药学研究生开题报告

龙须藤的有效部位治疗关节炎的抗炎药效机理及质量控制标准研究,指导老师：XXX教授教授,汇报人: XXX,国内外研究概况,研究的主要内容,主要内容,选题的依据,已开展的工作,选题的目的和意义,研究方法及技术路线,研究的创新点,实验进展,1 选题的目的和意义,骨关节炎（OA）也称退行性骨关节病，本病是由于关节软骨完整性破坏以及关节软骨下骨板病变，导致关节症状和体征的一组异质性疾病。按照关节分布可以分为局限性关节炎和全身性骨关节炎。膝骨关节炎是局限性骨关节炎的常见病，临床上以关节疼痛、僵硬、活动受限、活动时有磨擦响声为特征。本病中年以后多发，发病率随年龄增长而增高，严重危害着中老年人的健康。 膝骨关节炎的病因目前尚不完全明了，一般认为膝骨关节炎发病的主要原因有生物力学因素、遗传因素、外源性因素等参与导致滑膜、软骨和骨的代谢改变，进而产生炎症、关节结构破坏，其最基本的病理改变是关节软骨的损伤退变。,目的和意义,1 选题的目的和意义,现代药理研究表明，龙须藤的提取物具有良好的抗炎作用。龙须藤提取物能明显抑制胶原诱导性关节炎大鼠足肿胀，改善关节滑膜组织炎性浸润及增生等炎症反应，降低TNF-、IL-6、IL-8等炎症介质的含量。从龙须藤乙醇提取物中得到的乙酸乙酯萃取部分能显著提高昆明小鼠的痛阈值、明显抑制二甲苯所致的急性炎症反应。 龙须藤的抗炎疗效确切，有利于开发成治疗膝骨关节炎的抗炎药物。此外，作用治疗膝骨关节炎的抗炎中药受用人群广泛，患者顺应性好，将龙须藤药材开发成治疗膝骨关节炎的抗炎中药具有一定的经济及社会效益。,目的和意义,2 国内外研究概况,国外学者对龙须藤的研究主要是化学成分的分析，而国内也有不少学者对龙须藤的化学成分进行研究，目前为止，已经从龙须藤中分离鉴别出数十种化学成分，主要为黄酮、鞣质、氰苷以及挥发油等。 Chien CC等从我国台湾产的龙须藤根茎中分离出6种多甲基黄酮类化合物，并且从龙须藤中分离出没食子酸，表儿茶素没食子酸酯。白海云等从龙须藤藤茎的乙酸乙酯部位中分离鉴定出2种黄酮苷类化合物，分别是槲皮苷、杨梅苷；从龙须藤中分离得到2个甾醇类化合物，分别为-谷甾醇、胡萝卜苷。叶蕻芝等通过龙须藤挥发油经气相色谱-质谱联用技术分离鉴定，分离出78个峰，鉴定出其中的24种化合物。,2 国内外研究概况,易荆丽等通过药效学实验跟踪方法研究龙须藤药材的镇痛抗炎活性成分，表明了龙须藤的乙醇提取物具有较好的镇痛抗炎作用，其乙酸乙酯萃取部分是其有效活性部位之一；从广东产的龙须藤中分离出数种化合物，通过药理实验验证了5,7,3,4,5-五甲氧基黄酮具有较强的镇痛抗炎活性。 张玉琴等通过胶原诱导性关节炎大鼠模型证明龙须藤具有抗类风湿关节炎的作用，其中正丁醇部位和乙酸乙酯部位为佳，可以降低胶原诱导性关节炎大鼠关节肿胀度、改善胶原诱导性关节炎大鼠外在体征，并且可以降低胶原诱导性关节炎大鼠血清和滑膜组织中TNF-、IL-6、IL-8的含量、抑制滑膜组织增生、改善关节滑膜炎症。,3 选题依据,理论依据 目前临床上用于治疗膝骨关节炎的化学药物主要有非甾体抗炎药、甾体类抗炎药。非甾体抗炎药治标不治本，甾体类抗炎药疗效确切，但伴随较多的不良反应。 龙须藤的抗炎疗效确切，有望开发成治疗膝骨关节炎的抗炎药物。此外，作用治疗膝骨关节炎的抗炎中药受用人群广泛，患者顺应性好。 本课题组长期从事龙须藤的抗炎疗效的科研工作，有较深厚的学科基础。,3 选题依据,前期工作研究依据 已经成功运用SD大鼠造膝骨关节炎模型。明确该模型的致炎物质的用量、浓度，以及造模过程的操作细节与注意事项。 龙须藤的抗炎疗效确切，龙须藤的不同浓度乙醇提取物对治疗膝骨关节炎具有不同程度的疗效，且70%浓度乙醇提取物效果最佳。 本课题组长期从事龙须藤的抗炎疗效的科研工作，有较深厚的学科基础。,4 研究的创新点,运用大鼠膝骨关节炎模型验证龙须藤乙醇提取物、抗炎有效部位治疗膝骨关节炎的药效基础。,对从乙酸乙酯萃取部位分离得到的有效抗炎成分进行药理药效研究，更加符合中医药传统理论的整体观念。,根据龙须藤抗炎有效部位的体内吸收代谢过程，为其选择合适的药物剂型。,5 研究内容,1SD大鼠膝骨关节炎造模可行性分析。