生物科学毕业论文

1 泉 州 师 范 学 院 毕业论文（设计） 题 目 夜交藤水煎液 对小白鼠 的 镇静 催眠 作用 化学与生命科学 学 院 生物科学 (食品质量与安全 ) 专业 2007 级 本科 班 学生姓名 钱新俊 学 号 071004045 指导教师 骆传祖 职 称 教授 完成日期 2011-05-05 教务处 制 2 夜交藤水煎液 对小鼠 的 镇静催眠 作用 钱新俊 （ 071004045） 泉州师范 学院 07 生物科学专业（食品质量与安全方向） 指导教师 骆传祖 (教授 ) 【 摘要 】 本实验 通过使用 等浓度不同剂量的 夜交藤 水 煎液 采用 喂食和腹腔注射 的方法来观察实验 小白鼠的 自发活动以及 研究 小鼠入睡时间和睡眠维持时间， 与实验对照组的比较， 来 研究 夜交藤水煎液对小鼠镇静催眠的作用。 其结果为 夜交藤水煎液能抑制小鼠的 日常 活 动， 缩短 其正常 入睡时间， 延长 其 睡眠时间 。而且 在一定范围内 （相同浓度下） 随着剂量加大，效果 更加明显 ，入睡时间明显 缩短，睡眠维持时间增长， 注射比 喂食效果更加显著。 【 关键词 】 夜交藤 水煎液 小 白 鼠 镇静催眠 随着社会 经济 的发展， 人们 生活节奏的加快， 工作 压力与日俱增，因此 产生的 睡眠 质量问题也越来越 引人关注 。 改善睡眠是维持健康生活所必须的， 于是 使用各种药物来提高睡眠质量的人越来越多 ， 但 长期使用必然 会对人体健康产生伤害 。因此 使用伤害低的中药物成为必然趋势。 虽然是药 都 三分毒，但中药 对人体产生的伤害 还是比西药小很多 。 从各种 有关 权威 资料得知， 夜交藤 有安神作用 1。 并且 通过 该 实验证实 可考虑 将其 用于人 类 ， 提高人类的睡眠质量，从而降低 因 服用过量安眠药对人体产生的 毒副作用， 维持人类的生活健康， 丰富有利于我国中医中药的国际化 。 夜交藤 ,又名 首乌藤 Tuber Fleeceflower Stem Caulis Ploygoni Multiflori,为蓼科植物何首乌的藤岭， 为常用中药 .其主要来源为 蓼 科多年生缠绕草本植物何首乌的藤茎或带叶藤茎 2。在我国， 夜交藤 分布于华东、中南及河北、山西、陕西、甘肃、台湾、四川、贵州、云南等地 3。 分布范围广，资源十分丰富。 而且容易 种植、采收，是一种理想的和有广泛开发应 用前景的天然药物源。 夜交藤用药历史悠久， 不仅可以入心经，养心神，治失眠。还具有 养血、祛风、止痛之效 4。 祖国医学认为，夜交藤具有养心安神，通络祛风的作用 5。现代研究发现，夜交藤 对防治 动脉粥样硬化 有特殊 作用 6， 还 能 增强 免疫功能 7。药理实验证明，夜交藤具有镇静催眠作用 8 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 夜交藤 400g 后浦药店 1.1.2 实验 用 动物 健康小鼠 20 只 ，体重 18-22 g , 由泉州东街宠物店提供 . 1.1.3 动物 基础饲料 小白鼠 所需 基础饲料 ，同时 还有 大米 。 1.1.4 动物 饲养环境 实验室 温度 ： 14-16 ， 干燥整洁 。 1.1.5 器具 电炉 ， 注射针头，棕色瓶， 电子 天平，试剂瓶，烧杯， 笼具 (套 )，量筒，胶头滴管， 玻璃皿， 玻璃棒，酒精，棉签。 1.2 方 法 9.10 此处 列参考文献 .涉嫌抄袭他文 3 1.2.1 夜交藤 水煎液 的制备 称取夜交藤 250g，加 入 300ml 蒸馏水，浸泡 1 h， 持续 煎煮 2 次，第 1 次 30 min， 再加入一定量蒸馏水， 第 2 次 煎煮 20min，合并煎液 ， 用纱布过滤，收集滤液 于玻璃瓶中备用。 1.2.2 实验设计分组 1.2.2 .1 试 验动物分组及标记 选用 正常 的 小 鼠 16 只 ，体重 18-22 g， 将买来的小白鼠放在实验室一段时间 ， 3 天后按随机方式分成 4 组 ， 组名： 生理盐水 对照组、夜交藤 水煎液 药物组 (低、中、高剂量组 )。为确保各组小鼠间体重无显著差异， 可 对分组 前的 小鼠的体重进行方差分析 ，减少实验误差。 1.2.2.2 给药剂量设计 夜交藤水煎液 ，按 要 求，设计人体正常推荐剂量 (30kg /60kg)的 5 倍 ,保健食品检验与评价技术规范实施手册要 求 10-20 倍给药。