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1 / 3 生物实验报告 /实验报告 实验生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 一、实验目的 初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。 二、实验原理 1还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团,因此叫做还原糖。蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基,因此叫做非还原性糖,不具有还原性。本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否,而不能鉴定非还原性糖。 斐林试剂由质量浓度为 mL 的氢氧化钠溶液和质量浓度为 mL 的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的 Cu2 沉淀。 Cu2 与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的 Cu2O 沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下: CH2OH 4 CHO 2Cu2CH2OH 4 COOH Cu2O 2H2O 用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色棕色砖红色。 2蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,2 / 3 常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为 mL 的氢氧化钠溶液和质量浓度为 mL 的硫酸铜溶液。在碱性溶液中, 双缩脲能与 Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。 3脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹 染成橘黄色,被苏丹 染成红色 三、实验过程 四、实验用品 五、注意 1.关于鉴定还原糖的实验,在加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部,并放入盛开水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾 ,可以上提试管夹,使试管底部离开大烧杯中的开水。 2.斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后方可使用,切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。 3蛋白质的鉴定中先加双缩脲 A,再加双缩脲
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