课件：第七章-细菌各论.ppt

第七章 细菌学各论 第一节 球菌属 第二节 肠杆菌科 第三节 芽孢杆菌属 第四节 梭菌属 第五节 其他病原菌,2019,-,1,第一节 球菌属,一、 葡萄球菌 1.形态结构 2. 培养特性 3.生化特性 4. 抵抗力 5.分类 6.致病性 7.微生物学诊断,2019,-,2,典型的葡萄球菌为圆形，直径0.51.5um，排列成葡萄串状），但在脓汁中或生长在液体培养基中的球菌常呈双球或短链排列。用青霉素可诱导成L型。 葡萄串状，无规则排列，无芽胞，无荚膜（有些有荚膜或粘液层），无鞭毛，不运动。 G+，但衰老、死亡或被白细胞吞噬以及耐青霉素的菌株呈阴性。,2019,-,3,2019,-,4,金黄色葡萄球菌,2019,-,5,(SEM x23,000)葡萄球菌,2019,-,6,2 培养特性,需氧或兼性厌氧，触酶阳性，氧化酶阴性，无运动力。 可在普通培养基、血琼脂等生长，不在麦康凯（Mac-Conkey）培养基生长。最活温度35- 40。最适pH7.07.5。 致病性菌株多能产生脂溶性的黄色或柠檬色素，不着染培养基。 能耐受高浓度氯化钠(5-10%);-却浦漫培养基,2019,-,7,生长表现,1普通平板：湿润，隆起的圆形菌落，直径12mm，有时达4-5mm。菌落颜色依菌株而异，初为灰白色，继而为金黄色，白色柠檬色。 色素的形成依培养条件而异，通常在22或在固体培养基中含有糖、牛乳或血清等，产生色素较多；有O2及CO2 环境下易形成色素。 2血平板：菌落较大，明显溶血，溶血菌株多为致病菌。 3普通肉汤：均匀沉浊，管底有絮状沉淀，培养23天后，产生菌环，管底形成多量粘稠沉淀。,2019,-,8,金黄色葡萄球菌平板菌落照片,2019,-,9,2019,-,10,3.生化特征,生化反应并不恒定，常因菌株及培养条件而异。 多数分解：乳糖，葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，产酸不产气。 致病菌株多分解：甘露醇，硝酸盐还原阳性，靛基质，接触酶。 致病菌株血浆凝固酶试验阳性。,2019,-,11,4. 抵抗力,在无芽孢类细菌中抵抗力最强的一 种.80,30-60min; 干燥脓汁存活2-6m; 常用消毒剂:3-5%石炭酸,70%乙醇,1-3%龙胆紫,新洁尔灭 对青霉素一般耐药,磺胺类药物的敏感性也较低.,2019,-,12,5.分类 1过去按色素分：金色葡萄球菌、白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌。 2伯杰手册（1974）8版，将该属分为3个种： 金色萄球菌、表皮萄球菌、腐生萄球菌。 3伯杰手册 9版（1986）将该属分为20多个种，有：金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌、山羊葡萄球菌、鸡葡萄球菌、海豚葡萄球菌、金色葡萄球菌。,2019,-,13,金黄色葡萄球菌（S.aureus） 表皮葡萄球菌（S.epidermidis） 腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）,分类,色素、生化反应,（致病性葡萄球菌的鉴别）,2019,-,14,6.致病性及毒力因子,金色葡萄球菌致病性强,常引起两类疾病 化脓性疾病 毒素性疾病，被葡萄球菌污染的食物或饲料引起人或动物的中毒性呕吐、肠炎及人的毒素休克综合征等。 葡萄球菌的某些细胞壁结构具有毒力因子的作用， 最主要的毒力因子还是毒素及酶。 溶血素(Alphatoxin） 肠毒素（Enterotoxin） 凝固酶(Coagulase) 耐热核酸酶 Heat stable nuclease 葡萄球菌激酶(Staphylokinase，Sak) 毒素休克综合征毒素1(Toxic shock syndrome toxin1,TSST-1),2019,-,15,溶血素(hemolysin),毒素：引起牛羊的坏疽性乳腺炎，还可以导致白C崩解，作用于平滑肌细胞的血管壁细胞，引起平滑肌收缩，麻痹，坏死。它是不耐热的蛋白质对哺乳动物红C有溶解作用。人源菌株多产生a毒素。 毒素：引起绵羊、牛红C溶解，兔、鸡、马红C不溶解，与乳腺炎有关，具有热冷溶血现象（37不溶血，移至4时溶血）。动物分离株多产生毒素。 毒素：引起多种动物红C溶解。 型：培养时CO2浓度增加时出现溶血现象，引起各种动物红C溶解。