几类常见食品的检验.ppt

第十章,几类常见食品的检验,第一节 粮食的卫生检验,一、概述 （一）粮食的主要卫生问题 1.霉菌及霉菌毒素污染 2.有害金属的污染 3.农药残留 4.仓库害虫 本章只对仓库害虫使用的粮食熏蒸剂进行讨论,（二）仓库害虫,1.繁殖条件：温度1821，湿度65 2.种类：近300种，常见的有：甲虫、螨虫、蛾虫等 3.除害虫措施： 物理方法：缺氧、辐射、低温。 化学方法：熏蒸剂,（三）粮食熏蒸剂的种类及用途,1.种类及用途 磷化物：各种粮食灭虫 氯化苦：不能作粮食种子灭虫 溴甲烷：各种粮食灭虫 马拉硫磷：各种粮食灭虫 甲基杀死啤：各种粮食灭虫 二硫化碳：粮食种子灭虫,2.性质：都具有挥发性 3.卫生问题：使用浓度大，受气象条件的影响，能较长时间残留，对人体产生危害。 4.残留量标准（mg/kg） 磷化物0.05 溴甲烷5 马拉硫磷0.1 氯化苦2,二、粮食中磷化物的测定,（一）种类 （二）杀虫原理 （三）测定方法钼篮光度法 1.原理及步骤：（见磷化氢发生装置） H3P气体的产生 注意：反应须沸水浴加热；须通载气CO2 ；载气CO2 分别经硝酸汞、酸性高锰酸钾、饱和硫酸肼溶液净化。 Zn3P2 + 3H2SO4 2 PH3 + 3ZnSO4,H3P的接收和氧化,用酸性高锰酸钾溶液吸收。 串连3个吸收管，以便吸收完全。 过量的高锰酸钾用亚硫酸钾除去。 反应式如下： H3P + 8 KMnO4 + 12 H2SO4 5H3PO4 + 8MnSO4 + 4K2SO4 + 12H2O 5Na2SO3 + 12KMnO4 + 3H2SO4 5Na2SO4 + K2SO4 +2MnSO4 + 3H2O,显色：加钼酸铵、硫酸、氯化亚锡,H3PO4+12(NH4)2MoO4+21H2SO4 (NH4)3PO412MoO3 +21NH4HSO4+12H2O (NH4)3PO412MoO3 +2SnCl2 +3H2SO4 +4HCl Mo2O54MoO3) H3PO4 +3NH4HSO4+2SnCl4+2H2O （4）比色测定：波长680nm，L=1cm测吸光度，绘制标准曲线定量。,2.注意事项,标准物用KH2PO4，而不直接用磷化物，因为磷化物不稳定。 用来产生CO2的大理石可能含硫等杂质，在酸性下可能产生影响氧化还原反应的气体，所以需要通过洗气过程以消除影响。 控制好显色反应的酸度：0.780.93mol/L。太高不显蓝色，太低氯化锡可能还原钼酸铵而显假阳性。,三、粮食中马拉硫磷的测定,性质：无色或黄色液体，蒜臭微溶于水，易溶于二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳等，难溶于石油醚。 水解反应： 在酸和水中水解慢，生成巯基琥珀酸二乙酯。 在碱性下水解快，生成二甲基二硫代磷酸酯。,（一）气相色谱法,1.原理 样本用二氯甲烷萃取后，经色谱柱分离，在富氢焰上燃烧，分解成HPO碎片，发出526nm的特征光，火焰光度法检测器检测。峰高标准曲线法定量。 2.样本处理 样本10g，加0.5g中性Al2O3,0.2g活性炭，20ml二氯甲烷，振摇0.5h，过滤，取虑液测定或浓缩后测定。,3.