脑脊液检查

脑脊液检查,赵珊,一 、 标本采集及处理,1、脑脊液检查的适应症和禁忌症,2、标本采集及处理,腰椎穿刺成功后立即测定脑脊液压力，然后留取脑脊液标本于3个无菌试管中，每个试管1-2ml。第一管作病原生物学检验，第二管作化学和免疫学检验，第三管作理学和细胞学检验。标本采集后应立即送检，并与1小时内检验完毕。标本放置过久，可以造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等，影响检验结果；标本应尽量避免凝固或混入血液，若混入血液应注明。,二、理学检查,一、颜色,脑脊液黄变症的原因及临床意义,二、透明度,肉眼观察脑脊液透明度变化，分别以“清淅透明”、“微浑”、“浑浊”等描述。正常脑积液清晰透明。脑脊液的透明度与其所含的细胞数量和细菌多少有关当脑脊液白细胞超过300*106/L时可成浑浊；脑脊液中的蛋白质明显增高或含有大量细菌、真菌时，也可使脑脊液浑浊。结核性脑膜炎的脑脊液可成毛玻璃样的浑浊，化脓性脑膜炎的脑脊液呈脓性或块样浑浊，穿刺损伤性脑脊液可呈轻微的红色浑浊,三、凝固性,正常脑脊液，放置12-24小时后不会形成薄膜、凝块或沉淀。脑脊液形成凝块或薄膜与其所含的蛋白质，特别是与纤维蛋白原的含量有关，当脑脊液蛋白质含量超过10g/L时，可出现薄膜、凝块或沉淀。化脓性脑膜炎的脑脊液在1-2小时内呈现块状凝固，结核性脑膜炎脑脊液在12-24小时内呈薄膜或纤细的凝块；神经梅毒的脑脊液可有小絮状凝块，蛛网膜下腔梗阻的脑脊液呈黄色胶样凝固。脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离，称为Froin-Nonne综合征，这是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特点。,四、比密,脑脊液比密为：腰椎穿刺：1.006-1.008，脑室穿刺：1.002-1.004，小脑延髓池：1.004-1.008。凡是脑脊液中的细胞数量增加和蛋白质含量增高的疾病，其比密均增高。常见于中枢神经系统感染、神经系统寄生虫病、脑血管病、脑肿瘤、脑出血、脑退行性变和神经梅毒,三、显微镜检查,质量控制细胞计数：标本采集后应在1小时内进行细胞计数。标本放置过久，细胞可能凝集成团或被破坏，影响计数结果。标本必须混匀后方可进行检查，否则会影响计数结果校正与鉴别：因穿刺损伤血管，引血性脑脊液，白细胞计数结果必须校正，以消除因出血带来的白细胞细胞计数时，应注意红细胞、白细胞和新生隐球菌的鉴别。新生隐球菌不溶于乙酸，加优质墨汁后可见未染色的荚膜；白细胞也不溶于乙酸，加酸后细胞核和细胞质更加明显；红细胞加酸后溶解。,检查方法：白细胞直接计数法法的试管与吸管中的冰乙酸要尽量去尽，否则结果偏低。若标本陈旧细胞变形时，白细胞直接分类法误差大，可采用涂片染色分类法分类计数。染色固定：涂片染色分类计数时，离心速度不能太快，否则影响细胞形态，可采用玻片离心法、沉淀室法收集细胞。涂片固定时间本不能太长，更不能高温固定，以免使细胞皱缩，影响检验结果参考值 无红细胞。白细胞极少，成人（0-8）*106/L,儿童（0-15） *106/L，主要以 单个核细胞为主，淋、单 之比为7:3,四、化学和免疫学检查,蛋白质1.检测原理 脑脊液蛋白质的检验有定性和定量两种方法，并可根据需要计算蛋白商（球蛋白/白蛋白)和脑脊液清蛋白指数RALB 脑脊液清蛋白/血清清蛋白（1）定性方法：常用方法有Pandy试验、硫酸铵试验等。（2）定量方法：常用方法为磺基水杨酸硫酸钠比浊法。