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文档简介
合作任务一:前情回顾,1、DNA重组技术的基本工具的名称和作用 2、限制酶的特点 3、常见的基因载体,1、DNA重组技术的基本工具的名称和作用,限制性核酸内切酶 切割目的基因和基因载体 DNA连接酶 将目的基因与载体结合 基因进入受体细胞的载体 将目的基因送入受体细胞并复制,2、限制酶的特点,识别DNA分子的特定的核苷酸序列,并使特定部位的磷酸二酯键断开,3、常见的基因载体,质粒 噬菌体的衍生物、动植物病毒,合作任务二:新思考,1、限制酶的来源、作用部位、识别序列的特点、切割末端的特点 2、DNA连接酶的分类、特点 3、DNA连接酶与DNA聚合酶的区别 4、基因载体具备的条件及作用 5、绘制大肠杆菌质粒载体的结构模式图,1、限制酶的来源、常见种类、作用部位、识别序列的特点、切割末端的种类,来源:从原核生物中分离纯化出来 常见种类:EcoRI限制酶 SmaI限制酶 作用部位:磷酸二酯键 识别序列的特点:由6个(4、5或8个)核苷酸组成,反向对称重复排列 切割末端:黏性末端或平末端,2、DNA连接酶的分类、特点,分类:E.coliDAN连接酶 T4DNA连接酶 特点: E.coliDAN连接酶只能连接黏性末 端, T4DNA连接酶既能连接黏性末 端又能连接平末端,3、DNA连接酶与DNA聚合酶的区别,DNA连接酶连接DNA片段,不需要模板 DNA聚合酶需要模板,连接单个核苷酸,4、基因载体具备的条件及作用,1、有一个或多个限制酶切点,以便目的基因可以插入到载体上 2、在受体细胞中可以进行自我复制,或者整合到受体染色体DNA上进行复制,以便目的基因复制表达 3、有标记基因,以便重组DNA的鉴定和选择 4、必须是安全的,不会对受体细
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