注意事项 仪器条件 样本前处理： 经粉碎、过筛（20目），混匀。 色谱柱可使马拉硫磷于敌敌畏、乐果、对硫磷分开。,（二）铜配合物光度法,1.原理 样品 提取 水解 二甲基二硫代磷酸酯钠 黄色配物 萃取 比色定量。,2.步骤,样本提取 取适量样本，加四氯化碳，振摇2h，过滤。取一定量的虑液，加CS2-CCl4和酸性硫酸钠溶液，振摇1min，分层后弃去水层。 水解 样本提取液或标液， 加乙醇和NaOH，剧烈振摇1min， 注意：加入CS2，乙醇、 NaOH是为了除去样品中可能存在的铜离子,反萃取 水解后加硫酸钠溶液，用盐酸调pH至34，加三氯化铁溶液，振摇1min，分层后弃去有机相。 注意：硫酸钠可除去水相中的杂质；三氯化铁除去可能存在的还原剂；调酸性可使水解产物进入水相。 显色并提取 加四氯化碳和硫酸铜溶液，正确振摇1min，分层后，弃去水相，有机相脱水(脱脂棉)用于测定。,测定 波长415nm，L=2cm 3.注意事项 （1）除去样品中可能存在的铜离子 原因：铜离子可氧化水解产物二甲基二硫代磷酸酯，同时被还原成氧化亚铜，与二甲基二硫代磷酸酯生成无色配合物使结果偏低。 方法： 乙醇四氯化碳二硫化碳 乙基黄原酸钠 乙基黄原酸钠铜离子 配合物溶于有机相而除去。,（2）酸性硫酸钠可除去四氯化碳中的水溶性杂质。 （3）严格控制水解条件 碱性； 时间t：1mint2min；时间太短水解不完全，太长铜离子可能氧化水解产物。 （4）三氯化铁的作用：除去样液中的还原性物质，防止铜离子氧化成亚铜而与二甲基二硫代磷酸酯结合成稳定配合物而损失。 （5）显色pH34，生成的配合物相对稳定。,（6）比色前四氯化碳层应脱水 （7）水解后生成的二甲基二硫代磷酸酯能溶于水，而杂质留在有机相中而除去。,四、粮食中氯化苦的测定,概述 1.分子式：氯化苦，化学名三氯硝基甲烷 2.性质：无色或为黄色液体，沸点111.9相对密度1.66，蒸汽密度比空气重4.7倍。难溶于水。易溶于有机溶剂。化学性质稳定，一般酸碱不能使之分解。 毒性：具有强催泪性，吸入其蒸汽可引起咳嗽、呼吸困难、气喘、无力、重者可死亡。,（二 ）测定方法,1.重氮化偶合光度法 原理 分解： CCl3NO2+4C2H5ONa NaNO2+C(OC2H5) 重氮化反应：亚硝酸钠与对氨基苯磺酸钠反应生成重氮化合物。 偶氮化反应：重氮化合物与盐酸萘乙二胺反应生成红色偶氮化合物，比色定量。,2.注意事项,（1）乙醇钠的准备： 钠乙醇 乙醇钠 氢气 注意应远离火源，戴好防护眼罩和手套，切勿使钠与火接触。 （2）氯化苦标准溶液的配制 直接称重法 替代标准物法 用亚硝酸钠代替氯化苦作标准物。,（二）气相色谱法,1.原理 食品中的氯化苦，在通氮气的条件下被吹蒸出来，收集于石油醚中，经气相色谱分离，用电子扑获检测器检测，保留时间定性，峰高获峰面积标准曲线法定量。 2.仪器条件 3.说明：本法可同时测定CS2、氯化苦、CCl4,第二节 食用植物油的卫生检验,一、概述 1.食用油脂的分类 植物油：来源于植物，常温下为液态，含不饱和双键，易被氧化。 动物脂肪：来源于动物脂肪组织，常温下固态，无双键，性质稳定。 2.意义：供热、调味、改善感观。,3.理化常数：正常植物油都有代表其理化特性的理化常数，此为鉴定其种类和纯度的依据。 