白色念珠菌快速鉴定培养药敏试剂.ppt

白色念珠菌 快速鉴定培养药敏试剂盒,一、概述 基础知道介绍 一）什么是白色念珠菌 二) 诱发病因 三) 主要症状表现 四）常用诊断方法 二、白色念珠菌快速鉴定培养药敏试剂盒 一）项目背景 二）项目特点 三）项目意义 四）竞品分析 五）主要应用科室 三、使用说明与操作方法,目 录,概述,)什么是白色念珠菌（以下简称白念）,白色念珠菌是念珠菌的一种，念珠菌是一种腐物寄生菌，广泛存在于自然界。是人体正常菌群之一，平时主要生存于人体的口腔、皮肤、粘膜、消化道、阴道及其他脏器中。正常人群白色的带菌率可高达40%;从阴道粘膜分离出来的念珠菌85%-90%为白色。且白色的致病性最强。,近年来，真菌感染的发病率有逐年上升的趋势，美国国家医院内感染监测中心（NNIS）1993年对美国115家医院调查发现，20世纪90年代住院患者深部真菌感染率为20世纪80年代的1.9倍 ，在所有的真菌感染中念珠菌属占80%，是医院内感染的第6位最常见的致病原，是院内获得性血液感染的第4位常见致病菌 。白色念珠菌仍然是血液感染的主要致病菌，且其感染有逐年增加的趋势 。,二）诱发病因,诱发因素主要有： 1）妊娠； 2）滥用抗生素； 3）糖尿病； 4）妇女日常卫生用品不洁、洗涤及外阴清洗方法不当； 5）性行为的互相传播。,6）各种原因导致的免疫下降： （1）恶性肿瘤应用化疗、放疗等治疗，毁坏了免疫系统； （2）器官移植应用免疫克服疗法，克服了免疫系统； （3）长期患有徐徐消耗性疾病，如白血病、糖尿病、肺结核等，降低了机体抵抗力； （4）免疫缺憾疾病，如艾滋病； （5）长期置入导尿管，尤其是置入导尿管后长期启用抗菌素；,1，妇产科：念珠菌阴道炎8090由白色念珠菌引起，其中50%患者病情反复，念珠菌阴道炎临床表现：主要表现为外阴搔痒、灼痛，严重时坐卧不宁，异常痛苦，还可伴有尿频、尿痛及性交痛，急性期白带增多，稠厚，呈豆渣样或凝乳状。检查见外阴抓痕，小阴唇内侧及阴道黏膜附着，有白色膜状物，擦除后露出血红肿，黏膜面，急性期可能见到糜烂及浅表溃疡。,三）主要症状表现,2、泌尿科和男科：主要是霉菌性尿道炎和白色念珠菌性包皮龟头炎。男性包皮内侧是白色念珠菌的增长部位，其中包皮过长者更易出现白色念珠菌感染。白念感染后寻常会发生以下的这些症状：初始时皮损为红斑、丘疹，表面有白色鳞屑，有白色渗出液，境况可发生小水疱、脓疱和表浅糜烂，伴搔痒及烧灼感。 3. 其他如呼吸科，皮肤科，肿瘤科，感染科，口腔科等。,四）常用诊断方法： 诊断生殖器白色念珠菌病除典型的症状、体征外，实验室检查是必不可少的。 1、一般作分泌物的直接镜检就可以明确诊断，直接镜检是非常简单的实验室方法。取少许分泌物置于玻璃片上，加一滴氢氧化钾或等渗的氯化钠溶液，覆盖上玻片，置于显微镜下，可见到白色念珠菌的孢子和菌丝。这种方法诊断的准确率为60%-70。,2、培养法： 在无菌条件下将受检标本接种于沙氏培养基上（多采用试管法培养）。接种时将试管培养基斜而割破少许，每管接种2-3处，每份标本接种2管。将培养基放入37温箱内孵育48-72小时后观察，可见大量乳白色菌落生长，用接种针挑取少量菌落涂片，直接镜检或染色后镜检，可见大量芽孢子，可初步诊断为白念感染。,一）、项目背景 1、国家抗菌药物临床 应用指导原则 2、国家医改方向：降低药品比例提高诊疗费。 导致整个医疗和医药行业的大变革。 3、抗生素滥用导致细菌耐药性逐年增强 4、目前医疗机构细菌培养和药敏试验 分段进行、操作复杂很难大规模开展。,二、白色念珠菌快速鉴定培养药敏试剂盒,国家抗菌药物临床应用指导原则摘要 抗菌药物临床应用的基本原则,查明感染病原，根据病原种类及细菌药物敏感试验结果选用抗菌药物。 抗菌药物品种的选用原则上应根据病原菌种类及病原菌对抗菌药物敏感或耐药，即细菌药物敏感试验 (以下简称药敏)的结果而定。