2. 龙须藤乙醇提取物治疗膝骨关节炎的药效基础研究。3. 龙须藤治疗膝骨关节炎的抗炎有效部位的筛选、分离以及药效机理研究。4. 对从龙须藤乙酸乙酯萃取部位分离得到的有效抗炎成分进行药动学研究。5. 根据龙须藤抗炎有效部位的药动学参数为龙须藤抗炎有效部位选择合适的药物剂型，并对所选的药物剂型进行制备工艺优化。,内容,6 研究方法及技术路线,1.1,.1,31,41,5,采用溶剂系统二氯甲烷/乙酸乙酯、二氯甲烷/甲醇不同梯度洗脱，TLC跟踪分析，分离龙须藤抗炎有效部位。,考察使用碘乙酸钠对SD大鼠进行膝关节注射造膝骨关节炎模型的可行性与造模周期，明确操作细节。,考察龙须藤乙醇提取物治疗膝骨关节炎的药效基础，采用SPSS软件进行系统的分析比较，选择合适的提取浓度。,考察龙须藤抗炎有效部位治疗膝骨关节炎的药效机理，采用SPSS软件进行系统的分析比较。,采用HPLC法测定龙须藤抗炎有效部位用药后的血药浓度，研究其药代动力学特征及口服生物利用度，为其选择合适药物剂型，运用正交设计对所选剂型进行制备工艺优化。,本试验技术路线,大量查阅相关文献,本试验技术路线,大量查阅相关文献,预试验造膝骨关节炎模,本试验技术路线,大量查阅相关文献,预试验造膝骨关节炎模,对模型大鼠灌胃龙须藤乙醇提取物，考察龙须藤乙醇提取物的抗炎药效基础,本试验技术路线,大量查阅相关文献,预试验造膝骨关节炎模,对模型大鼠灌胃龙须藤不同浓度乙醇提取物，考察龙须藤乙醇提取物的抗炎药效基础,对模型大鼠灌胃龙须藤抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎药效机理,本试验技术路线,大量查阅相关文献,预试验造膝骨关节炎模,对模型大鼠灌胃龙须藤乙醇提取物，考察龙须藤乙醇提取物的抗炎药效基础,对模型大鼠灌胃龙须藤抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎药效机理,通过药动学实验明确龙须藤抗炎有效部位的体内吸收代谢过程,本试验技术路线,大量查阅相关文献,预试验造膝骨关节炎模,对模型大鼠灌胃龙须藤乙醇提取物，考察龙须藤乙醇提取物的抗炎药效基础,对模型大鼠灌胃龙须藤抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎药效机理,通过药动学实验明确龙须藤抗炎有效部位的体内吸收代谢过程,选择合适的药物剂型,本试验技术路线,大量查阅相关文献,预试验造膝骨关节炎模,对模型大鼠灌胃龙须藤乙醇提取物，考察龙须藤乙醇提取物的抗炎药效基础,对模型大鼠灌胃龙须藤抗炎有效部位，考察抗炎有效部位抗炎药效机理,通过药动学实验明确龙须藤抗炎有效部位的体内吸收代谢过程,药物剂型的制备工艺优化,选择合适的药物剂型,7 实验进展,2013.7-2013.8：SD大鼠膝骨关节炎模型可行性研究2013.9-2013.10：龙须藤不同浓度乙醇提取物治疗膝骨关节炎的药效基础研究2013.11：龙须藤乙酸乙酯萃取部位的抗炎有效部位的分离2013.12-2014.1：龙须藤抗炎有效部位的药效机理研究2014.2：数据整理分析2014.3-2014.5：龙须藤抗炎有效部位的药动学研究2014.6-2014.8：龙须藤抗炎有效部位的制备工艺优化研究,8 已开展的工作,明确了使用碘乙酸钠对SD大鼠进行膝关节注射造膝骨关节炎模型的可行性。使用该模型验证龙须藤不同浓度乙醇提取物的抗炎药效基础,其中70%乙醇提取物治疗效果最佳。,通过经典的溶剂分离系统法从龙须藤70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离出抗炎有效部位，预实验验证了该部位具有抗炎药效，治疗膝骨关节炎的效果优异。,8 已开展的工作,造模前和造模后的对比,8 已开展的工作,未造模,造模后给药治疗,8 已完成的研究成果,9 研究工作中面临的技术难点和拟采取的解决办法,1. 运用大鼠膝骨关节炎模型对龙须藤乙醇提取物、抗炎有效部位进行药理药效研究，确定该药理模型的可行性与操作细节，这是本课题研究的基础。2. 确定龙须