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文档简介
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂,请拿出你的课本,水笔,还有你的激情和勇气!,共勉:失去金钱的人损失甚少,失去健康的人损失极多,失去勇气的人损失一切。 学.科.网zxxk.组卷网,【实验过程】,根尖培养 标本制作 观 察 解离漂洗染色制片学.科.网zxxk.,1、洋葱根尖的培养:,实验前一周培养,待根长到5cm时可进行观察。,在培养洋葱根尖时,经常换水的目的是增加水中的氧气,防止根进行无氧呼吸造成酒精中毒,出现烂根现象。,2、玻片标本的制作,解离 取材:取根尖23mm。 *注意:应剪取生长旺盛、带有分生区的根尖。一般在10:0014:00取材比较好,因为此时洋葱根尖细胞分裂最活跃学.科.网,解离 解离液:质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按体积比1:1混合。 时间: 35 min(温室) 目的:用药液使组织中的细胞分散开来。 程度:根尖酥软。 *时间不可过短,否则细胞无法分开,以根尖酥软为标志;时间也不可过长,否则根尖过分酥软,无法用镊子夹取,影响漂洗和染色,染色体成分也可能被破坏。,溶液:清水 时间:10 min。 目的:洗去根尖组织中的酸,有利于碱性染料着色,(2)漂洗,染色液:质量浓度0.01 g/mL或0.02 g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)。 时间:35 min。 *龙胆紫溶液的浓度不宜过大,染色时间不宜过长,否则不仅能使染色体着色,还会使其周围其他结构也被着色,影响观察效果,(3)染色,用镊子将这段根尖取出来,放在载玻片上,并用镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻地按压载玻片。,目的:使细胞分散开来,有利于观察,*压片时必须用力适当,过重会将组织压烂,过轻则细胞未分散,二者都将影响观察。,(4)制片,装片的制作流程:解离漂洗染色制片,3、观察:,先用低倍镜找到分生区细胞,再换上高倍镜观察。 *先用低倍镜找到分生区细胞,其特点是细胞呈正方形,排列紧密。然后,再用高倍镜观察。观察时,要慢慢移动装片,寻找不同分裂的时期,成熟区,伸长区,分生区,根冠,观察时的注意点,由于在根尖只有分生区的细胞能够进行有丝分裂,所以要寻找分生区。分生区的特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞处于分裂状态。 不能用高倍镜直接找分生区,因为高倍镜所观察的视野范围很小,难以发现分生区。 分生区细胞中,间期的细胞最多,因为在细胞周期中,间期所占时间最长。,在显微镜下,不能观察到细胞能从中期到后期的变化过程,因为在解离时就已将细胞杀死,所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。 若观察洋葱根尖时不能看到染色体,其原因可能是:没有找到分生区细胞;没有找到处于分裂期的细胞;染液过稀或染色时间过短等。 如果观察的是洋葱的表皮细胞则不能看到染色体,因为洋葱表皮细胞一般不分裂。,制作洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么? (1)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间; (2)解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离; (3)压片时,用力的大小要适当,要使根尖被压平,细胞分散开
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