（有机化学专业论文）南海红树林内生真菌sbe14次级代谢产物研究及结构修饰.pdf

南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 南海红树林内生真菌s b e - 14 次级代谢产物 研究及结构修饰 申请人：魏志勇 专业：有机化学 导师：佘志刚副教授 摘要 海洋真菌的代谢产物是药物的丰富来源，它们在抗菌，抗肿瘤，治疗心血管 疾病，免疫调节剂等领域有极其重要的应用，而成为当今国际上研究的热点。红 树林是热带和亚热带海岸潮间带特有的植物群落，红树林沼泽区有充足的植物材 料，有丰富的浮游藻类和浮游生物，这些条件正适合于微生物的繁殖。近年的研 究表明红树林栖息地是真菌新种属的丰富来源。 本论文共分三章。 论文的第一章综述了近五年来海洋微生物次级代谢产物和生物活性的研究 进展。并且对不同门类产生出新次级代谢产物数量及其药理活性进行了横向比 较。 论文的第二章研究了南海红树林内生真菌s b e 1 4 的次级产物，从中分离得 到了五个化合物，通过1 d 2 dn m r ，m s ，x r a y 单晶衍射等方法测定了这些化 合物的结构，发现其中两个为新化合物，并且首次用x r a y 单晶衍射方法测定 a u s t d i o l ( n e w ) 的绝对构型，对所分离化合物进行了初步活性筛选，其中化合物 s e c a l o n i ca c i da 在体外抗肿瘤初步试验中表现出很好的活性，对两种不同口腔癌 的细胞k b ，k b v 2 0 0 的i c 5 0 均小于l p g m l ，而且该化合物还能有效抑制神经元 i i i 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 细胞凋亡。 论文的第三章对真菌s b e 1 4 的代谢产物a u s t d i o l 进行结构修饰，共得到七 个结构修饰产物，其中六个为新化合物，并对产物进行了初步生物活性测试。初 步的体外抗肿瘤试验中，对口腔癌细胞株k b 、k b v 2 0 0 的i c 5 0 值均大于5 0 r t g m l 。 关键词：红树林内生真菌，次级代谢产物，生物活性，结构修饰，a u s t d i o l i v 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 s t u d y i n go nt h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so fm a n g r o v e e n d o p h y t i cf u n g is b e - 1 4f r o ms o u t hc h i n as e aa n d s t r u c t u r a lm o d i f i c a t i o n m a jo r ：o r g a n i cc h e m i s t r y a u t h o r ：z h i y o n gw e i s u p e r v i s o r ：p r o f z h i g a n gs h e a b s t r a c t t h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so fm a r i n ef u n g ih a v eb e c o m et h ef o c u so fr e s e a r c h t h r o u g h o u tt h ew o r l dr e c e n t l yb e c a u s ei to f f e r sr i c hr e s o u r c e sf o rm e d i c i n ea n dp l a y s a ni m p o r t a n tr o l ei nf i e l d sl i k ea n t i b i o s i s ，a n t i t u m o r , t h ec u r eo fc a r d i o v a s c u l a rd i s e a s ea n d i m m u n o m o d u l a t o re t c m a n g r o v ei sau n i q u ep h y t o c o e n o s i sl i v i n ga tt h em o u t ho fr i v e ro r c o a s to f t h et r o p i c sa n ds u b t r o p i c s t h em i r eo f m a n g r o v ei sr i c hi np l a n tm a t e r i a l s ，e s p f l o a t i n ga l g a ea n dp l a n k t o n s ，w h i c hi sf i tf o rt h eb r e e do fm i c r o b e s t 1 1 er e c e n tr e s e a r c h e s s h o wt h a tt h eh a b i t a to fm a n g r o v eh a sb e e nt h er i c hr e s o u r c e so ft h en e w