降钙素基因相关肽与糖尿病肾病的相关性研究

降钙素基因相关肽与糖尿病肾病的相关性研究青岛大学硕士学位论文姓名王国华申请学位级别硕士专业肾病内科指导教师刘丽秋20040201YJ618081中支摘要降钙素纂因相关肽与糖屎病胬病的撩美性研究搐要鞫的通过检测降钙素基因相关歉CGRP在糖尿病肾病不弼阶段的古盛厦其与虑生胍酐清除率CCR之闯豹相关关系，探讨CGRP在耱最瘸臀病发展过程中的变化及箕作用。方法选墩健康对照组KE25铡，2型糖躁病组洲25例，黯床期糖藏病肾病组BN25例及糖绿病肾瘸肾功能襄竭组DNF25铡为研究对象采用放射免疫势柝法分别测定各试验对象血浆中锑婶鲍含量采用方差分析及系。临床期耱屎瘸肾瘸组33657PGML，糖浆病肾瘸肾功能袭竭组4252LPGML。糖屎病组、临床期糖朦病努瘸缎、藉蒜病臀病瞥功艟衰竭组血浆孛CGRP水平与健康对照组相比水平显著升高P均O01。娲廉期糖屎痛特病鳃比糖藤病组、糖屎瘸蟹瘸弩功能衰竭组比龋床朗糖屎病肾癍组血浆中CGRP术乎明显增高PPO01。O。01。CGRP与CCR呈明摄负相关关系RO76结论L。髓着糖屎病肾病韵病情进展，斑浆中CGRP豹含量逐渐增趣，糖旅病背瘸终束辎CGRP含量明显增簿。2随着CCR的降低，CGRP代铬性的升簿A3。CGRP霹能通过其强大的扩血管作用，对抗糖蹂病肾病导致的高血压，在延缓糖尿瘸肾病发展中发挥作用。关键词降钙素蒸因稽关敞CGRP糖菇病肾瘸放射免疫分析洼糕藤病肉生瓤酐清豫率研究生王国牮肾病内科导师刘黼秋英文摘要RELATIONSHIPBET盹ENTHEPLAS姒LEVELSOFCALCITONINABSTRCTTOTHEROLEOFCALCITONINOBJECTIVESTUDYGENERELATEDTHEBETWEENCGRPPAPTIDECGRP，ANDRELATIONSHIPANDENDOGENOUSCLEARANCEINTHECROATININERATECCRDEVELOPMENTOFDIABETICLEVELSOFCGRPANDCCRWEREMEASUREDNEPHROPATHYTHEPLASMAINDIFFERENTOFWITHDIABETICSTAGESPATIENTSNEPHROPETHYMETHODS75WITHDIABETICMELLITUSAND25NORMALPATIENTSSUBJECTSWICH25WEREENROLLEDINTHEPATIENTSWITHIIDIABETICSTUDY。OFTYPEWEREDIVIDEDMELLITUSDMWITHOUTNEPHROPATHYINTO删GROUP25PATIENTSINCLINICALOFDIABETICDNSTAGENEPHROPATHYDNINTOGROUP,25PATIENTSINRENALFAILUREOFDIABETICDNFANDSTAGENEPHROPATHYDNFINTOGROUP25NORMALCONTROLWASUSEDTOSUBJECTSNCINTOGROUP。ITADIOIMMNOASSAYMEASURETHELEVELSOFCGRPTHEDATAWEREPLASMAEXPERIMENTALPROCESSEDOFTESTBYANALYSISVARIANCE，DUNNETTPLASMALEVELSOFCGRPWERERESULTINANDDNFPGMI，42521PGMLNC，D5I，DNGROUPLEVELSOFCGRPINCREASEDWITHTHESEVERITYOFDIABETICWERESTATISTICALDIFFERENCESBETWEENNCANDSIGNIFICANTGROUPANYSTUDYBETWEENDMANDOTHERWASGROUPANDGROUPANYSTUDYGROUPPOOITHERECORRELATIONBETWEENCGRPANDCCRR一076。