分析前因素对检验结果的影响讲义.ppt

分析前因素引起的误差占实验误差的70%以上。 标本因素是影响检验质量最重要的因素之一，如果标本采集不正确，所有的检验则毫无意义！ 检验科需要得到临床医生、护士和病人的积极配合。,5.4 检验前程序（ISO 15189）,5.4.1 检验申请单至少应包括以下内容： a)患者的唯一标识； b)医师的姓名或其他唯一标识，报告的目的地。若申请医师的地址与接收检验申请实验室的地址不同，应提供其地址； c)只要适用，原始样品的类型和原始解剖部位； d)申请的检验项目； e)患者的相关临床资料，至少应包括性别和出生日期； f)原始样品采集日期和时间； g)实验室收到样品的日期和时间。,5.4 检验前程序（ISO 15189）,5.4.2 实验室管理层应制定及实施正确采集和处理原始样品的专用指导书，并可供负责采集标本者使用； 5.4.3 原始样品采集手册的内容：4项20条。 5.4.4 原始样品采集手册应作为受控文件； 5.4.5 实验室不应接受或处理缺乏正确标识的原始样品(不合格标本）。,5.4 检验前程序（ISO 15189）,5.4.6 实验室应监控样品向实验室的运送： a)根据申请检验项目的性质和实验室相关规定在一定时间内运达； b)在原始样品采集手册规定的温度范围内运送并使用指定的保存剂以保证样品的完整性； c)应以确保对运送者、公众及接收实验室安全的方式运送。,5.4 检验前程序（ISO 15189）,5.4.7应在接收记录簿或计算机中对收到的所有原始样品进行记录。应记录收到样品的日期和时间，同时应记录样品采集者和接收者的标识。 5.4.8应制定有关接受或拒收原始样品的准则。如果接受了不合格样品，应在最终报告中说明问题的性质。 5.4.9实验室应定期评审静脉穿刺取血及取其他样品所需的样品量。 5.4.10 被授权者应对申请和样品系统地评审，并决定所做检验项目及所用检验方法。,5.4 检验前程序（ISO 15189）,5.4.11 实验室应制定接收、处理和报告急诊样品的程序。程序应包括对申请表和原始样品上所有特殊标记的详细说明、原始样品送达实验室检验区的机制、应用的所有快速处理模式和所有应遵循的特殊报告准则。 5.4.12取自原始样品的部分样品应可追溯至最初的原始样品。 5.4.13实验室应有针对口头申请样品检验的书面政策。 5.4.14样品应于规定的一定时间内在保证其性状稳定的条件下保存，以能在出具结果报告后复检或做额外检验。,临床实验室应负的责任,（1) 提供“检验项目患者准备、标本采集、传送、保存要求”的有关文件； (2) 采集标本的容器、抗凝剂、防腐剂质量的保证及检查； （3）标本验收制度。,“标本采集规范”,1. 检验项目名称； 2. 采集何种标本； 3. 采集最佳时间； 4.标本采集量； 5.是否抗凝？用何种抗凝剂？抗凝剂的用量； 6.是否需防腐?用何种防腐剂?防腐剂的用量； 7.保存方法及输送时间； 8. 检验工作室； 9.其他注意事项。,标本的拒收,1.下列情况可拒收（各临床实验室应有规定） 2.溶血、脂血严重者； 3.抗凝血中有凝块；该抗凝未加抗凝剂者； 4.血量不足（如血沉、PT等等)； 5.不应接触空气的接触了空气； 6.采集标本离送检间隔过长者； 7.该加防腐剂未加防腐剂者； 8.用错真空采血管的； 9.惟一性标志错误或不清楚的； 10.细菌培养被污染者； 11.输血/输液中采集的标本； 12.其他。,标本质量的描述,溶血、脂血、黄疸血必须描述。 有其他缺陷的也应描述。,病人检验前总体要求,1. 避免剧烈运动：乳酸、CK 、AST 、LDH、ALP等的升高，故抽血前24h内不做剧烈运动，于清晨采血，住院病人可在起床前取血，匆忙赶到门诊的病人应至少休息15分钟后取血。 