课件：细菌对抗菌药物敏感试验.ppt

细菌对抗菌药物 敏感试验 antimicrobial suceptibility test AST,2019,-,1,第一节,抗菌药物,2019,-,2,一.抗菌药物,能抑制或杀死微生物 有一定的毒副作用 有一定的抗菌谱 细菌可对其产生耐药性变异,2019,-,3,抗生素: -内酰胺类抗生素: 青霉素,头孢菌素,其他-内酰胺类抗生素, -内酰胺类酶抑制剂 氨基糖苷类 大环内酯类,二.常用抗菌药物种类,2019,-,4,抗菌药物 磺胺药 喹诺酮类 呋喃类 甲硝唑,2019,-,5,第二节,耐药性 细菌不能被常规治疗剂量达到的药物血浓度杀死或抑制称,2019,-,6,药浓度,MIC,不同菌株,血药浓度,治疗剂量,中毒剂量,耐药株,敏感株,2019,-,7,一.概述,耐药性形成是因为细菌的基因突变或获得了耐药基因 耐药性可在株间,种间传递 抗菌药物仅对耐药菌起选择作用 细菌对抗菌药物的耐药性可以是多重的 细菌对结构相似药物间, 可有交叉耐药性,2019,-,8,二.耐药性产生机制,-内酰胺类酶形成:破坏-内酰胺类药物,有多种 钝化酶: 使抗生素失活,如氨基糖苷类 靶位改变:形成新的,低亲合力的青霉素结合蛋白 渗透障碍或外排作用:使药物不易进入菌细胞内 代谢途径改变:绕过药物作用环节,2019,-,9,第三节,细菌对抗菌药物的 敏感性试验,2019,-,10,一.药敏试验目的,指导被试患者用药 某一地区的耐药性调查 鉴定细菌 新药评价,2019,-,11,二.药敏试验原理,将细菌接种在无被测药拮抗剂并能提供细菌良好生长的环境中 加入一定量抗菌药物 观察细菌生长被抑制情况,2019,-,12,三.被测药物选择,按菌种和抗菌谱 同类药物选一个 按医生要求 按医院感染科规定,2019,-,13,四.药敏试验方法,2019,-,14,1.稀释法,可在液体或固体培养基中进行 用培养基对抗菌药物作一系列稀释 加入一定量细菌 孵育后读取MIC 转种未生长管并计数细菌后读取MBC,2019,-,15,药 50 25 12.5 6.3 3.2 1.6 0.8 0.4 0,加入等量细菌, 孵育18-24h,结果 + + + + +,1 2 3 4 5 6 7 8 C,计数 0 105 368 760 /ml 48万*,MIC 6.3 g/ml MBC 12.5 g/ml ( 0.1%480000480) *接种时菌数,g/ml,2019,-,16,药 50 25 12.5 6.3g/ml,3.2 1.6 0.8 C,生长,MIC 1 0.8 2= 6.3 3 =25 4 = 12.5 5= 1.6 g/ml,1,2,3,4,5,2019,-,17,也可用单一浓度进行。如对甲氧西林,万古霉素等耐药性测定 或用两个浓度进行,如区分中介和耐药浓度 也可用机器进行,2019,-,18,2019,-,19,2019,-,20,附:血清抗菌活性测定,将患者血清作系列稀释 测自身感染部位分离出的病原菌的最低抑菌和杀菌效价,2019,-,21,2.纸片琼脂扩散法(K-B法),以一定量细菌在平板表面紧密接种,让其长成均匀的菌苔 置数张含定量抗菌药物的纸片于其上,其间需有一定间距 孵育后测定抑菌环直径 抑菌环大小和MIC的高低呈负相关,2019,-,22,2019,-,23,MIC渐高,抑菌环渐大,血药浓度,耐药,敏感,2019,-,24,附:血清抗菌药物浓度测定,按纸片琼脂扩散法进行 用不同量抗菌药物的抑菌环直径对浓度作标准曲线 测定血清抑菌环后通过标准曲线查到浓度,2019,-,25,渐高,抑菌环渐大,药浓度,2019,-,26,3.E试验,结合稀释法与纸片琼脂扩散法 纸条上有药物的浓度梯度 在纸条与抑菌环交界处读取抑菌浓度(IC),2019,-,27,IC,抑菌环,药物扩散范围,含药纸条,药浓度,2019,-,28,2019,-,29,4.联合抗菌试验,观察两种抗菌药物间的相互关系: 协同,相加,无关,拮抗 可用两药分别稀释后混合的方法法测MIC或MBC读取FIC 或用临近置两药纸片的琼脂扩散法进行,观察抑菌圈的形状,2019,-,30,FIC的读取,A药联合时的MIC B药联合时的MIC FIC= + A药单测时的MIC B药单测时的MIC,2 拮抗,2019,-,31,6.双相纸片试验,用于检测ESBL(extended spectrum lactam) 该酶为克拉维酸抑制 按纸片琼脂扩散法进行,中心贴阿莫西林/克拉维酸,周边贴头孢曲松等作为指示 孵育后,如抑菌环向中心扩大,为阳性 也可分别测量抑菌环,相差5mm以上为阳性,2019,-,32,5.-内酰胺类酶检测,碘淀粉测定法:被测菌置青霉素溶液中,室温30min,加淀粉和碘液,呈蓝色,震摇,若酶阳性,生成青霉素噻唑酸与碘结合,10min内蓝色消失 头孢硝噻吩滤纸片法:置被测菌于商品头孢硝噻吩滤纸片上,由黄变红为阳性,2019,-,33,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and m