大豆油理化指标检验.ppt

大豆油理化指标检验,1.食品中苯并（a）芘的测定； 2.食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)与2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)的测定 3.实验要求：方法；原理；仪器及试剂；步骤；结果分析；注意事项,1.食品中苯并（a）芘的测定,方法一 荧光分光光度法 一.实验原理：试样先用有机溶剂提取，或经造化后提取，再经提取液经液-液分配或色谱柱净化，然后在乙酰化滤纸上分离苯并（a）芘，因苯并（a）芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点，将分离后有苯并（a）芘的滤纸部分剪下，用溶剂浸出后，用荧光分光光度计测荧光强度与标准比较定量。 二.实验试剂：苯（重蒸馏）、环己烷（或石油醚，沸程3060，重蒸馏或经氧化铝柱处理无荧光）、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜、无水乙醇（重蒸馏）、乙醇（95）、无水硫酸钠、氢氧化钾、丙酮（重蒸馏）、展开剂（乙醇95-二氯甲烷2：1）,硅镁型吸附剂：将60目100目筛孔的硅镁吸附剂水洗四次（每次用水量为吸附剂质量的4倍）于垂融漏斗上抽滤干后，再用等量的甲醇洗（甲醇及吸附剂的量克数相等），抽滤干后吸附剂铺于干净瓷盘上，在130干燥5h后，装瓶贮存于干燥器中，临用前加5水减活，混匀并平衡4h以上，最好放置过夜。层析用氧化铝（中性）：120活化4h,50ml环己烷提取一次，合并环己烷提取液，每次用100ml水振摇，洗涤两次，收集环己烷于5060水浴上浓缩至25ml，加适量无水硫酸钠脱水,方法二 目测比色法 一.实验原理：试样经提取、净化后于乙酰化滤纸上层析分离苯并（a）芘，分离出的苯并（a）芘斑点，在波长365nm紫外灯下观察，与标准斑点进行目测比色概略定量。 二.实验试剂：苯（重蒸馏）、环己烷（或石油醚，沸程3060，重蒸馏或经氧化铝柱处理无荧光）、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜、无水乙醇（重蒸馏）、乙醇（95）、无水硫酸钠、氢氧化钾、丙酮（重蒸馏）、展开剂（乙醇95-二氯甲烷2：1）,硅镁型吸附剂：将60目100目筛孔的硅镁吸附剂水洗四次（每次用水量为吸附剂质量的4倍）于垂融漏斗上抽滤干后，再用等量的甲醇洗（甲醇及吸附剂的量克数相等），抽滤干后吸附剂铺于干净瓷盘上，在130干燥5h后，装瓶贮存于干燥器中，临用前加5水减活，混匀并平衡4h以上，最好放置过夜。层析用氧化铝（中性）：120活化4h,50ml环己烷提取一次，合并环己烷提取液，每次用100ml水振摇，洗涤两次，收集环己烷于5060水浴上浓缩至25ml，加适量无水硫酸钠脱水,减压浓缩至0.1ml0.5ml【可根据试样中苯并（a）芘含量而定，应注意不可蒸干】 9.3测定：吸取5、10、15、20或50ul试样浓缩液【可根据试样中苯并（a）芘含量而定】及10、20ul苯并（a）芘标准使用液（0.1ugml），点于同一条乙酰化滤纸上，按5.3.1展开，取出阴干。于暗室紫外灯下目测比较，找出相当于标准斑点荧光强度的试样浓缩液体积，如试样含量太高，可稀释后再重点，尽量使试样浓度在两个标准斑点之间,2.食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)与2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)的测定,方法一 气相色谱法 一.实验原理： 二.实验试剂：,8.2气相色谱参考条件： 色谱柱：长1.5m，内径3mm玻璃柱，质量分数为10QF-1的Gas Chrom Q（80目100目） 检测器：FID 温度：检测室200，进样口200，柱温140 载气流量：氮气70mlmin；氢气50mlmin；空气500mlmin,方法二 薄层色谱法 一.实验原理：用甲醇提取油脂或食品中的抗氧化剂，用薄层色谱定性，根据其在薄层板上显色的最低检出量与标准品最低检出量比较而概略定量，对高脂肪食品中的BHT、BHA、PG能定性检出。 二.实验试剂：甲醇、石油醚（3060）、异辛烷、丙酮、冰乙酸、正己烷、二氧六环、硅胶G：薄层用、聚酰胺粉200目、可溶性淀粉、BHT、BHA、PG混合标准溶液的配制：分别标准称取BHT、BHA、PG（纯度99.9以上）各10mg分别用丙酮溶解，转入三个10ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度。每毫升含1.0mgBHT、BHA、PG，吸取BHT（1.0mgml）1.0ml，BHA(1.0mgml)、PG（1.0mgml）各0.3ml置同一5ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度。此溶液每毫升含0.20mgBHT、0.060mgBHA、0.060mgPG。显色剂：2,6-二氯醌-氯亚胺的乙醇溶液（2gL）,三.实验仪器：减压蒸馏装置、具刻度尾管的浓缩瓶、层析槽：a）24cm6cm4cm b）20cm13cm8cm 玻璃板5cm20cm、10cm20cm 微量注射器：10.0ul 四.实验步骤,标准溶液作内标，比较Rf值，见表1,方法三 比色法 一.实验原理：试样通过水蒸气蒸馏，使BHT分离，用甲醇吸收，遇邻联二茴香胺与亚硝酸钠溶液生成橙红色，用三氯甲烷提取，与标准比较定量。 二.实验试剂：无水氯化钙、甲醇、三氯甲烷、甲醇（50%）、亚硝酸钠溶液（3gL）：避光保存、邻联二茴香胺溶液：称取125mg邻联二茴香胺溶液于50ml棕色容量瓶中，加25ml甲醇，振摇使全部溶解，加50mg活性炭，振摇5min过滤，取20.0ml滤液，置于另一50ml棕色容量瓶中，加盐酸（111）至刻度，临用时现配并