SIGNIFICANTLYNEGATIVEPO01CONCLUSION1WITHTHEDEVELOPMENTOFDIABETICLEVELOFCGRPINCREASESCCRSIGNIFICANTLY2WHILEDROPS，CGRPGOESUP3，CGJIPCONTRIBUTETORELAXTHEBLOODVESSELSCOMPENSATIREYANDMAYOFTHEINORDERTORESISTTHEANDCGRPBODYSECONDARYHYPERTENSIONMAY英文摘要ROLEINTHEOFDIABETICALLIMPORTANTDELAYINGDEVELOPMENTPLAYNEPBROPATBYDIABETICKEYWORDCALCITCNINGENERELATEDPEPTIDENEPHROPATBYDIABETICMELLITUSENDOGENOUSCREATININECLEARANCERADIOIMMUNOASSAYGUOHUAPOSTGRADUATEWANGOFDEPARTMENTNEPHROLCGYDIRECTEDBYLIULIQIU1前言降钙素基因相关肽与糖尿病肾病的相关性研究1前言糖尿病是影响人民健康和生命的常见病，近年来糖朦病、糖屎病肾病的发病枣显著升高，糖尿痛孵病已戒为慢性肾功巍衰竭的主要病因之一，延缓和逆转糖尿病肾病、阻止肾功能衰竭的发生已成为当今研究的熟点。糖尿病的肾脏损害可累及肾小球、血管、肾小管和闯质。肾小球可出现结节型硬化、弥漫型硬化和渗出等病变，结节型硬化出现在肾小球周边部的毛细血管。降钙素基因相关肽CGRP是存在于感觉神经末梢的一种神经肚，是一种生物活性多肽，是迄今所稚体内最强的舒血管多款。肾脏是CGRP的主要靶器官，臀血管廉中存在丰富的CGRP受体，CGRP对肾脏有重要的保护及调节作用。本研究通过对糖屎瘸、糖尿病臀病、糖尿病肾藕肾功能衰竭患者血浆中CGRP的定量研究，观察CGRP在糖尿病肾病不同阶段的变化规律及其与内生肌酐清除率的相关关系，探讨CCRP在糖尿病肾瘸发展过程中的作用。2材料与方法21研究对象岁均为健康自愿者，无糖尿病、高血压等病史，空腹、餐后血糖均在正常范围。年，无糖尿瘸并发症出现。部分病人会并离血压、高血精，给予常规药物治疗。2材辩与方法4568岁，患者有多年2型糖犀病史。常揽屎分析尿蛋白一十，合并鸯高血压、高血脂者，给予常规药物控制。岁5072岁，患者寄多年2型糖屎病臀病病变，她予肾功能衰竭期，正在进行维持性血液透析。述病人近期内均秃明显感染征象，所有入选人员均做血、尿常规，野、肾功能等化验检查，并测抽血当日体重。22主要试剂和仪器设备221主要试剂CGRP放免药盒由解放军总医院科技开发中心放免所提供CGRP抗血清2瓶EGRP标准器6瓶“ICGRP2瓶抑肽酶2瓶分离剂PR2瓶缓冲液PBS4瓶LOEDTA二钠2瓶222主要仪器设各法国GILSON公司产晶微量移液器上海仪器设备公司超净工作台3K30型德翻低温台式离心机众成机电技米公司DFM一96型10管放射免疫Y计数器23标本铺餐40UL舶试管中，混均；22材辩与方法100ML无水乙醉12ML冰乙酸放震荡器上故震LMIN；锅上蒸干；424H屠样品完全于燥，加盖，封口，球存在一70X2冰籍中备用。24实验方活PBS05M溶解，德均，僦入塑料试警内，放一2024测定前每瓶加PH74小时以上，样品完全冻结，然后取出放置4完垒溶解，取上清200U1检溯。本实验采用非平衡法，取累苯乙烯试管编号，严格按药盘使用说明书操作，其体步骤如下241药盒配置I1缓冲液每瓶蒸馏永至50ML12标记6个聚苯乙烯试管，6瓶标准品各加IML缓冲液PBS其浓度分别为20，60150。300，600，1200PGML1355M1CGIP抗血清L瓶加PBS14”5ICGRP每瓶加PBS6M2，42如样21取空白对照聚苯乙烯试管岛加缓冲液200UI，标准品S,S各加标准液200U1，标本试管U。U。各自B样品200U1。22S。管、S。孓管、UIU。管各加抗血清100UI，摇均，4Y2放蠢48小时。U。管备加CGRPIOOUL，摇均，4放置24小时。24S。管、S。一S。管、U一U。管备加PR试剂500U1充分混均，室温放置度。3。3结果25内生肌酐清除率CCR测定应用I三L下简便公式计算得出149一年龄岁X体重KG男性CCRMLMINSCRMGD1X72【140一年龄岁X体重KG女性CCRMLMINCRMGD1X8526统计学分析应用SAS612统计软件分析完成。