理化常数包括：相对密度（15）；折光系数（25）；碘价；皂化价；不皂化价；脂肪酸冻点。 4.主要卫生问题 油脂酸败：由于含杂质或在不适合的条件下久藏而发生一系列化学反应和感观性状恶化叫油脂酸败。化学反应主要是氧化和水解。 高温裂变：在高温煎炸下发生氧化、分解、聚合等一系列反应，产生各种分解产物和聚合物，使油脂的品质变坏。,影响因素：氧化、微生物、光、热、金属等因素可使油脂酸败变质。 油脂中存在的有害物质：如黄曲霉毒素；多环芳烃了；铅、砷、汞等。 5.检测指标 感观指标：色泽、透明度、气味、滋味、酸败异味。 理化指标：酸价、过氧化值、羰基价、极性组分 6.卫生标准：见P166表102,二、过氧化值（POV）的测定,1.概念：油脂中不饱和脂肪酸被氧化形成的过氧化物的含量，通常用100克油样析出的碘的克数表示。 2.原因：油脂中不饱和双键被氧化成过氧键（C-O-O-C），然后再分解成易挥发并具有特殊臭味的醛类和酮类。 3.意义：POV高，说明油脂已开始变质。,4.测定方法碘量法 原理：在冰乙酸存在下，油脂中过氧化物与碘化钾反应，生成游离碘，用硫代硫酸钠滴定碘，根据消耗的硫代硫酸钠的体积计算出碘的含量，即为过氧化值。 操作：取样品油于碘量瓶中 加冰乙酸三氯甲烷，使溶解 加饱和碘化钾溶液，密塞 振摇30s，暗处反应3min 加水稀释，用硫代硫酸钠滴定至终点。,计算 0.1269为1.0mol/L硫代硫酸钠1.0ml相当于碘的可数,注意事项 饱和碘化钾应无游离碘和碘酸钾； 试剂和实验用水无碘； 反应时为防止碘的挥发和被空气中O2氧化，应密塞和避光； 三氯甲烷不能含氧化物； 注意淀粉加入时机。,三、酸价（AV）的测定,概念 指中和1g油脂中的脂肪酸所需KOH的毫克数。 意义 酸价是衡量油脂酸败的主要指标。 测定方法KOH滴定法 1.原理 油样35g ，用中性乙醇乙醚溶解，酚酞作指示剂，KOH标准溶液滴定至终点。,2.注意事项 样品溶液太深时，可减少取样量，或恰当增加混合溶剂的用量；也可用酸度计确定终点。 混合溶剂的量要足够，为KOH用量的5倍，以保证有足够的乙醚使油脂充分溶解，有足够的乙醇防止皂化反应生成的肥皂因沉淀而析出。,四、羰基价（CGV）的测定,概述 1.羰基价：指油脂酸败后所产生的醛和酮的总量，因为醛和酮都有羰基故叫羰基价，通常用1kg油样中羰基的毫克当量表示。正常油 2.意义：其高低可反映油脂的酸败程度，也是油脂劣化程度的灵敏指标。 3.卫生标准：正常油20mEq/kg 酸败油或热劣化油50mEq/kg,2，4二硝基苯肼光度法测定羰基价,1.原理 苯作溶剂，三氯乙酸作酸性介质并作催化剂，油样中的羰基与2，4二硝基苯肼反应生成腙，再在碱性条件下变成醌呈褐红色，比色，计算法定量。 2.操作：一定油样，用苯溶解并定容； 取其中的数毫升（v1）； 加三氯乙酸和显色剂； 水浴加热，冷后氢氧化钾乙醇溶液 剧烈振摇，放1min后比色（440nm）,3.计算,式中： 854为各种醛和酮的毫克当量吸光系数的平均值； M为油样的质量； V为油样稀释的总体积； V1为所取稀释样的体积；,4.