因此有条件的医疗机构，住院病人必须在开始抗菌治疗前，先留取相应标本，立即送细菌培养，以尽早明确病原菌和药敏结果；门诊病人可以根据病情需要开展药敏工作。,危重患者在未获知病原菌及药敏结果前，可根据患者的发病情况、发病场所、原发病灶、基础疾病等推断最可能的病原菌，并结合当地细菌耐药状况先给予抗菌药物经验治疗，获知细菌培养及药敏结果后，对疗效不佳的患者调整给药方案。,1、时间短：传统培养加药敏试验需要一周左右时间，该产品培养药敏24小时内一步完成，最快为12-14小时，大大缩短了时间； 2、取样方便：取分泌物，或在患部直接取样； 3、操作简单：只需要一台恒温箱，适合任何医院开展； 4、特异性强：达100%。灵敏度高：达10-8； 5、准确率高：诊断结果与临床符合率达98%以上； 6、适用性广：广泛适用于临床各科； 7、储运方便：首家冻干试剂，品质更有保证，常温下保质期壹年；,二）项目特点,三）、项目的意义： 随着抗真菌药物在临床上的大量应用，真菌耐药性不断出现且日趋严重，了解真菌的耐药性，合理使用抗真菌药物，对于挽救患者生命、减轻经济负担、减缓耐药菌株出现都有着重要意义。 药敏试验（AST）可对抗真菌药物的临床效果进行预测，查出耐药性，便于医生选择个体化治疗方案，缩短病人治疗病程，节省治疗费用。,1）避免滥用抗生素； 2）针对性使用抗生素，减轻患者负担； 3）减少院内感染： 深部真菌感染现已成为院内感染主要因素，对患者造成较大危害； 4） 对特殊疾病的意义： 器官移植受者和恶性肿瘤患者中真菌感染的患病率高达20%40%，而且往往是致命的感染。真菌感染已成为艾滋病患者的主要死亡原因。国内近十年来，机会性真菌感染同样呈现出明显上升趋势，其中白色念珠菌感染高居首位。最常见的深部感染真菌为白色念株菌，在分离的真菌中以白色念珠菌为主占（约80%）。,诊断生殖器白色念珠菌病除典型的症状、体征外，实验室检查是必不可少的。一般作分泌物的直接镜检就可以明确诊断，直接镜检是非常简单的实验室方法，但这种方法诊断的准确率只有60%-70！ 最可靠的方法是对白色念珠菌进行培养！也是国际公认的金标准检测方法！,四）竞品分析,1、白色念珠菌(CA)核酸扩增检测试剂盒（PCR-荧光探针法）：这种试剂盒要求实验室条件非常高，必须配备专用的检测设备和专业的技术人员，所以难以推广； 2、念珠菌显色培养基：主要是法国生物梅里埃公司产品、科玛嘉念珠菌显色培养基，它是通过菌落的不同颜色和不同形态来进行快速鉴定的培养基，鉴定：在显色培养基上生长为翠绿色菌落为白色念珠菌，蓝灰色菌落为热带念珠菌，紫红色边缘模糊有微毛为克柔念珠菌，整个菌落为紫红色为光滑球拟假丝酵母菌，白色至粉色为其他念珠菌。主要特点是鉴别不同的念珠菌； 3、念珠菌快速乳胶凝集测定和念珠球菌（抗原）检测试剂盒：它是通过抗原和抗体结合的原理来达到快速诊断念珠菌。,以上三种试剂盒都是定性诊断念珠菌，与最传统的镜检性质一样，只能诊断患者是否感染了念珠菌，况且有20%正常人也携带念珠菌而不发病。另外市场上还有一种念珠菌药敏试剂盒，只能是先靠培养基培养鉴定出是念珠菌然后再做药敏试验，且不能区分什么念珠菌，整个过程需要4天以上。我公司出品的白色念珠菌快速鉴定培养药敏试剂盒实现24小时培养、鉴定和药敏实验一步完成，快速诊断患者是否感染白色念珠菌，并对白色念珠菌耐药性进行监控，从而为临床医生治疗提供合理使用抗生素方案。,五）主要应用科室,1、妇产科：主要是念珠菌性阴道炎。此类型的发炎，约占阴道炎的30-40%，而怀孕末期的妇女有1520%，一般妇女有46%的感染比例 2、呼吸科：由白色念珠菌引起支气管炎或肺炎比例要占呼吸系统真菌感染的80%左右。 3、泌尿科或男科：霉菌性尿道炎，白色念珠菌性前列腺炎和白色念珠菌性包皮龟头炎 4、口腔科：口腔白色念珠菌病按其主要病变部位可分为：念珠菌口炎、念珠菌唇炎与口角炎、慢性粘膜皮肤念珠菌病；和白念珠菌感染有关的口腔疾病还有：扁平苔藓、毛舌和正中菱形舌炎。