s p i c e sa n d g e n u so ff u n g i t h et h e s i sc o n s i s t so f t h r e ec h a p t e r s i nt h ef i r s tc h a p t e r , w em a i n l yg e n e r a l i z et h er e s e a r c hp r o g r e s so ft h es e c o n d a r y m e t a b o l i t e so fm a r i n em i c r o b e sa n db i o a c t i v i t yi nt h ep r e v i o u sf i v ey e a r s a n dw ea l s o m a k eat r a n s v e r s a l c o m p a r i s o no ft h en u m b e ro fn e ws e c o n d a r ym e t a b o l i t e sa n dt h e i r p h a r m c a c t i v i t yg e n e r a t e db yd i f f e r e n tt a x o n s i nt h es e c o n dc h a p t e r ，w eh a v eas y s t e m a t i cr e s e a r c ho ft h e s e c o n d a r y v 南海红树林内生真菌s b e 一1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 m e t a b o l i t e so fm a n g r o v ee n d o p h y t i cf u n g is b e - 14f r o ms o u t hc h i n as e a , f r o m w h i c hf i v ec o m p o u n d sa r ei s o l a t e d b yt h ew a yo f1d 2 dn m r ，m s ，a n dc r y s t a l x r a yd i f f r a c t i o nt ot e s t i f yt h e i rs t r u c t u r e s ，t w on e wc o m p o u n da r ef o u n da n dt h e a b s o l u t ec o n f i g u r a t i o no fa u s t d i o l ( n e w ) i sd e t e r m i n e df o rt h ef i r s tt i m et h r o u g h c r y s t a lx - r a yd i f f r a c t i o na n a l y s i s a l lt h ea c t i v i t i e so f t h o s ec o m p o u n d si s o l a t e da r e s c r e e n e d c o m p o u n ds e c a l o n i ca c i dap r e s e n t ss t r o n ga c t i v i t yi nt h ei n i t i a lt e s to fi n v i t r oa n t i t u m o rk ba n dk b v 2 0 0 ，t h ev a l u eo fi c 5 0i sl e s st h a nll x g m l ，a n di tc a n c o n t r o lt h ea p o p t o s i so fn e r v ec e l le f f e c t i v e l y t h et h i r dc h a p t e rm a i n l ym o d i f i e st h es t r u c t u r eo ft h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so f e n d o p h y t i cf u n g isb e 一14a u s t d i 0 1 a sar e s u l t ，s e v e np r o d u c t sa r ep r o d u c e d s i xa r e n e wc o m p o u n d sa m o n gt h o s e ，a n dt h e i ri n i t i a lb i o a c t i v i t i e sa r ea l s ot e s t i f i e d i nt h e i n i t i a lt e s to ft h e mi nt h ef i e l do fi i lv i t r oa n t i t u m o r , t h e ya r en o ts oe f f i c i e n t ，t h e i rv a l u eo f i c 5 0i sa l la b o v e5 0 t g m li nt h et e s to f c e l ls t r a i no fo r a lc a n c e rk b 、k b v 2 0 0 k e y w o r d s ：m a n g r o v ee n d o p h y t i cf u n g u s ，s e c o n d a r ym e t a b o l i t e ，b i o a c t i v i t y , s t r u c t u r a lm o d i f i c a t i o n ，a u s t d i o l v i 知识产权保护声明 本人郑重声明：我所提交答辩的学位论文，是本人在导 师指导下完成的成果，该成果属于中山大学化学与化学工程 学院，受国家知识产权法保护。