,2019,-,16,肠毒素（Enterotoxin）,引致人类食物中毒，刺激呕吐中枢，表现呕吐，并腹泻。除猫崽及幼猴外，大多数动物对此毒素有很强的抵抗力。 结构相似的一组蛋白质，分子量26 00034 000，耐热抗酸，能经受 10030min或胃蛋白酶的水解。 根据抗原性的差异可将其分为A、B、C1-C3、D、E 7个型，AD两型最为常见。,2019,-,17,葡萄球菌激酶(Staphylokinase，Sak) 毒素休克综合征毒素1(Toxic shock syndrome toxin1,TSST-1),Sak是由金黄色葡萄球菌分泌的一种纤溶酶原激活剂，可用于急性心肌梗塞(AMl)和血栓塞病人的溶栓治疗。 Sak是一个15.5kD单链蛋白，不含二硫键。 TSST-1旧名肠毒素 F和致热性外毒素C，是分子量为 22 000的蛋白质，是一种超抗原，引致人类变态反应，发生毒素休克综合征。 已证实从牛分离的菌株能与人分离株产生同样的TSST-1，而绵羊和山羊分离株的TSST-1分子量及抗原性均相似，但等电点不同。TSST-1在动物的致病作用尚不清楚。,2019,-,18,凝固酶(Coagulase),能使含有抗凝剂的家兔或人的血浆凝固，有助于致病菌株抵御宿主体内吞噬细胞和杀菌物质的作用，同时也便感染局限化。 检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标，致病株多数为凝固酶阳性，非致病株则为阴性。 分泌于菌体外，称游离凝固酶(free coagulase)，类似凝血酶原的作用， 结合在菌体表面，称结合凝固酶(bond coagulase)，或凝聚因子(clumping factor)，可使血浆纤维蛋白与菌体交联，引起菌体凝集。 凝固酶耐热，经100 30min或高压灭菌作用仅降低少量活性；具有抗原性，易被蛋白酶分解破坏。,2019,-,19,耐热核酸酶（Heat stable nuclease）,100作用 15min不失去活性，由致病菌株产生。感染部位的组织细胞和白细胞崩解时释放出核酸，使渗出液粘性增加，此酶能迅速分解核酸，利于病菌扩散。 目前也将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标之一。,2019,-,20,7.微生物学诊断,1.确定是不是葡萄球菌; 病料 固体培养基 G+,葡萄串状球菌,脓汁，血液等,2019,-,21,2.确定是否具有致病性: 固体培养基上产生的色素为金黄色; 血平板上产生溶血 血浆凝固酶试验阳性 厌氧条件下发酵甘露醇 动物试验阳性 家兔皮下接种1ml ，24h肉汤培养物，可引起 局部皮肤溃疡坏死；静脉接种0.10.5ml， 于接种后2448h死亡，剖检可见脏器有大小 不等脓肿。,2019,-,22,2019,-,23,2019,-,24,2019,-,25,毒素的检查：,发生食物中毒时将呕吐物离心取上清10030min破坏其它毒素注入幼猫静脉或腹腔15min2h内出现急性肠炎症状，表明有肠毒素存在。,2019,-,26,八、免疫防治 1加强饲养管理，避免创伤。 2无好的疫苗，感染病愈后，不产生免疫力，可再次感染。 3抗生素治疗 表皮葡萄球菌：引起仔猪渗出性皮炎。 腐生性葡萄球菌：引起尿道感染。,2019,-,27,二 链球菌 (Streptococcus),分类 形态与染色 培养特性 生理生化特性 致病性 抵抗力 微生物学诊断,2019,-,28,1.分类,1按溶血能力分： 型溶血链球菌：菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未溶解，血红蛋白变为绿色，这种细菌致病力不强，多为条件性致病菌。 型溶血链球菌：菌落周围形成完全透明的溶血环，红C完全溶解，致病力强，引起各种疾病。 型溶血链球菌：无溶血现象，非致病菌。,2019,-,29,2019,-,30,2019,-,31,分类,根据溶血现象分类,2019,-,32,2 形态及染色特征,链球菌呈圆形或卵圆形，直径小于2.0um，常排列成链状或成双。肉汤内对数生长期的链球菌，常呈长链排列。 一般致病性链球菌的链较长，非致病性菌株较短。 革兰氏阳性。老龄的培养物或被吞噬细胞吞噬的细菌呈现阴性。 除个别D群自外，均无鞭毛。A群等的一些菌株有菌毛。A、BC群等多数有荚膜。