2. 注意合理饮食：一般禁食12小时后空 腹取血。饥饿(血糖及蛋白质降低、胆红素升高)、餐后（血糖、血钾、碱性磷酸酶及甘油三酯通常升高，无机磷降低、血清可呈混浊）、饮食量及质如：高蛋白（尿素、血氨、尿素升高）、高脂饮食（乳糜微粒血症导致血清浑浊）、饮水。 3.饮酒的影响：乳酸、尿酸、AST、ALT、-GT、TG增高。,病人检验前总体要求,3.饮酒的影响：立即影响：乳酸、尿酸、等增高，连续饮酒：AST、ALT、-GT、增高，长期饮酒：甘油三酯血症，GGT长期不正常。 4.吸烟的影响 尼古丁可使儿茶酚胺、胃泌素、皮质醇、生长激素、碳氧血红蛋白、血球压积、癌胚抗原升高；使免疫球蛋白降低。 5.避免紧张与情绪激动。影响神经-内分泌功能，影响呼吸，使乳酸等升高。,病人检验前总体要求,6.药物的影响：咖啡因（血糖、胆固醇增高）、冠心平（TG、LDH降低）、口服避孕药（AST、ALT增高）、VC（LDH、血糖、尿糖降低）等。,几种常用抗生素对部分检验项目检测结果的影响,青霉素 苯 唑 氨苄 羧苄 头孢 头孢 硫酸 硫 酸 G钾 青霉素 青霉素 青霉素 噻酚钠 噻肟三嗪 链霉素 庆大霉素 WBC RBC Hgb PLT ALT AST Amy ALP CK LDH Ch GLU Bil BUN ,几种常用镇静剂对部分检验项目检测结果的影响,安 定 利眠宁 苯巴比妥 奋乃静 苯妥英钠 氯丙嗪WBC ？ RBC ？ Hgb ？ PLT ？ ALT AST ALP Ch Glu Bil BUN Ca 尿蛋白 尿 糖 ？ ,病人检验前总体要求,7.取血时体位的影响：体位(站立、坐位、卧位)改变。建议取血时以坐位5min后取血为宜。从立位到卧位时：Hgb下降4%；Hct下降6% ；K下降 1%； Ca下降4%； Alt下降7% ；AST下降9% ；ALP下降9% ；IgG下降7% ；IgA下降7%； IgM下降5%； TG下降6%；T4下降11%。,病人检验前总体要求,8.生理因素： 昼夜生理变化 分析物 峰值时间 谷值时间 范围(日均值的%) 钾 14-16 23-1 5-10 铁 14-18 2-4 50-70 磷酸盐 2-4 8-12 30-40 血红蛋白 6-18 22-24 8-15 TSH 20-2 7-13 5-15 T4 8-12 23-3 10-20 生长素 21-23 1-21 300-400 泌乳素 5-7 10-12 80-100 醛固酮 2-4 12-14 60-80,静脉采血总体要求,1.如在一侧手臂输液时应从对侧手臂采血，禁止在手臂输液同侧采血，以免影响血糖、血钾等的浓度，同时请在检验申请单上注明“输液时采血”。 2.止血带使用时间应少于 l 分钟 ( 建议在针头穿刺进入血管后即可松开止血带)，以免引起血液淤滞 ，造成血管内溶血或血液某些成分的改变 ，特别是测定乳酸时不可使用止血带 ，否则结果偏高。2分钟TC升高5%，5分钟升高15%，15分钟升高30%。,静脉采血总体要求,3.防止溶血：引起溶血的原因： 使用止血带时间过长； 抽吸力太猛； 与抗凝剂混合时过度振荡； 注射器或盛血容器带水； 容器污染； 全血放置时间长； 全血突然冷却或受热； 血液中的泡沫注入试管； K+、LDH、AST、ALT、ACP、T-Bil,溶血标本,项 目 红细胞/血浆 溶血标本/正常标本 Cl 0.50 1.05 Na 0.11 0.81 K 22.7 1.91 P 0.78 -2.64 Ca 0.10 0.96 ALT 6.7 2.2 AST 40.0 3.59 LDH 180.0 8.04 CK 0 14.08 Cr 1.63 1.94 UA 0.55 0.5 GLU 0.82 0.91 BUN 0.82 1.14,静脉采血总体要求,4.