其剂量设计如表 1-1。 表 1-1.小鼠的给药剂量 （预） 设计 组别 小鼠数量（只） 浓度 （ g/ml） 剂量 1 4 生理盐水 0.05、 0.10、 0.15 2 4 1 0.10 3 4 1 0.20 4 4 1 0.30 根据喂食和腹腔注射要求 并参照 小鼠体重情况，按小鼠平均体重 20g，每组小鼠开始每天按 1-1 设计的剂量进行预实验。实 验期间根据小鼠的实际反应情况做剂量调整， 通过预实验得知 ：生理盐水对小白鼠的作用效果是一样的，所以最后选定生理盐水剂量为 0.10ml， 全部 实 验小鼠的平均体重 以 20g 为基准。最后确定每天喂食剂量 见表 1-2 。 表 1-2.小鼠的给药剂量设计 组别 小鼠数量 /只 浓度（ g/ml） 剂量 1 4 生理盐水 0.10 2 4 1 0.05 3 4 1 0.10 4 4 1 0.15 1.2.3 试验动物给药及饲养管理 对照组 间给于 0.10ml 的 生理盐水 ， 喂食前小鼠 饥饿处理一段时间 。注射组 小白鼠 每只 每天 注射 1次，基础饲料自由摄食，两天换水一次。 将各个实验组和对照组小鼠分笼饲养，并在各个笼上作好标记 。1.2.4 对小鼠自发活动的影响 任意 取小鼠 16 只，随机分为 4 组。 每组 4 只，在笼子贴上标签标志， 组名： 生理盐水 对照组 、 夜交藤药物组 (低剂量、中剂量、高剂量 )。 给药前 先观察小鼠是否有异常反应，若无，给药。 并且连续给药 7d， 给药 后开始观察小鼠的 自由活动、入睡时间与睡眠维持时间的长短 11。 记录 并制作成表格与图形格式。 1.2.5 统计处理 测定结果以平均数士标准差 （ MEANSDE） 表示， 显著性检验为 t 检验，显著性水平为 P 0.0 5 极显著性水平 P 0.0 1， 试验中独立样本 t 检验和方差分析处理 。 2 结果 2.1 实验结果 2.2.1 喂食组 表 2-1.喂食组 小鼠的 入睡潜伏时 间及维持时间 （浓度都一样为 1g/ml） 组别 小鼠数量 /只 剂量 /ml 入睡潜伏时间 /min 睡眠维持时间 /min 4 1 4 0.10 46.5013.158 14.3233.571 2 4 0.05 22.1422.928 37.3854.675 3 4 0.10 19.4562.697 49.2785.197 4 4 0.15 12.1082.438 67.3495.776 由表 2-1 可得， 3 个 不同 剂量的 药物 喂食 组与 生理盐水对照 组 1 比较，在小鼠恢复常态之前，小鼠入睡 所需 时 间明显缩短，不 活 动的时间明显增加。 2.2.2 注射组 表 2-2.注射组 小鼠的入睡潜伏时间及维持时间 组别 小鼠数量 /只 剂量 /ml 入睡潜伏时间 /min 睡眠维持时间 /min 1 4 0.10 44.5643.213 17.4284.763 2 4 0.05 13.8462.536 67.8494.895 3 4 0.10 10.4292.513 109.1075.021 4 4 0.15 6.0292.482 127.60610.365 由表 2-2 可得 ， 3 个 不同 剂量的 药物 注射 组与 生理盐水 对照 组 1 比较 ，小鼠入眠潜伏时间减短 明显 ，睡眠 维持时间显著变长。 剂量增大，越显著，不仅入眠时间缩短，同时小鼠在睡眠时的状态更深， 用外物触碰小白鼠其反应 活动的次数更少。 图 2-1.喂食组小鼠的入眠潜伏时间与维持时间 0 10 20 30 40 50 60 70 80 H2O 0.05 0.10 0.15 入睡潜伏时间 睡眠维持时间 5 图 2-2. 注射 组小鼠的入眠潜伏时间与维持时间 图 2-3. 喂食 及 注射 两种给药方式的 入眠潜伏时间 比较 0 10 20 30 40 50 60 H2O 0.05 0.10 0.15 喂食组 注射组 0 20 40 60 80 100 120 140 160 H20 0.05 0.10 0.15 入睡潜伏时间 睡眠维持时间 6 图 2-4. 注射及喂食两种给药方式的小鼠睡眠维持 时间 比较 3.