,2019,-,33,链球菌,2019,-,34,链球菌,2019,-,35,引起血液和心内膜炎链球菌,2019,-,36,咽炎和皮肤感染的链球菌,2019,-,37,2019,-,38,3 培养特性,致病菌营养要求较高，普通培养基中生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。 大多数为兼性厌氧菌，少数为厌氧菌。最适生长温度37，pH7.47.6。 在血液琼脂平板上长成直径0.11.0mm，灰白色，表面光滑，边缘整齐的小菌落。血清肉汤中生长，初是均匀浑浊，后因细菌形成长链呈颗粒状沉淀管底，上清透明。 多数致病菌株具有溶血能力，溶血环的大小和类型因菌株而异。B、D群的一些菌株可产生橙红或黄色色素。3.15%NaCl中不生长（葡萄球菌生长）、40%胆汁中可生长。,2019,-,39,2019,-,40,化脓性链球菌Streptococcus pyogenes,2019,-,41,4 生化特征,本属细菌都能发酵葡萄糖、蔗糖，对其他糖的利用能力则因不同菌种而异，利用生化特性可作菌种鉴定的依据之一。,2019,-,42,5 毒素和酶,致病性链球菌产生多种毒素和酶，引起多种动物发病。 1溶血素：有溶解红C，杀死白C和神经C，毒害心肌作用，分为对氧敏感和对氧稳定即O和S两种。 溶血素O （Steptolysin O SLO）：为蛋白质，对氧敏感，耐热，遇O2发生氧化失去溶血力，遇还原剂可恢复溶血作用 ，抗原性强。 溶血素S （SLS）：含糖的小分子肽，对氧稳定，对热和酸敏感，无抗原性。,2019,-,43,2致热外毒素（旧称红疹毒素）：A群产生的一种外毒素，皮内注射引起局部或全身红疹，有抗原性。 3DNA酶 4溶纤维蛋白酶 5细胞壁上的脂磷壁酸：使细菌吸附于粘膜上皮上，其荚膜成分、M蛋白具有抗吞噬作用。,2019,-,44,6 抵抗力及免疫性,抵抗力 本属细菌的抵抗力不强，对热较敏感，煮沸可很快被杀死，常用浓度的各种消毒药均能杀死。对青霉素、磺胺类药物敏感。 免疫性 链球菌的抗原结构比较复杂，机体感染后有多种抗体产生，已知抗M蛋白的抗体具有保护作用，M蛋白有多种抗原型，各型间缺乏有效的交叉保护。我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。,2019,-,45,7 微生物学诊断,1.取材、涂片、染色、镜检。 2.分离培养：血平板；血清肉汤。 3.生化试验 4.动物致病性试验：小白鼠腹腔注射0.20.5ml 24h肉汤培养物，24h48h死亡。 5.分群定型：必须作血清学试验。,2019,-,46,微生物学检查法,标本,直接涂片镜检,革兰阳性链球菌,分离培养,脓汁，血液，咽喉拭子,与金葡菌的鉴别,与肺炎链球菌的鉴别,2019,-,47,血清学检查,抗“O”试验（ASO test）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，在加入SLO 乳胶试剂，因 血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。 原理：中和试验 方法：间接凝集 结果：效价大于400单位 意义：风湿热及其活动性的辅助诊断,2019,-,48,8 几种重要的链球菌 1无乳链球菌，停乳链球菌，乳房链球菌。 都是引起牛，山羊，绵羊乳房炎的病原体，凡是有乳牛的地方， 就有本菌存在。 CAMP试验Christie, Atkins, Much-peterson） 在血平板上先接种一条金色葡萄球菌的划线，与此线垂直接种乳 汁或分离培养物（但不接触），原来不溶血或溶血不明显的无乳 链球菌在有金色葡萄球菌产物存在时，产生明显型溶血。此实 验可以区分无乳链球菌与其它链球菌。 CAMP试验不是特异的，C、F、G群中有些链球菌也可产生CAMP 现象。猪放线杆菌也有CAMP现象。 原因：无乳链球菌产生CAMP因子，这种因子可接合于被葡萄球菌神经磷脂酶C改变了的红细胞膜上，引起红C大量溶解。,2019,-,49,2019,-,50,2马链球菌兽疫亚种（旧称兽疫链球菌） 引起马的创伤感染，败血症、子宫炎、流产； 牛乳房炎、子宫炎。 猪：败血症，关节炎，流产； 羊：败血症，心肌炎，腹膜为，肺炎。 鸡：败血症。,2019,-,51,3马链球菌马亚种（旧称马腺疫链球菌） 引起马的腺疫，存在于马下颌淋巴结的脓灶，鼻液及脓汁中，主要侵害0.55岁的马。 4肺炎链球菌： 引起人