在学期间与毕业后以任何形 式公开发表论文或申请专利，均需由导师作为通讯联系人， 未经导师的书面许可，本人不得以任何方式，以任何其它单 位作全部和局部署名公布学位论文成果。本人完全意识到本 声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者签名囊毯惫岛 日期：如8 年6 月j 日 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指 导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用 的内容外，本论文不包含任何其它个人或集体已经发表或撰 写过作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体， 均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律 结果由本人承担。 学位论文作者签名：魏0 匆 日期：幽诱舌1 - 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 学位论文使用授权声明 本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规 定，即：学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定 机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢 利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室 被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索， 可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。 学位论文作者虢讯蝴翩虢墓冽 日期：埔年6 月j 日 日期：加谐年6 月歹日 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 第1 章海洋微生物次级代谢产物研究进展 1 1 前言 海洋作为人类生命的摇篮，拥有世界3 0 0 0 万种物种中的9 9 ，而陆地和淡水 里拥有的物种还不到l 。海洋的面积是陆地面积的2 5 倍，海洋的环境又十分独 特，包罗了高压，低营养，低温( 特别是深海) ，无光照，以及局部高温，高盐 等等所谓生命极限环境。 微生物是地球上生物量最大的生物类群，其生活的范围最广、生物多样性也 最为丰富，在生物圈和地球物质循环中发挥着重要的作用。微生物生存环境和生 命策略的多样性表明：它们已经解决了许多科学家目前仍在寻找解决方案的问 题。无论是作为探索各种生命过程、生态和生物进化原理的研究对象，还是在工、 农、医药、食品及环境整治、能源再生等领域，微生物都发挥了无法取代的作用。 因此，微生物资源形成了人类赖以生存和发展的重要物质基础和生物技术创新的 重要源泉，对化学和药物学科的发展起着极其重要的作用。 随着人类寿命的延长和环境污染的加剧，心脑血管疾病、肿瘤、艾滋病、糖 尿病、老年性痴呆等疑难疾病对人类健康的威胁f l 益严重，仅病毒性疾病平均每 年就新增2 3 种，人类迫切需要寻找新的、特效的药物来治疗这些疾病。为此， 人们纷纷将目光投向海洋，为了开辟新的药源，世界各国都在开发陆地天然药物 和化学合成药物的基础上，转向从海洋生物中探索新的药物资源，海洋生物活性 物质的研究是海洋生物医药研究的主导方向。 回顾2 0 0 1 年以前的文章可以发现，从1 9 6 5 2 0 0 0 年，每年从海洋天然产物 中发现新化合物的增长速度都非常快，在2 0 0 1 2 0 0 5 年，这种增长几乎持平。 而在本年代后半期，从m a r i n l i t 数据来看，仍将延续稳定的高速增长( 相对1 9 6 5 年以来) ( 如图1 1 ) 【1 1 。 南海红树林内生真菌s b e 一1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 4 5 0 0 4 0 0 0 1 9 6 5 1 9 7 1 1 9 7 6 1 9 8 1 1 9 8 6 - 1 9 9 1 1 9 9 6 2 0 0 1 7 07 58 08 59 0 9 52 0 0 02 0 0 5 图1 一i 1 9 6 5 2 0 0 5 年海洋大然产物数量 从2 0 0 1 2 0 0 5 年收集的不同地理来源和门类的数据，和过去的3 6 年( 1 9 6 5 2 0 0 0 年) 收集的样品数据相比，可以说明上面的差别( 如图1 - 2 5 f 1 1 3 ) 【1 1 。 