第12章 抗生素类药物的分析幻灯片

第十一章 抗生素类药物的分析,第一节 内酰胺类抗生素,第二节 氨基糖苷类抗生素,第三节 四环素类抗生素,抗生素的定义,抗生素是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物，对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。,抗生素的来源,1. 生物合成（发酵） 2. 化学合成或半合成,抗生素质量的复杂性,产品稳定性差,分子结构大多不稳 定，降解后疗效下 降、失效或增加毒 副作用,发酵过程不易控制 易受污染,生产工艺复杂,发酵液中杂质,无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降解产物、色素、热原、毒性物质,增加 异常毒性、细菌内毒素、热原、 降压物质、无菌,检查,含量测定方法,（一）生物学方法,测定抗生素抑菌或杀菌的能力,（二）化学及物理化学方法,以理化方法测定主药含量,抗生素的活性以效价单位来表示：,每ml或每mg中含有某种抗生素的有效成分的多少，用单位（u）或g 表示。 1mg青霉素G钠盐定为1667单位 1mg青霉素G钾盐的单位（u） 1595u/mg,分类（按结构与性质）： 内酰胺类、氨基糖苷类、 四环素类、大环内酯类、 氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、其他抗生素类,第一节 内酰胺类抗生素,C,H,青霉素,（青霉素钾、钠）,氨苄西林 （氨苄青霉素）,阿莫西林 （羟氨苄青霉素）,普鲁卡因青霉素,头孢氨苄,头孢拉啶,头孢羟氨苄,头孢噻吩钠,一、结构特点与性质,与碱金属(Na+、K+)成盐易溶于水,（一）羧基酸性,与有机碱(普鲁卡因)成盐难溶于水,普鲁卡因青霉素,（二）手性C 旋光性,头孢菌素类 C6 C7,青霉素类 C3 C5 C6,（三）共轭体系 UV,头孢菌素类 母核有共轭体系,青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基,（四）内酰胺环,水溶液 不稳定,干燥纯净 稳定,不稳定性因素,四元环张力大,酰胺键易水解,例,青霉素的降解反应,（一）呈色反应,1. 羟肟酸铁反应,-内酰胺类,二、鉴别试验,（红、棕、褐）,2. 茚三酮反应 -氨基,3. 双缩脲反应,似肽键,4. 与重氮苯磺酸反应 头孢哌酮,酚羟基,5. 与变色酸-硫酸反应,青霉素 阿莫西林 氨苄西林,显色,1. K+、Na+的火焰反应,（二）各种盐的反应,2. 沉淀反应（青霉素盐）,遇酸,3. 重氮化 - 偶合反应 芳伯氨基,（三）光谱法,1、UV法,样品、分解产物,2、IR法,3180cm-1 N-H,内酰胺 C=O,1780cm-1,3470cm-1 O-H,1690cm-1 仲酰胺C=O,1250cm-1 C-O,以阿莫西林为例,三、杂质检查,药物 检查项目 检查方法 头孢他啶 聚合物 HPLC法 头孢曲松钠 头孢哌酮钠 头孢噻肟钠 头孢呋辛酯 有关物质和异构体 HPLC法 青霉素钾（钠） 吸收度 紫外分光光度法,第二节 氨基糖苷类抗生素,链霉素 双氢链霉素 新霉素 卡那霉素 庆大霉素 巴龙霉素,链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺,链霉胍,链霉糖,N-甲基-L- 葡萄糖胺,链霉胍,链霉糖,N-甲基-L- 葡萄糖胺,绛红糖胺 + 脱氧链霉胺 + 加洛糖胺,绛红糖胺,紫素胺,2-脱氧链霉胺,加洛糖胺,N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺,庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3,一、结构与性质,1. 性状 白色或类白色粉末,2. 水解性 硫酸链霉素在过酸或过碱条件下易 水解失效 庆大霉素性质稳定,3. 氧化还原性,二、鉴别,1.茚三酮反应 羟基胺结构,2.N-甲基葡萄糖胺反应,3. 麦芽酚反应,链霉素特征反应,8-羟基喹啉,4. 坂口反应 链霉胍特有反应,-萘酚,H+,5. 硫酸盐鉴别,6. 紫外分光光度法,7.色谱法,三、特殊杂质检查,（一）链霉素杂质,链霉素B（甘露糖链霉素）,1.来源 反应中间体 2.方法 TLC中的对照品法（BP）,发酵菌种不同 工艺差别,规定控制各组分的相对百分含量,（二）庆大霉素C组分的测定,四、含量测定,微生物检定法 各国药典主要采用,HPLC法 常用于体内药分,第三节 四环素类抗生素,四环素（TC）tetracycline,土霉素 (OTC) oxytetracycline,多西环素 (DOXC) doxycycline,脱氧土霉素,一、结构与性质,（一）两性,1. 与酸、碱均能成盐,2.强酸或强碱中溶解度,（三） UV和荧光性质,（四） 与金属离子络合,pH3 7.5 荧光,（二） 旋光性,（五）不稳定性,1.差向异构化,淡黄黑,蓝色荧光,差向四环素,（土霉素、多西环素不易差向异构化）,2. 降解反应,（1）酸性下降解,max = 445nm,max = 435nm,橙黄色,脱水金霉素,脱水四环素,四环素 金霉素,2,pH,（2）碱性下降解,二、鉴别试验,（一）浓H2SO4反应,（二） FeCl3反应,（三）氯化物反应 （四）比旋度 美他环素除外 （五）紫外吸收 （六）荧光 （七）薄层色谱,三、特殊杂质检查, 4-差向四环素（ETC） 脱水四环素（ATC） 差向脱水四环素（EATC） 盐酸金霉素（CTC）,HPLC法（2005版）,（一）盐酸四环素中有关物质检查,（二）吸收度,lmax=490nm A0.20,盐酸土霉素,杂质吸收度,取供试品配成每毫升10mg/ml的溶液至4