采集病料的原则和技术要点.doc

采集病料的原则和技术要点采集病料是微生物学诊断、血清学诊断和病理组织学诊断等实验室诊断方法的重要环节，直接影响着检验结果的准确性和速度。为了提高诊断的时效性和准确性，以便及时制定和落实防制措施，减少经济损失，采集病料时须把握以下原则和技术要点。1 时间性和新鲜性采集的病料力求新鲜。能进行活体采集的病料尽量进行活体采集，如血液、乳汁、尿液以及禽类气管拭子和泄殖腔拭子等。患病动物死亡后，随着时间的延长，尸体腐败，组织器官的病理变化会发生一定程度的改变，病原体种类也可能增加，有碍于病原体的检查。因此内脏病料的采集，须于患病动物死亡后立即进行，一般不超过6h，夏季最好不要超过4h，冬季北方可适当延长至24h。为了保证病料的新鲜性，对经济价值小的动物或濒死期动物可直接致死后采集病料。采集的病料要尽快检查，以防腐败。如不能立即检查，可暂时保存于冰箱的冷藏室或阴凉的角落，但不可冻结保存。自己无条件检查需送检时，应在病料中加入适当的保存液，使病料尽量保持新鲜或接近新鲜状态。细菌材料置30%甘油生理盐水中；病毒材料置50%甘油生理盐水中，如作病毒分离还应加入一定量的双抗（青霉素、链霉素）处理；血清材料按每9mL加入1mL 5%的石炭酸；供细菌学或病毒学检查的血液，按每9mL加入1mL的抗凝剂（3.8枸橼酸钠溶液），因血液凝固的速度较快，可先在容器中加入抗凝剂，再接入血液，并将其摇匀；作病理组织切片的病料置10%的福尔马林溶液或95%的酒精中，保存液的量为病料的810倍，如用10福尔马林液固定，应在24h后更换一次保存液。2 针对性和适量性采集的病料种类过多，检查工作量增大，延长了诊断的时间，使防制工作不能及时提出和落实。在实际工作中，应结合流行病学特点、临诊症状和剖检变化，大致怀疑是何种疫病，根据该种疫病的特点和需采取的检查方法不同，采集相关的病料，如怀疑是口蹄疫，可取水疱皮和水疱液检查；怀疑是蠕虫病感染，可取粪便检查虫卵；如要用血清学试验检查血清中的抗体，可采集血液分离血清。当提不出怀疑对象时，则应全面采集病料，通常采取心血、体液、分泌物、胃肠内容物和各主要器官组织及各种病变组织，运用多种方法检查。采集病料的数量既要满足检查的需要，又要防止盛装和送检时的累赘。淋巴结和小动物（鸡、兔）的实质器官可直接摘取，大动物（马、牛、羊、猪）的实质器官取12cm3的小方块，分别置无菌容器中；肠道取710cm长度，经双结扎后剪取。如果不作培养检查和运行性检查，对细菌材料和血液原虫材料可作成抹片。血液、脓液等液体病料作涂片，脏器病料作触片，每种病料作23张。如要送检，每两张抹片涂面相对，玻片之间靠边处用火柴梗间隔开，重叠成一定厚度后，两边用线绳捆扎或用胶带缠紧。另外，为了防止单一动物病料引起误诊，在采集病料时应多采集几个动物的病料。3 无菌性和安全性为了防止环境中的微生物污染病料而干扰检查，采集病料时必须坚持无菌操作。操作人员要洗手消毒；使用的解剖器械要灭菌或消毒，每采集一种病料应换一套器械，因条件所限只有一套器械时，每采集一种病料，用酒精棉球将器械擦拭消毒一次；盛装病料的试管、平皿、小瓶等事先高压灭菌；不同种动物的病料、同种动物不同个体的病料和同一动物不同脏器病料均应分别盛放，不可混放于一起，以防病料之间相互污染，影响检查结果的准确性。在坚持无菌操作的基础上，还应注意个人防护和防止病原扩散。操作者戴上一次性防护手套或穿上一次性防护衣，戴上口罩和眼镜。针对败血症、菌血症、病毒血症、虫血症等血液疾病，在采集血液时最好取末梢血液，而不要通过大静脉采血。对于传染性强、病死率高的狂犬病在采取脑组织时，可将整个头部割下，包入浸过0.1升汞液的纱布或油布中，装入木箱或铁桶中送检。采集病料完毕时，将尸体无害化处理，不可随意抛扔。4 解剖前检查对死亡动物不可急于解剖检查和采集病料，而应仔细观察尸体外观变化，如被毛是否粗乱、机体瘦弱程度、脱水情况、皮肤变化、可视黏膜变化、天然孔有无出血等。如疑为炭疽（急性死亡、天然孔出血），切不可解剖，经取末梢血液检查排除炭疽后，方可解剖检查，并采集病料。5 顺序性采集病料的顺序同解剖检查的顺序，即先胸腔后腹腔、先实质器官后管状器官。针对禽尸，先用清水或消毒液打湿被毛，以防羽毛飞扬而影响操作，割开大腿内侧和腹侧壁之间的疏松皮肤，把两腿向两边拉伸，使髋关节断离，让禽尸平仰于解剖板（盘）上，围绕腹部切开腹腔皮肤，剥离胸部和腿部皮肤，暴露胸肌和腿肌，再从腹后部开口，并沿腹壁两侧剪断腹壁组织，再向前剪断肋骨，用力掀起胸骨，暴露胸腹腔，此时可按顺序采集病料。哺乳动物尸体自下颌部起沿腹部正中线到腹后部依次切开皮肤、皮下层，暴露胸腹腔。6 计划性和送检单采集病料不可盲目进行，而是事先要准备好必备材料，如解剖器械、适当的盛放器具、消毒用品和防护用品等，并进行解剖器械和盛放器具的灭菌或消毒。送检的病料应在容器或玻片上编号，同时附上送检单，注明所采动物的品种