0 6 0 5 0 4 0 3 0 2 0 1 图1 - 2 按区域来源引用2 0 0 卜一2 0 0 5 年所i i 总量( 1 9 6 5 2 0 0 5 年) 百分比 一2 o 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 o 0 0 5 0 5 0 5 0 5 3 3 2 2 l 1 们屯cjo目ou呐。们hu q l - h r _ 乏 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 f k 。| | 。| 一。j l r 。i j 二i 77 i ij j 。? j 1 。帮j j 6 7 穗 ， 。 7 ；i ， ? j 。j1|一? j j 巷 f ，7、 7|，7。o ， 7 。一，：二笼 ， 。 ， 冀一 j i 。蔼 一 ，；皇 l f- 一一 j j 。辔 f 一c o。一 。，j 1 一 ， - 一_ 一_ 一 一_ 一_ 一_ 一_ 一_ 一_ 一 。一_ 一_ 一- 一_ 一 _ z- 一- 一 _ 一 h 一 ， 。毋戳p 一葺”l ，嚣妒南雠 譬 】镕p 图1 3 按门类来源引用2 0 0 卜一2 0 0 5 年所占总量( 1 9 6 5 2 0 0 5 年) 百分比 尽管在m a r i n l i t 数据中关于地理位置的描述并不是非常精确，但是中国作为 资源增长最快的一个地区是毫无疑问的。虽然其他地区的绝对样品数相对要少， 但是n o r t hs e a ，t h eb a l t i c 和r u s s i a nt e r r i t o r i e s 等地区的增长也非常显著。 有些人也许会奇怪于关于海洋微生物的文章有4 5 的是在2 0 0 0 年以后发表 的。其他门类也表现出相对增长的关注。p o r i f e r a ，c h o r d a t a 年1 c o e l e n t e r a t a 这些“传 统 的门类，在1 9 6 5 2 0 0 0 年间占据着绝对重要的地位，因为这些门类都比微 生物要大得多。近年来尽管没有确切的数据统计，通过了解前沿发现我们很容易 看到这种趋势仍在延续。 分析对比了2 0 0 1 2 0 0 5 年以及之前( 1 9 6 5 2 0 0 0 年) 的数据后，我们可 以发现海洋微生物的研究目前正处在一个繁荣阶段，这将吸引更多的人来从事这 方面的研究工作，继而在门类和地理区域的选择上取得更快的进步。 1 2 近年来海洋微生物次级代谢产物研究进展 由四种来源不i 拘s t r e p t o m y c e ss p 产生了一系列不同的代谢产物。首先，对 来自o a h u ( h a w a i i ) 的海底沉积物进行培养，得到了具有抗真菌和抗细菌活性 的代谢产物b o n a c t i n1 2 1 。新化合物2 是一个l ，4 蒽醌，j 叭l a g u n ad et e r m i n o s 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 ( g u l fo fm e x i c o ) 的链霉菌沉积物样品中分离得到，它对葸环类抗生素具有中 等的抑制活性，更微妙的是，它对s t r e p t o m y c e sv i r i d o c h r o m o g e n e s ，s a u r e u s 及 e c o l i 也都具有中等的抑制活性，除此之外，对许多人类肿瘤细胞系也有抑制作 用【3 1 0 研究小组对墨西哥海域的一种未鉴定的无脊椎动物的s t r e p t o m y c e ss p 进行 培养，分离得到化合物3 5 ，在对葸环类抗生素的肿瘤细胞系平板试验中，均有 中等活性【4 1 。最后，在对k o m o d oi s l a n d ( i n d o n e s i a ) 海底沉积物的s t r e p t o m y c e ss p 培养中，分离得到蒽环类抗生素k o m o d o q u i n o n ea6 和甙元k o m o d o q u i n o n eb7 ， 而且k o m o d o q u i n o n ea 对成神经细胞瘤有抑制作用【5 】。 o ho n o o c 书u 一 3r = 、，o h 4r - y “蟛n 、o h 5r _ 八n o 0 h h 6 贮誓剖。h 7 ， 6 h n m e z 在来自中国胶州海峡的海底沉积物a c t i n o m a d u r as p 培养中分离得至q p h e n o x - a z i n - 3 一o n ea n t i b i o t i c s ，c h a n d r a n a n i m y c i n sa c8 1 0 ，c h a n d r a n a n i m y c i n sa c 对结肠 细胞癌有和好的抑制活性，其中化合物c h a n d r a n a n i m y c i n sc 对真菌m u c o rm e i h e i ， 细菌b s u b t i l i s 和e c o l i 都有抑制作用，而且对微海藻c h l o r e l l av u l g a r i s ，c s o r o k i n i a n a 币- i s c e n e d e s m u ss u s p i c a t u s 也有抑制作用【6 j 。 