注意事项 三氯乙酸的作用：作酸性介质和催化剂； 空白管A0.2时应检查试剂的纯度并纯化处理； 乙醇的纯化：在乙醇中钾铝粉和KOH，在热水浴中回流，利用氢的强还原性除去乙醇中的羰基化合物； 苯的纯化：在苯中加2，4二硝基苯肼和三氯乙酸，回流1h后，蒸馏。,五、极性（PC）组分的测定,1.概念：极性组分是油脂高温劣变时产生的比甘油三酯极性更大的一些成分的总称。 2.意义：是油脂劣变的指标之一。 3.测定方法重量法 原理：将样品油通过硅胶柱，用石油醚乙醚洗脱其中的甘油三酯，挥去溶剂，称重，即为非极性组分的质量。用上柱样品的质量减去非极性组分的质量即为极性组分的质量。 注意：温度高于25时，应采用带有循环冷却水套的层析柱处理样品，以防止产生气泡。,六、游离棉酚的测定,概述 1.化学名： 2，2双1，6，7三羟基3甲基5异丙基8甲醛二萘 2.分子式：C30H30O8 3.结构式：,4.性质： 有醛式、烯醇式、和醌式三种互变异构体，纯棉酚是三种互变异构体的混合物。 易溶于乙醇、乙醚、丙酮、三氯甲烷及油脂，不溶于水、正己烷及低沸点石油醚。 显酸性：7位羟基受共轭体系的影响而易离解。故可与碱成盐而易溶于水。精练棉子油即源于此。 醛基上的反应： 与斐林试剂反应 与苯胺反应，生成黄色二苯胺棉酚，可定量。 与氨基酸反应，生成结合棉酚，不溶于油脂而不被吸收，故无毒。,5.危害：游离棉酚可引起中毒，表现为皮肤灼热、头晕、低血钾，可导致性功能减退及不育症。 卫生标准：棉子油中游离棉酚0.02， 0.15可引起严重中毒。,测定方法,1.紫外分光光度法 原理：样品 提取 378nm测A值,标准曲线法定量。 样品处理： 油样 70丙酮20ml 振荡30min 过夜，取上清液过滤，用滤液测A值 （70丙酮作参比） 注意：本法样品处理是关键，样品处理不当，结果误差大。,2.苯胺分光光度法 原理：样品中游离棉酚经70丙酮提取，在95乙醇溶液中与苯胺反应生成黄色的二苯胺，比色定量。 注意：样品及标准都要配对照系列，对照系列不加显色剂， 以A-m(g)作曲线，以消除样品中色素的影响。,第三节 肉及肉制品的卫生检验,一、概述 1.主要卫生问题：畜禽疾病、腐败变质、添加剂、兽药残留及化学性污染。 2.食品的腐败变质：指食品在以微生物为主的各种因素作用下，所发生的食品主要成分（蛋白质）与感观性状的变化，而使食品降低或失去食用价值。,3.食品腐败变质的主要原因：微生物污染及食品酶的作用，蛋白质分解，产生有机酸、硫化氢、氨、腐氨、尸胺、甲胺、三甲胺等，使食品具有异味、降低食用价值或不能食用。 4.分解产物的性质：上述分解产物都是含氮的碱性物质，并且具有挥发性，所以蒸馏后用强酸滴定可测定其含量挥发性盐基氮。 5.监测指标挥发性盐基氮 挥发性盐基氮：食品腐败变质后蛋白质的分解产物。卫生标准15mg/100g。,二、挥发性盐基氮的测定,、半微量定氮法 1.原理：挥发性盐基氮在弱碱性（氧化镁）下，被蒸馏出来，吸收于硼酸溶液中，用标准盐酸溶液滴定，根据消耗的盐酸溶液的体积，计算挥发性盐基氮的含量。 2NH3+4H3BO7 ( NH3 ) 2 B4O7+5H2O ( NH3 ) 2 B4O7+2HCl+5H2O 2NH4Cl+4H3BO3,2.注意 实验前要用水蒸汽冲洗定氮装置，实验结束后要用稀硫酸、蒸馏水、水蒸气洗净内室残留物。 