质量控制（1）假阳性：因穿刺出血，血液蛋白质混入脑脊液；试管和滴管等器材不洁，试剂苯酚不纯等可致假阳性（2）假阴性：室温低于10或苯胺饱和度减低等可导致假阴性（3）阳性对照：人工配制含球蛋白的溶液，可在正常脑脊液或配制与正常脑脊液基本成分相似的基础液中加不同量的球蛋白,参考值及临床意义参考值：定性 阴性（或弱阳性） 定量 腰椎穿刺0.2-0.4g/l 小脑延髓池穿刺0.1-0.25g/l 脑室穿刺0.05-0.15g/l 蛋白商0.4-0.8 RALB 7*10-3临床意义： 脑脊液蛋白质含量增高是血-脑屏障功能障碍的标志。由于脑脊液清蛋白只来源于血清，因此RALB 更能反映血-脑脊液屏障完整性。脑脊液蛋白质增高可见于中枢神经系统的感染、梗阻和出血等多种疾病 蛋白商反映了脑脊液球蛋白与清蛋白的比例变化。蛋白商增高：提示脑脊液球蛋白含量增高，见于多发性硬化症、神经梅毒、脑脊髓膜炎、亚急性硬化性全脑炎等。蛋白商减低：提示脑脊液清蛋白含量增高见于化脓性脑膜炎急性期、脑肿瘤、脊髓压迫症等,葡萄糖 原理：脑脊液葡萄糖含量大约为血糖50%-80%，其高低与血糖浓度、血-脑脊液屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有关。脑脊液葡萄糖检验多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶定量法参考值： 腰椎穿刺2.5-4.4mmol/l 小脑延髓池穿刺2.8-4.2mmol/l 脑室穿刺3.0-4.4mmol/l。临床意义：（1）葡萄糖减低：细菌性脑膜炎和真菌性脑膜炎，以化脓性脑膜炎早期减低最明显；脑寄生虫病；脑肿瘤神经梅毒低血糖昏迷、胰岛素过量所导致的低血糖状态。（2）葡萄糖增高：新生儿及早产儿糖尿病或静脉注射葡萄糖脑或蛛网膜下腔出血所导致的血性脑脊液病毒性脑膜炎或脑炎急性颅脑外伤、中毒、缺氧、脑出血等所致丘脑下部损伤等,氯化物检测原理：由于脑脊液中蛋白质含量减少，为了维持脑脊液和血浆渗透压的平衡，氯化物含量约为血浆的1.2-1.3倍。氯化物定量检验方法与血清氯化物检验方法相同，检测方法有硝酸汞滴定法、电量分析法、离子选择电极和硫氰酸汞比色法。参考值 成人 ：120-130mmol/l；婴儿：110-130mmol/l；儿童：111-123mmol/l,2017/12/12,17,临床意义氯化物减低：细菌或真菌感染，特别是化脓性、结核性和隐球菌性脑膜炎的急性期、慢性感染的急性发作期。细菌性脑膜炎的后期，由于脑膜有明显的炎症浸润或粘连，局部有氯化物附着，使脑脊液氯化物减低。呕吐、肾上腺皮质功能减退时，由于血氯减低，使脑脊液氯化物亦减低。氯化物增高：主要见于尿毒症、肾炎、心力衰竭、病毒性脑膜炎或脑炎,病原生物学检查细菌学检查1、显微镜检查脑脊液涂片碱性亚甲蓝或革兰染色检查致病菌。革兰染色用于检查肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、葡萄球菌、铜绿假单胞菌、链球菌、大肠埃希菌等；碱性亚甲蓝染色用于检测脑膜炎球菌。如果怀疑为结核性脑膜炎，可采用抗酸染色。新生隐球菌常采用印度墨汁染色法，若呈假阳性，可采用苯胺墨染色法2、寄生虫检查血吸虫卵、肺吸虫卵、弓心虫、阿米巴滋养体、脑囊虫等,2017/12/12,20,常见的脑脊液细胞,2017/12/12,21,比例失调可见于中枢神经系统各类感染和非特异性脑膜刺激反应,增多见于中枢神经系统系统感染和非特异性脑膜反应,转化型淋巴细胞是由小淋巴细胞受抗原刺激后转化而成，细胞形态不规则，可见伪足形成，包膜粗糙，不完整。直径一般大于10um。包浆嗜碱性，无颗粒。核呈圆形，常有切迹，核膜清楚，染色质较稀疏呈网状，可见1-2个核仁，少见有丝分裂。可见于细菌性脑膜炎、病毒性脑膜炎、结核性脑膜炎、脑脓肿、多发性硬伤、脑梗死、蛛网膜下腔出血等,是一种核大，浆少，核染色质致密核被较深的凹陷分割成脑样外形的异形淋