正确使用抗凝剂： 一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，防止标本凝血或红细胞形态的改变；采血后立即充分摇匀，防止凝血。,静脉采血总体要求,常用抗凝剂： 枸橼酸钠：测定血沉需用106mmol / L枸橼酸钠抗凝，抗凝剂与血液比例为1:4；凝血试验需用109mmol/L枸橼酸钠，比例为1:9。 肝素：主要用于血氨、血气测定时抗凝，也用于其他一些生化常规测定。抗凝剂比例为5061U肝素/5ml血。 EDTA-K2：用于全血细胞分析及红细胞比积测定，室温下6h红细胞体积不改变。抗凝剂比例为1.02.0mg/lml血。,静脉采血总体要求,5.真空管多管采血先后顺序：凝血三项管、血沉管、血常规管、肝素管，然后是其它抗凝管，最后是非抗凝管。如果做血培养则先采培养瓶标本，防止污染。 6.摇匀方式：颠倒混匀180度58次。 7.标本应避免日光直接照射:防止如胆红素、尿酸等对紫外线敏感的物质因曝光分解而含量降低。,静脉采血总体要求,8.标本采集后应及时送检： 血氨、CO2CP易挥发； 酶在室温下放置，活性逐渐降低； 如未用氟化钠抗凝的血液，葡萄糖浓度会以每小时7%的速度下降。,血液常规及血型检查标本采集,标本采集：用真空采血针取肘静脉或其它部位的静脉血2ml注入含EDTAK2的抗凝管中，立即轻轻将试管颠倒混匀58次，以使其充分抗凝，并在试管上做好标识。该管血可同时用于全血细胞分析、ABO和Rh血型正定型检查、网织红细胞计数和疟原虫涂片的检测。 标本运送及保存条件：尽快送检，室温中保存不得超过2小时，不得冷藏。,血液常规及血型检查标本采集,注意事项：要求用抗凝的静脉血，尽可能不用未梢血。 易受组织液的稀释，结果不准确； 采血量较少，不能进行全自动分析； 不能在有疑问时重复检查。 除了少数不易取得静脉血，如婴儿、大面积烧伤，以及某些需要经常采血检查的病例，如血液病、肿瘤化疗病人等，均应采静脉血检查。,血沉检查标本采集,标本采集：抽静脉血 1.6 ml，加到含 0.4 ml枸橼酸钠溶液的（ 1 : 4 ）抗凝真空试管中，并轻轻颠倒58次使之充分混匀与抗凝。 标本保存条件：采血后及时送检，尽快检测，室温中保存不得超过2小时。 注意事项：标本总量2.00.1ml，小于1.8ml大于2.2ml为不合格标本。溶血或有细小凝块的血液标本，均影响血沉结果。,血液流变学检查标本采集,病人要求：需空腹12小时以上，采血前一天晚上低脂饮食。在采血前三天，停用具有溶栓抗凝作用的药物、降脂药物等。女性避开月经期。 标本采集：抽一支肝素锂管，一支血沉管，并立即轻轻颠倒58次使之充分混匀与抗凝，防止凝固。 标本保存条件 : 采血后立即送检，室温下静置20分钟即可测定，密封容器中室温保存不得超过4小时。,血液流变学检查标本采集,注意事项： 1）采血要“一针见血”，否则换部位重抽。 2）采血针头不宜过细（最好7号），采血过程中压脉带时间不得超过1分钟。 3) 抽血时负压不宜过大，必须缓缓抽吸。 4) 血液与抗凝剂应立即混匀 30 秒 ，以防抗凝不充分有细小凝块。,凝血三项检查标本采集,标本采集：抽静脉血1.8ml，注入到含0.2ml枸橼酸钠溶液的（1 : 9）抗凝真空试管中 ，并轻轻颠倒58次使之充分混匀与抗凝。此管血还可用于胶乳法检查D二聚体和FDP。 注意事项：（1）采血人员应 “一针见血”，以防止组织损伤，外源性凝血因子混入，影响实验结果。（2）试管内血液总量2.00.2ml，否则会影响检验结果。