滴定指示剂为混合指示剂：20g/L甲基红与1g/L甲基蓝用前等体积混合。 蒸馏器即为凯氏定氮仪。 需作空白测定。,微量扩散法,1.原理：样品中挥发性盐基氮与饱和碳酸钾 混合挥发出氨，被硼酸吸收后用盐酸标准溶液滴定，计算出样品 含量。 2.实验在微量扩散皿 中进行：,内室：加硼酸溶液和混合指示剂； 外室：一端加样品虑液，另一端加饱和碳酸钠。加盖，密封， 转动使样液与碱液混合37温箱中反应2h。用盐酸标准溶液滴定至终点蓝紫色。 同时作空白实验。 3.注意： 加盖时要用水溶性胶密封，水溶性胶的制备： 阿拉伯胶10g，水10ml，甘油5ml，5g碳酸钠研匀即可。 加盖密封前，切不可使外室两侧溶液接触。 扩散皿需皂液煮洗，稀酸中和，蒸馏水冲洗，烘干后备用。,第四节 水产品的卫生检验,一、概述 水产品的主要卫生问题 1.鱼肉腐败时产生组胺，组胺属于生物碱，溶于水及乙醇等极性溶剂，可引起过敏性中毒。 2.化学污染物： 金属：铅、汞、镉、砷等，由于其毒性与金属形态有关，所以通常药做形态分析。 农药：有机氯和有机磷农药。 氯丙醇及多氯联苯,3.鲜度指标：盐基氮 4.天然毒素：绝大多数不含天然毒素，少数才有，如河豚毒素、文哈和石房蛤含岩石毒素，深海鱼中的雪卡毒素等。 卫生标准 见书P171表103,二、水产品中组胺的测定,偶氮分光光度法 1.原理：样品中的组胺用正戊烷提取，在弱碱性条件下与重氮盐反应，生成橙色染料，标准曲线法定量。 2.取样：采集同批同质的鱼，分上、中、下三层，采样量1kg，除去内脏、鳞、骨等，剪粹研细。,3.样品提取： 适量研细样品； 加三氯乙酸浸泡提取并沉淀蛋白质； 过滤； 将滤液调碱性使组胺游离； 正戊烷萃取； 加稀盐酸，生成组胺的盐酸盐而溶于水反萃取三次，合并盐酸提取液，定容。,4.测定 样品盐酸提取液或组胺标准液 调碱性 加偶氮试剂 比色：480nm,绘制标准曲线，计算样品中组胺的含量。 高效液相色谱法 原理：用三氯乙酸提取样品中组胺，经阳离子交换树酯柱净化，高效液相色谱分离，鱼邻苯二甲醛反应生成强荧光衍生物，荧光检测器检测，标准曲线法定量。,三、水产品中无机砷的分离和测定,无机砷的测定方法见第九章第一节，这里主要介绍无机砷的分离方法（因为有机砷的毒性小）。 酸提取法 样品在6mol/L的盐酸中，经水浴加热，无机砷以氯化物的形式被提取，有机砷侧不能被提取。过滤后，在2mol/L盐酸条件下用氢化物发生原子荧光光谱法或银盐法测定。检出限分别为0.04mg/L和0.1mg/L。,减压蒸馏法 样品中五价无机砷被碘化钾还原成三价无机砷，在盐酸存在下生成三氯化砷，经减压蒸馏（2.7kPa），三氯化砷挥发逸出，冷凝成蒸馏液，而有机砷既不分解也不逸出，达到分离目的。可用银盐法测定。,溶剂萃取法 样品中五价无机砷被碘化钾还原成三价无机砷，在8mol/L以上的盐酸中能被乙酸丁酯或苯萃取，而有机砷不被萃取。利用无机砷易溶于小于2mol/L盐酸溶液的性质，将有机相用小于2mol/L的盐酸反萃取，使无机砷进入水相。萃取时若有乳化现象，可离心促使分层。,四、水产品中甲基汞的测定,水产品鱼、虾、贝对汞有很强的富集作用 各种形态的汞都有毒 但有机汞（以甲基汞为主）更易被吸收，毒性更大，所以分离测定有机汞的含量更有意义。