讨论 由表 2-1 可得， 通过喂食， 使用 相同浓度 ， 3 个 不同 剂量 的 药 物 组 与 生理盐水对照组 比较 。 在 药物失去效果之前 ，小鼠入睡时间明显缩短 12， 小鼠 睡眠维持 时间明显增加。 随着 剂量 的 增加，入睡时间不断 缩短，睡眠维持时间也呈相关关系增长，中 、 低剂量 下 虽然 小白鼠 入眠时间相差不多，但睡眠 维持时间也呈 正 相关增长。 由表 2-2 可得， 通过注射， 相同浓度下， 3 个 不同 剂量的 药物 组与 生理盐水对照组 比较， 在药物失去效果之前， 小鼠入眠潜伏时间 明显 减短， 睡眠 维持时间 明显增长 。低剂量时小鼠的睡眠状态较浅，会有各种小活动 等 ， 随着 剂量增大，不仅入眠时间 不断 缩短，同时小鼠在睡眠时的状态更深，活动的次数更少。 由 图 2-1 可得， 通过喂食， 相同浓度下 3 个 不同 剂量的药物组与 生理盐水 对照 组比较， 在药物失去效果之前， 小鼠 入睡潜伏期减短， 不走动的时间明显增加。其中 药物组 剂量组 与生理盐水对照组比较 P 0.0 1，具有极显著性。 但较低剂量时小鼠的睡眠状态较浅，会翻身，骚脑，睁眼等 13。 由图 2-2 可得， 通过 注射 ， 3 个剂量的药物组与 生理盐水 对照组比较， 在药物失去效果之前， 小鼠入睡潜伏期减短，不走动的时间明显增加。其中药物组与生理盐水对照组比较 P 0. 0 1， 具有极显著性。 表明注射 夜交藤水煎液的效果明显，夜交藤具有 显著的催眠 安神作用。 由图 2- 可知，夜交藤 水煎液 使用 喂食 的 动物 入睡潜伏 期 明显 高 于 夜交藤水煎液经 注射 的， 其中入睡潜伏期为 生理盐水对照组 最高 。 随剂量的升高 药物组 小白鼠 入睡时间 减 短， 各剂量组与 生理盐 水 对照 组 对小白鼠的 入睡潜伏时间影响 作用 差异显著，若适当提高剂量，应该可以显著减短 小白 鼠 的入 睡 时间。 由图 2-4 可知， 除生理盐水对照组外， 夜交藤水煎液经注射的 小白鼠 睡眠维持时间明显高于夜交藤水煎液经喂食的， 其中 生理盐水对照组 最低 。 然而 不同剂量条件下使用 喂食 方法小白鼠的睡眠维持时间没有显著的 差异 ， 应该 是 使用喂食方法的条件下 小白鼠自身作用的影响。 本实验结果表明 : 夜交藤水煎液 具有 抑制小鼠的自发活动 的作用 ， 缩 短小鼠入眠时间， 延长小鼠睡眠的时间，因此， 可知 夜交藤 对小白鼠 具有镇静催眠的作用 14.15。 本实验得到的启发：夜交藤水煎液具有对小白鼠 具 有镇静催眠的作用， 由于小白鼠与人类之间有很多相 似之 处， 所以本实验可以对人类镇静催眠药物种类的丰富及为中西药联合作用提供参考。 致谢 本文的 实验 室 部分 ,生物实验中心提供了大力帮助 ，在此表示衷心的感谢！ 0 20 40 60 80 100 120 140 160 H20 0.05 0.10 0.15 喂食组 注射组 7 参考文献 1 李智欣 .夜交藤改善睡眠有效成份 J.食品科学 ,2007,28(4):327-331 2 江苏新医学院 .中药大辞典 M.上海 :上海科技出版社 ,1985,143 3 高农 ； 韩学俭 .夜交藤采收与加工技术 J. 西北农林科技大学 , 2007-06-044. 4 刘颖 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Caulis polygoni multiflori decoction sedative and hypnotic effects in mice QuanZhou Normal College 07 Biological Sciences (Food quality and safety directions) 071004045 Qian Xinjun Instruct teacher: Luo Chuanzu (Professor) Abstract： the concentration through the use of different doses of caulis polygoni multiflori decoction used method of feeding and intraperitoneal injection of experimental mice to