鉴定，IPS的研究方向）724l 查阅分子克隆相关内容l 观摩实验1、分子克隆的部分流程：菌落PCRDNA电泳阳性菌落扩增（保种，大提）2、质粒试剂盒抽提（小提）725l 观摩实验：实时荧光定量PCR（Real Time PCR）l XX师兄（实验室小组长，博士生）畅谈IPS并进行疑难解答726l 查阅染色质免疫共沉淀（ChIP）相关内容727l 开组会：实验室各成员工作汇报及讨论，XX师兄分享论文epigenetic memory in induced pluripotent stem cellsl 进一步学习实时定量PCR（Real Time PCR）相关内容728l 观摩实验：1、zed1基因的克隆过程2、Real Time PCR3、染色质免疫共沉淀（CHIP）部分流程：配制CHIP需用的试剂备用，加入一抗过夜72930l 查阅资料（以甲基化定量分析DNA为主）731l 操作实验：菌落PCR（比较不同引物克隆Oct4基因的效力）812l 查阅资料（以引物设计为主）l 阅读文献l 讨论疑难点83l 开组会：实验室各成员工作汇报及讨论84l 操作实验：Gtl2基因的甲基化检测流程：把提好的DNA酶切获得目的片段制作珠子用焦亚硫酸盐处理并过夜85l 继续操作实验：gtl2基因的甲基化检测流程：洗昨天做好的珠子PCRDNA电泳实验结果：无目的条带，失败可能原因分析：低熔点琼脂糖没完全煮融（浓度不够）；珠子没洗干净；PCR引物特异性不高867l 重复操作实验：gtl2基因的甲基化检测实验结果：无目的条带，失败可能原因分析：琼脂糖有问题或是没完全煮融； PCR引物特异性不高88l 查阅TRIzol提取法提取RNA的相关内容l 学习载体与目的片段连接的及其具体操作方法89l 观摩实验：1、TRIzol提取法提取RNA2、RT-PCRl 操作实验：用试剂盒提取质粒l 参观研究生Poster展810l 开组会：实验室各成员工作汇报及讨论论文分享l 操作实验：流程：洗昨天师姐做好的珠子PCRDNA电泳结果：无目的条带，失败可能原因分析：焦亚硫酸钠试剂有问题；引物特异性不高811l 查阅资料l 观摩实验：转化l 练习使用NCBI网站中的Entrez信息查询系统检索并提取人瘦素（leptin）的各种核酸序列812l 查阅资料l 体验细胞间工作环境l 观摩实验：转导l 使用倒置荧光显微镜观察IPS细胞及转导过程中的细胞813l 查阅资料，整理资料结束语整个暑期实践，掌握了IPS研究中的基本知识，了解了IPS最新的研究动态。学习了一些先进技术原理和要领，例如分子克隆，CHIP，引物设计，转化转导等。掌握了一些常用的技术及其操作，例如序列搜索等生物信息学内容，菌落PCR，实时定量PCR，甲基化检测等。熟练了一些基本实验操作，如PCR，DNA电泳等。实习给我最大的三点感触，一是，我不再只是从别人口中听，从别人文字中看，而是零距离接触自己想知道的世界，亲身经历想做的事情。二是，实习给了我主动去学习新知识的动力和毅力。三是给了我一段值得珍藏的回忆。我没有像师兄XX，XX，同届同学XX等人那样，能在sience上发表文章，