,酸提取巯基棉法,1.除蛋白质（盐析法）：样品加氯化钠磨细； 置换有机汞：加铜盐，有机汞常于组织中的巯基结合； 3. （111）盐酸浸取； 4.离心或过滤； 5.取上清液调pH至33.5； 6.巯基棉吸附：有机汞和无机汞都被吸附； 7.洗涤：水洗 8.（15）或12mol/L盐酸可选择性地洗脱甲基汞；可直接用侧汞仪测定或用苯萃取后电子捕获检测器气相色谱法测定,注意： 巯基棉地制备：棉花为多糖，具有很多羟基，在乙酸、乙酸酐和硫酸存在下，可与巯基乙酸反应，以酯键结合，使棉花戴上巯基。 R-OH +SH-CH2-COOH ROOCCH3SH 样品中加入氯化钠的作用：有助于研细；盐析样品中地蛋白质；提供足够的氯离子，使甲基汞稳定。 巯基棉对汞的吸附效率受pH值影响很大在pH33.5时，对汞的吸附效率最大。,半胱氨酸气相色谱法,样品经含有氯化钠和硫酸铜的酸性混合液研成糊状，用苯萃取其中的甲基汞，加入半胱氨酸乙酸盐溶液，甲基汞与半胱氨酸结合，加入6mol/L的盐酸，再用苯萃取甲基汞，注入代电子捕获检测器的气相色谱仪测定，标准曲线法定量。,溶剂萃取侧汞仪法,原理：在L-抗外血酸和碘化钾共存下，使甲基汞生成碘化甲基汞，被苯萃取，用侧汞仪测定。 L-抗外血酸的作用：防止游离碘的生成，以免游离碘影响甲基汞的萃取，提高回收率。,第五节 乳及乳制品的卫生检验,一、概述 乳及乳制品的种类：鲜乳、消毒乳、炼乳、酸乳、奶油、奶酪 主要卫生问题 1.微生物污染致营养成分的分解和感观性状的改变。 2.抗生素、农药及饲料添加剂的残留。 3.惨伪 4.金属污染,检测指标及卫生标准,营养成分：蛋白质、脂肪； 鲜度指标：感观检查及酸度； 农药：滴滴涕、六六六； 金属：铅、无机砷；,二、乳及乳制品中脂肪的测定,乳及乳制品中脂肪以脂肪球形式存在，并被酪蛋白钙盐包裹，处于高度分散的胶体分散系中，不能被乙醚和石油醚提取，需预先使脂肪游离出来，再进行测定。 哥特里罗紫法 1.原理：利用氨溶液（碱性条件）使酪蛋白钙盐水解成可溶性铵盐，使脂肪游离出来，再用乙醚石油醚提取，蒸馏除去溶剂后，残留物即为脂肪。,2.说明： 哥特里罗紫抽脂瓶有刻度，可直接读出提取液体积。 本法为国际通用方法，准确度高。 水解时，60水浴加热，并加入乙醇，沉淀蛋白质，溶解醇溶性物质，使其留在水相中。 加入石油醚的作用是降低乙醚的极性，使乙醚不与水混溶，有利于分层。,钙勃氏法,1.原理：在样品中加入浓硫酸破坏乳的胶体性，并且将乳中的酪蛋白钙转变成可溶性的重硫酸酪蛋白，使脂肪游离出来，通过加热离心，使脂肪迅速分离，直接读出脂肪的百分数。 2.测定：将10ml硫酸到如钙勃氏乳脂瓶； 沿管壁准确加入11ml样品； 加入1ml异戊醇，加塞； 震荡后静置，加热（6570，5min），离心 加热（6570，5min）后，取出读数。,3.说明： 硫酸的作用：破坏脂肪球，使脂肪游离出来，还可增加液体的密度，使脂肪容易浮出。 硫酸的浓度应严格控制，过高会使样品炭化；过低则不能使酪蛋白完全溶解，会使结果偏低或使脂肪层浑浊。 该法只适合鲜乳和乳制品脂肪的测定，而不适合含巧克力和糖的乳制品，因为容易炭化。 4.该法比哥特里罗紫法准确度低。,自动仪器分析法,1.