0 彬0 n 儿or 6 h h 1 0 从来自澳大利亚t a s m a n i a 的海底沉积物a s p e r g i l l u sc a r n e u s i 辛培养分离后得 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 到五种新的缩肽类化合物a s p e r g i l l i c i n sa e11 1 5 ，其中氨基酸的排列次序是通过 m s n 离子肼和e s i 质朴光谱法确定的，立体构型则是通过标准的方法来确定。 a s p e r g i l l i c i n sa e 对h a e m o n c h u sc o n t o r t u s ( 血矛线虫属) 表现出中等的细胞毒 性【7 1 。 l lr 1 一o m e r 2 h m e 2 r 3 2 _ m e 12r 1 5 0 m e ，r 2 = c h m e 2 ，r 3 = c h 2 c h 2 c h 3 ，r 4 = m e - 巩- n ，r ：蹦钇，飓= ，k = m e 4 即r 4 = h , r 2 = c h m e 2 , r 3 = ，5r ，3 。m e ，r 2 2 r ，r 3 2 ，r 4 2 m e 两种环七肽类化合物s c y t a l i d a m i d e sa1 6 和b1 7 ，是从s c y t a l i d i u ms p 的培 养液中分离得到，该s c y t a l i d i u ms p 来源于b a l l a m a s 的绿藻h a l i m e d as p 表面。化 合物的绝对构形是通过c d 测试方法等标准方法来确定的，s c y t a l i d a m i d e sa 和b 对体p b h c t 一1 1 6 细胞系都有中等的细胞毒性【引。 】6 r = h1 7r = m e 缩肽类化合物t a s i p e p t i n sa1 8 和b1 9 【9 1 从来自西太平洋群岛p a l a u 海域的 藻青菌s y m p l o c as p 中分离得到，此外，从该菌种中还分离得到一个具有细胞毒 性的肽类化合物t a s i a m i d eb2 0f l o 】。该三种化合物的相对构形以及绝对构形均通 过常规手段鉴定得出，而对化合物t a s i a m i d eb 的c 2 8 的绝对构型目前并未能作 出判定，通过n m r 数据【l o l ，暂定为是s 型的。在体外k b 细胞测试中，t a s i p e p t i n s 南海红树林内生真菌s b e 一1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 a 和b 都表现出中等的细胞毒活性。 簿富i 恩钭菇慧 h n v 如 r 悯鼻甲蒜悯童n 矿甲n 矿钭 o o h 2 0 在对一株没有给出来源i 拘n e r e u s t m 真菌s i l l a t u s 培养后，分离得到 了大环内酰胺a u r e o v e r t i c i l l a c t a m2 1 ，该化合物的立体构型从目前所有的数据来 看，只有2 位u 6 位上的烯键能确定为( 2 e ，6 e ) ，而其他的双键并不能确定其构型。 在对人体结肠癌细胞系毒性的测试中，该化合物表现出中度的活性】。 o h 2 l o h 化合物g u t i l l g i m y c i i l2 2 【1 2 1 是一种强极性的三苯恶洒唑青霉素，该化合物的 绝对构型通过x r a y 单晶衍射分析确定。它是由来自墨西哥海湾l a g u n ad e t e m i n o s 的海底沉积物跏印，d 叼彤p ss p e c i e s 中分离得到【1 ”。另外，从该菌种中还 分离得到新化合物t r i o x a c a r c i n sd f2 3 , 2 5 ，以及已知化合物t r i o x a c a r c i n s a c 【1 4 - 16 1 。新化合物t r i o x - a c a r c i l l sd f 是通过结合化合物g u t i i l g i m y c i n2 2 的 、； ；： 心h o n 一 一义 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 x 一豫y 的单晶衍射以及已知化合物l t r i o x a c a r c i n sa 和b 【1 6 】的绝对构型推断而出。 在对许多有机生物体的测试实验中，t f i o x a c a r c i n s 和g u t i n g i m y c i n2 2 都表现出很 强的抗菌活性，化合物t r i o x a c a r c i nd 抗肿瘤活性和之前报道的化合物t r i o x a c a r c i n s a c 抗肿瘤活性相类似。同时化合物t r i o x a c a r c i na 和t r i o x a c a r c i nd 都是有效的抗 疟原虫药17 1 。 