当血液与抗凝剂比例由91降至71时，APTT 测定结果会显著延长 ；当降至4.51时，PT测定结果会显著改变。,生化检验标本采集,肝功、肾功、酶类、无机离子、免疫球蛋白、风湿因子测定采集 1病人要求：建议空腹采血。 2标本采集：静脉采血，肝素抗凝或不抗凝。 3标本保存：室温保存，及时送检。,生化检验标本采集,血脂检测标本采集 1病人要求：至少禁食12小时，三日内不吃含脂肪过多的食物，24小时内不饮酒。 2标本采集：静脉采血，肝素抗凝或不抗凝。 3标本保存：室温保存，及时送检。,生化检验标本采集,血糖检测标本采集 1病人要求：空腹血糖禁食12小时，做OGTT试验时患者受试前3天，每天最少摄入碳水化合物150g，试验前10-16小时不进食、不抽烟、停用胰岛素、肾上腺皮质激素等药物。 2标本采集：静脉采血，肝素抗凝或不抗凝。做OGTT试验时坐位取血后，5分钟内口服250毫升含75g无水葡萄糖的糖水后，0.5h、1h、1.5h和2h各抽血2ml和留尿10-20ml。 3标本保存：室温保存，及时送检。 4注意事项：当一侧手臂输液而又必需采集标本时应从对侧手臂采血，以尽量减少对血糖实验结果的影响。,免疫检验标本采集,病毒血清学、自身抗体、血清肿瘤标志物、血药浓度、贫血三项、梅毒血清学检查标本采集 1病人要求：建议空腹采血，非空腹也可采血。 2标本采集：静脉采血，不抗凝。 3标本保存：室温保存，及时送检。 4注意事项：避免标本溶血。病人可不空腹，但脂血需重新采样。HIV抗体检查单独一管血,免疫检验标本采集,激素检查标本采集 1病人要求：建议空腹采血，非空腹也可采血。 2标本采集：静脉采血，不抗凝。24小时尿皮质醇测定参考尿液检验标本采集 3标本保存：室温保存，及时送检。 4注意事项：1)避免标本溶血。病人可不空腹，但脂血需重新采样。 2)不同时间血皮质醇浓度测定，应在早上7：00-9：00、下午3：00-5：00、午夜12：00三个时间段采血，或按临床医生要求采血，避免提前或延迟抽血。 3）检测血HCG时，如有使用激素类药物，请在检验申请单上注明。怀孕或流产后检测HCG时，请在检验申请单上注明怀孕天数或流产日期。 4）女性患者进行内分泌检测时，应在卵泡期、排卵期、黄体期或绝经期不同时间段采血或按临床医生要求采样，避免提前或延迟抽血；如有使用激素类药物，请在检验申请单上注明 5）胰岛素、C-肽耐量试验应在服糖前（空腹）及服糖后1h、2h、3h不同时刻采血或按OGTT试验要求采血或按临床医生要求采样，避免提前或延迟抽血。,脑脊液标本采集,标本采集：临床医师在无菌条件下，根据需要进行穿刺收集。采集后标本应分装于23个无菌容器中 ，每份12ml ，第1份作细菌检查，第2份作生化检查，第3份作常规检查。第3份应避免凝固，必要时用含EDTAK2抗凝剂的试管收集。 注意事项： (1)用于细菌学检查标本应保温送检 ( 20 )，不可置冰箱保存。 (2)标本采集后应立即送检，在1h内检验，否则影响细胞计数及分类和葡萄糖测定；影响细菌检出率；凝块形成，影响细胞计数等。,浆膜腔积液标本采集,标本采集 ：浆膜腔液标本的采集由临床医师在无菌条件下 ，根据需要进行穿刺收集。采集后标本应分装于34个无菌容器中，第1份作细菌检查，第2份作生化检查，第3、4份作常规检查。第3份为避免凝固，用EDTAK2抗凝的试管收集23ml，用于常规的细胞计数；第4份用干净无添加剂的瓶收集约100ml，用于观察是否自凝和比重的测定。 注意事项： (1) 第3份应轻轻颠倒58次使之充分混匀，避免凝块形成、细胞发生变性、破坏。 (2) 若需做细菌培养、药敏试验者用无菌试管或容器留取标本，无菌操作采集标本。 (3)