乳脂快速测定仪： 原理：利用螯合剂破坏牛乳中悬浮的酪蛋白胶束，使其溶解，用匀质机将悬浮的脂肪球大小调整均匀，再经稀释达到光度测定要求，用比浊分析测定脂肪含量。 说明：仪器带有配套稀释剂，其组成为EDTA二钠、NaOH、表面活性剂、消泡剂。,2.牛乳成分综合分析仪法 利用红外光谱法，可同时测定牛乳中的脂肪、蛋白质、乳糖等，其特征波长分别是：脂肪5.723m（酯键中的羰基）、蛋白质6.465m（肽键）、乳糖9.610m（羟基） 特点：快速、简便。,三、乳与乳制品酸度测定,1.乳与乳制品酸度的概念：中和100ml乳及乳制品所需0.1000mol/LNaOH标准溶液的毫升数，用oT表示。 2.测定方法：酸碱中和滴定法，酚酞作指示剂。 3.结果判断：鲜牛乳酸度正常值16 oT 18 oT，高于18 oT视为不新鲜，低于16 oT ，可怀疑为惨水或惨中和剂,第六节 酒的卫生检验,一、概述 酒的分类 1.发酵酒：粮食等经发酵除去固性物后制得的酒。酒精含量418度。如啤酒、葡萄酒、黄酒、清酒、果酒等。 2.蒸馏酒：粮食等经糖化、发酵、蒸馏制得的酒。如白酒，度数高。 3.配制酒：以发酵酒或蒸馏酒作酒基，配加一定比例的可食用辅料，如色素、香精、花果药材等制得的酒。如汽酒、香槟酒、桂花酒、人参酒等，酒精含量1540度。,酒的主要卫生问题 1.甲醇：壳和皮果胶中的糖苷多为甲基酯形式，发酵或水解后产生甲醇。所以，不去皮和壳的粮食酿的酒，甲醇含量高。甲醇是剧烈的神经毒，损害视神经，抑制呼吸，致双目失明，死亡。 2.杂醇油：碳原子数3的多种高级醇的总称。主要是异戊醇和异丁醇，其次还有正丁醇、正丙醇、异丙醇、正戊醇。杂醇油能与酸生成酯，使酒具有酒香。但有一定的毒性，可引起剧烈头痛。,3.醛类：有甲醛、乙醛、丁醛和戊醛，主要来源于谷壳，毒性比相应的醇高，其中甲醛毒性最大，是细胞原浆毒，可使蛋白质变性和酶失活。 4.氰化物：来源于含氰苷的木薯或果核，氰苷水解产生毒性极强的氢氰酸。 5.有害金属：主要是铅和锰，来源于蒸馏器、冷凝器、储酒器的溶出。 其他：假酒、霉菌毒素、熏蒸剂残留 卫生标准见P178表105,二、气相色谱法测定酒中甲醇和杂醇油,原理： 1.色谱柱选择：由于甲醇和杂醇油是中等极性或弱极性化合物，有的分子可形成氢键，因此要选择能形成氢键的聚乙二醇20000作为固定液，中等极性的GDX-102(高分子多孔微球102)或硅藻土6201为担体作为色谱柱， 2.分离：各组分在固定液中的溶解度不同，随载气推动溶解挥发反复进行，溶解度小的组分随载气流动速度快，先出峰，溶解度大的组分随载气流动的速度慢，后出峰。,3.定性：保留时间或峰高增量法。 如：进40l样得一色谱图，另取40l样加0.1l甲醇标准液进样得一色谱图，比较两图，峰高明显增加者为甲醇峰，以此类推。 4.定量：峰高比较法或内标法 峰高比较法,式中：Cx为样品中某组分的含量，g/100ml；hx为样品中某组分的峰高；hs为标准中某组分的峰高；Vx为样品进样体积， l；Vs为标准液进样体积， l；Cs为标准液中某组分的含量，mg/ml。,内标法定量 标准溶液的配制：在10ml容量瓶中进行，先加少量的无水乙醇，再加内标物各100l，以无水乙醇稀至刻度，按公式vd1000/10(mg/ml)求出各组分的含量. 