2 2 m ，o h m o a e o h o h ，o h 新化合物p e t r o b a c t i ns u l f o n a t e2 6 i s l 和已知化合物p e t r o b a c t i n 【1 9 】一样，是从海 洋细菌m a r i n o b a c t e rh y d r o c a r b o n o c l a s t i c u s 油降解物中分离得到，该化合物是首次 从海洋中发现的含有磺化3 ，4 二羟基的芳环的海洋含铁细胞。该磺酸酯化合物 p e t r o b a c t i ns u l f o n a t e i 拘结构是基于化合物p e t r o b a c t i n 所提供的光谱数据而推断出 来的【2 0 1 。 南海红树林内生真菌s b e 14 次级代谢产物研究及结构修饰 h h 对来自日本t n a b eb a y 的l e p t o s p h a e r i as p e c i e s 菌种中，分离得到化合物五 种新化合物l e p t o s i n so p2 7 3 1 ，该菌种来源于马尾藻类海草s a r g a l s s u mt o r t i l e 【2 1 1 。该系列化合物的结构和立体构型则是通过醋酸酯的衍生物来确定的。化合 物l e p t o s i n s0 和l e p t o s i n sp 对p 3 8 8 细胞系有显著的细胞毒活性，而l e p t o s i n s0 和l e p t o s i n ss 则对3 9 种人类癌细胞系具有中等的细胞毒性1 2 2 】。 u 九 o j ， j 导h 一2 7 肛陋刚e 弹2 2 8 噼r = 。p t s s s m m e e 卜h ? 3 0 r 瓠s m e 、h n 夸h 0 n 矜n 一3 1 r = i 。n h 2 e m e r i c e l l av a r i e c o l o 是来自日本g o k a s y og u l 悔底沉积物中分离得到的菌种， 对该菌种进行培养后，分离得到两种全新的二倍半萜，6 一e p i o p h i o b o l i ng 3 2 和 6 e p i o p h i o b o l i nn3 3 ，以及之前报道过的六种蛇孢假壳素。所有这些从该菌种中 分离得到的化合物对成神经细胞瘤细胞系都有细胞毒性1 2 ”。 互，：3 3 鼻： 3 2 r 歹k 人r = 、人 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 三种脂肽类化合物j a m a i c a m i d e sa c3 4 - 3 6 ，从l y n g b y am a j u s c u l a ( h e c t o r s b a y ，毡防j a m a i c a ) 中分离得到，化合物的结构通过a c c o r d i o nl ，1 一a d e q u a t e 实 验确定，这种实验能够检测1 h 1 3 c 一1 3 c 自旋系统中的远程1 3 c 一1 3 c 耦合常数值，而 表现出准确的2 一和3 键的h m b c 相关关系1 2 4 1 。目前仅仅只有j a m a i c a m i d e sa 的 c 2 3 的立体构型能够做出准确判定( m a r f e y s ) 。生物合成实验认为，j a m a i c a m i d e s 是由p k s 和n r p s 的集合单元相互交替而成，然后通过克隆来固定，最后再由生 物合成基因串来验证j a m a i c a m i d e s 系化合物表现出细胞毒性，钠离子通道阻塞 性，以及含鱼毒性【2 5 1 。 o m e 二加n ! 上h 广n 7 咚 3 4r = b r 3 5r = h o m e ：加n 由勺7 、o 3 6 从来i 刍t a v e u n ii s ( f i j i ) 的l m a j u s c u l e 和s c h i z o t h r i xs p 的混合物中，分离 得到了1 1 种含氯的类脂，a v e u n i a m i d e sa k3 7 4 7 。t a v e u n i a m i d e sf4 2 ，g4 3 和 k4 7 表现出相对较强的盐水虾细胞毒性【2 6 1 。从l m a j u s c u l e t 2 7 1 中分离得到的这种 有效神经毒素k a u ( r o x i n ，它的绝对构型是通过对其及其同系物的全合成来确定 的，并被认定茭j ( 3 r , 7 r , 8 s ，1 0 s ，2 r ) 1 2 8 】。该化合物j # j h c t 1 1 6 具有出有效的抑制 活性【2 9 1 。 三全超r co 除世吖a c37rj hr zc o o m e 3 8 r lc ir 2c o o m e - ， i o o 、歹惑o y 一 c，i 5 ， 。2 ， = u 。 上n ，、 _ c 4 2 r 1 r 2 2 h 3 9 南海红树林内生真菌s b e 一1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 d 谕、c o o md 卧朦a c t l n ，、众l 。