,5、肿瘤科：念珠菌是临床重要的条件致病菌，免疫力低下是恶性肿瘤患者发生念珠菌感染的重要原因；恶性肿瘤患者念珠菌感染率为21.02%；念珠菌类型主要是白色念珠菌（77.78%）。最易发生感染的部位是口腔及上呼吸道，占55.75%。性别对念珠菌感染没有影响，主要危险因素为年龄60岁、住院时间长、肿瘤中晚期、接受化疗及放疗、广谱抗生素和激素的大量使用、各种侵入性诊疗操作的应用等。最易发生感染的部位是口腔及上呼吸道，占半数以上，其次是下呼吸道、泌尿道、胃肠道等。,6、重症监护及感染科：由白念珠菌为主所致的侵袭性感染.其主要表现为真菌血症,心内膜炎,脑膜炎或肝,脾,肾,骨等炎症。 7、皮肤科：皮肤念珠菌病好发于皱褶部，如肥胖者颈周、乳房下、腋下和腹股沟；家庭主妇或饮食服务人员则好发于手的第3-4指间。表现为擦烂红斑；皮肤潮红、浸渍，有膜状脱屑，可因摩擦糜烂渗液，边界清楚，周围可有卫星状分布的丘疹、斑丘疹。自觉瘙痒或灼痛。在躯干部则表现为散在较大丘疹，顶部有鳞屑、颜色鲜红或暗红，无融合倾向。少数引发甲沟、甲周炎症，表现为甲周暗红肿胀，有压痛，不时挤出稀薄脓液。病程缓慢，常伴甲病变。营养不良及卫生状况差的婴儿可同时具有鹅口疮、肛周擦烂红斑及肠炎，称念珠菌病，常互为因果，使病情迁延。,三试剂盒操作说明,一)试剂盒组成 A.超纯水 20ml2瓶 B.干粉培养基 20瓶 C.说明书 1份 D.20孔药敏板20板 E.报告单 20张 二）检验原理 白色念珠菌鉴定培养基是一种白色念珠菌选择性快速培养基。其原理为白色念珠菌利用培养基中营养成分进行增殖，分解糖类，产生氢离子使培养基的PH值降低，使培养基中的指示剂由原来的绿色转变成黄色。药敏板中有九种抗生素，利用九种抗生素的高低浓度在体外对微生物生长的抑制作用，对微生物作耐药性分析。,三）标本采集 女性：采集宫颈分泌物，标本要、采集时应先擦去宫颈口多余粘液，标本采集时用无菌棉拭子在阴道内12cm处取宫管颈泌物。取材时，要在阴道内旋转1-2次，以便获得适量的样本； 男性：用无菌棉拭子在包皮内侧或阴茎沟部捻转3-4次取分泌物； 呼吸科、肿瘤科标本取深部痰； 其他标本采集在具体病变部位。,四）操作步骤 取一支分装的干粉培养基，在无菌条件下打开盖子，加入1.5ml超纯水，完全溶解后，先在药敏板阴性孔中加入50ul培养液后按如下步骤进行操作。 接种培养：采集标本后立即置于培养瓶内，搅动棉拭子数次，提取棉拭子，、对着瓶壁尽量挤压出其中液体，取出棉拭子弃之（妇科女性标本建议将采集标本后的棉拭子用1.5ml无菌生理盐水充分稀释，取100ul稀释液加入培养基溶液内） ，用加样器吹打数次或用震荡器混匀后，吸取50ul到药敏板孔中，盖上药敏板盖。 3.将剩余培养基连同药敏板一起量35-37孵箱培养，24小时后观察结果。,五）结果判断 阳性和阴性判断标 1; C+孔培养基变黄色 （且孔底有菌体沉积），为阳性（+）； C+孔培养基不变色或变成黄绿色 （且孔底无菌体沉积），为阴性（-）。 2;C-孔阴性（-），C+孔阳性（+）试验有效，判断余下各种孔结果。 3;C-孔阳性（+），表示污染，试验无效。 4;C-孔阴性（-），C+孔阴性（-）表明无白色念珠菌生长，余下孔不判断结果。,5、药敏结果断定：A孔（-）B孔（-）敏感 A孔（+）B孔（-）中敏 A孔（+）B孔(+)耐药 6、药敏板药物英语缩写及中文对照表,六）产品局限性 本产品仅适用于疑似白色念珠菌感染患者的体外辅助诊断及药敏实验。 阳性结果提标有白色念珠菌的存在，临床诊断需要与临床症状相结合。 七）注意事项 1、产品在有效期内如出现混浊或已经变色不能继续使用。,2、产品采用密封包装，一经打开后，请一次用完。 3、应正确采集标本，及时接种培养基和操作程序规范是提高阳性检出率和准确性的键。 4、产品遇杂菌污染引起混浊不得报告白色念珠菌阳性（但部分含泌物较多的样本接种到培养基中可能引起培养基澄清度降低或颜色变化，要注意区别）。另外，培