校正因子的测定：进1l标准溶液，然后在色谱图中量出各组分的峰高，计算出各组分的校正因子：,样品测定： 取酒样约0.85ml，加1乙酸丁酯乙醇溶液40l，以酒样稀至1.00ml，混匀，进样40l，得色谱图，按下式计算样品各组分含量。 式中：fi为待测物校正因子；hi 待测物峰高；hs为内标物峰高；0.03528为100ml酒样中内标物的含量。,注意事项 1.标准物或内标物有：甲醇、丙醇、丁醇、异丁醇、戊醇、异戊醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯。 2.杂醇油以异丁醇和异戊醇总量计算。 3.样品乙醇浓度低于60度时，必须按60度折算，即结果计算时乘以60/c，c为实测浓度。 4.乙醇浓度低测定：用酒精计测定；配制酒需蒸馏后才能测定；结果为体积百分比，并要换算成20时低酒精度数；所以，要同时侧样酒低温度。,三、酒中甲醇低测定,品红亚硫酸分光光度法 1.原理：,2.注意事项： 发酵酒和配制酒需蒸馏后，先测乙醇浓度，再取样分析。 样品中本身含有甲醛应事先除去，除去方法是：在碱性条件下，加硝酸银蒸馏，使甲醛被银离子氧化成甲酸，在碱性下生成盐而不被蒸馏出来。 反应中，过量的高锰酸钾用草酸除去。 加入草酸硫酸后，溶液产生热量，应冷却后再加显色剂，以免显色剂分解。 甲醇显色反应低灵敏度与乙醇浓度有关，乙醇浓度控制在56内为宜，且样品管与标准管乙醇浓度要一致。,变色酸法 1.原理：,2.样品及标准测定 取适量样品或蒸馏样品、甲醇标准液00.6ml； 加6%无甲醇乙醇溶液补至1.0ml； 各加50g/L高锰酸钾0.2ml； 各加120磷酸0.2ml； 摇匀，反应15min； 加100g/L亚硫酸钠溶液0.6ml除去过量高锰酸钾（若脱色不完全，可加2滴120磷酸）； 冰浴中加31硫酸4ml，20g/L变色酸0.6ml； 8085水浴加热12min； 冷后比色，L=0.5cm，580nm,3.注意事项 变色酸试剂空白A0.05，应预先精制，并临用时配制。 发酵酒及配制酒需蒸馏后测定。 取样体积应根据样酒滴乙醇浓度计算，以保证样品管显色后乙醇浓度在56内，并与标准一致。取样体积的计算： V(ml)= 6.3ml5%6%/c 式中：6.3为显色后各管溶液总体积； c为样酒实测乙醇浓度； 5%6%为溶液中应控制的乙醇浓度,四、酒中杂醇油的测定 对-二甲氨基苯甲醛光度法 原理,注意事项 1.杂醇油标准物：异丁醇和异戊醇 （14），根据各组分显色灵敏度和含量选择。 2.无杂醇油的乙醇制备：0.1ml乙醇，按分析步骤测定，不得显色。如显色需处理：取无甲醇乙醇200ml，加入0.25g盐酸间苯二胺，加热回流2h，用分馏柱控制温度蒸馏，收集中间流出液100ml。 3.无甲醇乙醇的制备：95乙醇300ml，加入少量高锰酸钾蒸馏一次。再在流出液中加入1gAgNO3 和1.5gNaOH水溶液，取上清液蒸馏，收集之间流出液200ml。 4.显色后尽快测定，有色物随时间延长而变浅。 5.对二甲胺基苯甲醛应临用时配制，若变黄则不能使用。,五、酒中氰化物的测定,异烟酸吡唑酮分光光度法：见水质理化检验。