；ie丫 、一v 4 0r = c o o m e 4 3r = h d f 1 譬节1 m e o o c r 2 41 ( 7 r ，8 r ) r 1 - h ，r z = c o o m e ，r 3 = c i 4 4r l = r 2 2 r 3 h 4 5r 1 2 c 1 ，r e 2 r 3 2 h 4 6r 1 2 c i ，r 2 2 h ，r 3 2 c i 4 7 化合物a n k a r a h o l i d e sa4 8 和b4 9 是糖基化的s w i n h o l i d e s ，是从海洋藻青 菌g e i t l e r i n e m as p ( 来源于n o s ym i t s o - a n k a r a h ai s l a n d ，m a d a g a s c a r ) 中分离得到。 而从先前的报道来看，s w h a h o l i d e 也是从藻青菌中分离得到，但是该菌采自于日 本的f i 证岛【3 0 l 。这两项发现是目前为止都是首次直接从藻青菌中分离得至l j s w i n h o l i d e s ，证实了藻青菌也能直接产生类似的代谢产物( 因为之前仅仅只有在海绵 中发现该类代谓f 产物，而在异养型的细菌中却并未能发现。) 在抑制n c i h 4 6 0 ， n e u r o 2 a 和m d a m b 4 3 5 等细胞增殖过程中，a n k a r a h o l i d ea 和s w i n h o l i d ea 具 有相类似的活性【3 l 】。 h o m e o 、 m e 从日本k u s h i m o t o 海峡赤藻腰鞭毛虫中采集的k a r e n i am i k i m o t o i 菌种中分离 得到聚醚类化合物g y m n o c i n b5 0 3 2 】，该化合物是到目前为止所见过的拥有最多 紧连醚环的化合物，紧连醚环数达到1 5 个。由于空间阻碍作用，该化合物的 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 m t p a 酯没有能成功制备得到，因此该化合物的绝对构型最仞并没有能得到确 定。但是接下来通过一系列方法最终将该化合物的绝对构型确定下来，这些方法 包括对衍生物的构象分析，以及卟啉卟啉环的远程二向色性激发子耦合 相互作用( 用于手性分析) 3 3 】。g y m n o c i n b 对p 3 8 8 具有细胞毒性，但是只有 很弱的含鱼毒性。 o h 文夕、 j ，o h o h 从夏威夷岛海滩的沙子采集到的菌种s y m b i o d i n i u ms p 中分离得到一种由 6 1 6 6 个的羟基组成的不可分离的多羟基大环内酯类混合物，该类化合物被命名 为z o o x a n t h e l l a m i d ec s ( z a d c lt oz a d c 5 ) 5 1 5 5 3 4 】。详细的n m r 光谱分析数 据表明，该混合物和先前在同一种菌中分离得到的z o o x a n t h e l l a m i d ea 【3 5 】相类似， 且可以确定该混合物中含有五种大环内酯类化合物，因此该类化合物被命名为 z o o x a n t h e l l a m i d ec s ( z a d c lt oz a d c 5 ) 。这类混合物在老鼠血管中能够引起血 管收缩1 3 6 1 。 h o h 5 1 l a c t o n i s e da t3 4 5 2i a c t o n i s e da t3 5 。5 3l a c t o n i s e da t3 6 5 4i a c t o n i s e da t3 7 5 5l a c t o n i s e da t3 9 。 o h 随着海底沉积物成为细菌和巨生物的重要菌种来源，海洋微生物也越来越引 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 起人们的广泛关注。在对放线菌m a r i n i s p o r a 的培养中，分离得到大环内二酯抗生 素m a r i n o m y c i n sa d5 6 5 9 。全( e ) 型i 拘m a r i n o m y e i na 会慢慢光异构化为m a r i n o m y c i n sb 和c ，在没有光线的情况下，化合物m a r i n o m y c i na 是主要的代谢产物， 而仅仅只有很少量的m a r i n o m y c i n sb 和c ，也就是说可能只有m a r i n o m y c i na 才。是 真正意义上的天然产物，当然这并没有得到完全肯定的证实。假定倾向于光异构 化的化合物m a r i n o m y c i na 被认定为是天然产物的话，则在该系列中全( e ) 型的 m a r i n o m y c i nd 也被推定为是真正的天然产物。除了严格的立体构型之间的区别 外，化合物m a r i n o m y c i i la 和其他m a r i n o m y c i n sb d 的旋光性也相反，这使得作 者认为在m a r i n o m y c i na 中，全一( e ) 型四烯使得跨环间的氢键存在，这最终决定了 该化合物产生一种能够促进烯属激子耦合的构型。所有的m a r i n o m y c i n s 化合物对 m e t h i c i l l i n r e s i s t a n ts t a p h y l o c o c c u sa u r e u s ( m r s a ) 都表现出抑制作用。而m a r i n o m y c i na 对v a n c o m y c i n r e s i s t a n ts t r e p t o c o c c u sf a e c i u m ( v r e f ) 也有抑制作用，并且 该化合物对c a n d i d aa l b i c a n s 也有微弱的抑制作用。m a r i n o m y c i n sa c 在m c i ) 6 0 癌细胞平板实验中，对四分之三的黑素瘤细胞系表现出高度的选择活性，尤其要 指出的是t o m a r i n o m y c i na x , t s k m e l 5 具有极高的选择活性f 3 7 】。m a r i n o m y c i na 的光异构化作用，被用于对m a r i n o m y c i n sa c 的全合成中【3 8 】。 h 5 7r = h5 9r = m e o h 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 o h 从德国e a s tf r i s i a nw a d d e ns e a 的海水中分离出的一株新菌种h a l o m o n a s s p ，研究人员在对该菌种培养后分离得到两种新的化合物，h y d r o x y p h e n y l p y r r o l e 2 , 5 d i c a r b o x y l i ca c i d s6 0 和6 1 。该两个化合物都已经通过全合成成功制得【3 9 】。 这两个化合物都能有效的促进癌细胞繁殖，并且也能抑制1 2 o t e t r a d e c a n o y l p h o r b 0 1 13 a c e t a t e ( t p a ) 将b a r r 病毒的早期抗原e p s t e m 激活。同样在对该菌 种培养时，研究人员在其中加入了维生素l ，结果产生了不同的次级代谢产物， 分离得到了新化合物2 a m i n o ra e n o x a z i n 3 o n ed e r i v a t i v e s6 2 6 4 。在这些化合物 中，化合物6 2 和6 3 是革兰氏阳性菌抑制剂，同时对人体肿瘤细胞系也有中度 的抑制活性【4 0 1 。 h h or 6 0r = h6 1r = o h h o 6 26 3r = h6 4r = o h 从加利福尼亚s a l ld i e g o 岛0 的海底沉积物中分离得到菌种s t r e p t o m y c e ss p 。对 该菌种培养后分离得到四种氨基化合物d a r y a m i d e sa c6 5 6 7 和( 2 e ，4 e ) 7 m e t h y l o c t a - 2 ，4 一d i e n o i ca c i da m i d e6 8 ，化合物6 5 6 8 对h c t - 1 16 有中度的细胞毒 性，而对c a n d i d aa l b i c a n s 抑制作用则更弱【4 1 1 。 南海红树林内生真菌s b e 1 4 次级代谢产物研究及结构修饰 hqis；ohho h a l i r 2 h 2 n 。c 沁i 对来源于不同的地方菌种s t r e p t o m y c e ss p ，研究人员分别从中分离得到了不 同的代谢产物。从来自g u a m 海底沉积物的s t r e p t o m y c e ss p 菌种中，分离得到双 稠吡咯啶类生物碱类化合物b o h e m a m i n eb6 9 ，b o h e m a m i n ec7 0 和5 c h l o r o b o h e m a m i n ec7 1 4 2 】；从来自s h e t l a n di s l a n d s 海底沉积物的s t r e p t o m y c e ss p 中，分离 得到t u r a u c h i m y c i nc7 2 u r a u c h i m y c i nd7 3 4 3 】；从来自西太平洋洼j l a y u t r o u g h 深海沉积物的s t r e p t o m y c e ss p 中，分离得到含有细胞毒性的化合物 s t r e p t o k o r d i n7 4 【4 4 】；从墨西哥l a g u n ad et e r m i n o s 海峡海底沉积物的s t r e p t o m y c e s s p 中，分离得到了对s t a p h y l o c o c c u sa u r e u s 和s t r e p t o m y c e sv i r i d o c h r o m o g e n e s 有抑 制活性的化合物a n t h r a q u i n o n e s7 5 和7 6 4 5 1 ；从中国青岛的海洋植物s a l i c o r n i a h e r b a c e a q b ，采集至( 1 s t r e p t o m y c e ss p p 中的另两种菌，而从这两株菌中分离得到色 原酮7 7 ，a n t