所有数据以均数土标准羞薯S表用赢线相关分析法。3结果100份标本出放射免疫Y计数嚣测定，获得标准曲线弗直接得出各份标本CGRP数值。31标准抽线觅表1表1CGRP测定标准曲线3结景标准照线32备组蠛床旋实验蜜测定数据觅褒2、亵3、表4表2各组临床相关数据IS年龄血糖血总腿固酵组剐铡数四1M1TOOLM1N箩NC255508士6884。68074502093D蜡10031745511。07255785DN54712925592士62L11。12215。DNF2510562214590966050653注；与健康对照组比较8PO01表3各缝COIRP及CCR摊定数值雾S注与健康对照组比较PO01渊与蹦相比，DNF与DN相比P均OOI5一一一缝墨表4各组研究对象CGRP水平对比分析对比组F值P值33各组研究对象CGRP水平分析柱毅图见图一1PG，M134测定数据表3显示随着糖尿病病情的发展，血浆中CGRP的含量逐渐升亦有显著统计学意义PO，01。PO。01。35CGRP与CCR呈明显负相关关系RO。764讨论耱尿病跨瘸DN是胰岛素依赖型和替胰岛素依赖型糖尿瘸的一种常见的微血管并发症。随着人民生堰水平的提高，糖屎病的发病率曰益增高。近期统计资料表明。我国人群中糖尿瘸DM和糖耐量减低IOT的患者分别为的患瘸率均高于无家旗史者。根据美国肾脏病数据统一源USRD1996年的绕计资料，在终束期肾功能衰竭者NN占首位，约为3639“。在我国。N约占终柬期肾功能衰竭患者的5，而且其发痛率里明显的逐年增加的趋势。因此对临庶肾病工作者来说，应给予蜊足够的重视。4。1降钙素基因相关默特点411降钙素基因肽超家族新发现的一种生物活性多敲，出37个氨基酸缎成，是迄今所知体内最强的舒血管多脓。体内和体外研究发现。其扩血管作用挖己酝照碱、三磷酸臁菅、P钙豢基因肽超家族”。CT与CGRP来自一个共同的基因，它们的基因由2800个碱基对组成，其中有5个内含予和6个外显予。它们在不同的组织中进行基霞煎组EG胩基因在甲状腺C细胞可转录、表达成CT，而在神经组织中可以转录、表达为CGRP。CT与CGRP虽然来自一个共同的基因，但其结构、分布和功能都不相同。CT主要参与机体钙的调节。AMYLIN在37个氨基酸的组成中只有8个氨基酸与CGRP不同，它主要分布于胰岛B细胞，与2越糖屎病的发病机制有关。AMYLIN早期改变胰岛8细胞对血糖和食物的生理反应性，在疾病的船期，通过大量沉积干胰腺组织，导致E细胞的破坏，同时它能提高机体的胰7个氨基酸多肽，主要由特上腺维织分泌，约24氮基酸与CCRP相同，与CG卵脊相似的生物学活性。它通过与靶缁胞膜上的特异性受体结合，使细胞内的E删P升高；通过一氧化氮介导直接扩张血管具有排钠利尿作用；以及刺激胰岛素的分泌。4。12CGRP结构及生物学特性人的CGRP有。和B两种分子鼙式，其氮基酸的组成和序列基本稆同，仅在第3、22和25位的氨基酸不同A为天门冬氨酸、缬氨酸和天门冬酰胺；8为天门冬醚艘、虽氨酸和丝氨酸。CGRP主要分布于中枢及姊瘸神经系统冰存在于心盘管系统中，鞋心、蟹有莺墨的缳护及调节手挈角4”。肾脏是CGRP的主要靶器官之一，肾血管床中存在丰富的CGRP受体”“，CGRP与这些受体结台两产生强大的舒张肾血管作用。微穿刺证实，CGRP主要扩张入球小动脉，对出球小动脉扩张作用较弱1，因而使肾小球囊内压升高。KURTZ“”等发现CGRP可使肾小球系膜细脆舒展，从而增加滤过面积。由于CGRP同时增加瞥有效_呶流量、肾小球囊内压和滤进面积，因而使臀小球滤过率显著增加。此对处于失代偿阶段的肾功能来说，是一种代偿机制。CGRP在机体病理条件下的防御秘代偿意义值得高度重视。CGRP在糖屎病肾病发展过程中含量变化及萁对糖尿病肾病的影响，国内外的研究结果不尽相同。本课题通过对糖屎病肾病徽血管病变的发病机制的研究。探讨CGRP与糖尿病肾病的相互关系。4。2糖尿蜻肾病瘸人盥浆中晚期糖化终产物及聱脏内皮素产生增加糖尿痛肾瘸DN是胰岛素依赣型和非胰岛素依赖型糖尿瘸的一种常见的微血管并发症。近年来对DN的病因及发瘸机制进行了大量研究，虽未完全阐明，但已取得了较大进展。糖屎病肾病的发生及发展是多园豢综台作用的结粜，其中糖代谢紊乱、肾脏血流动力学的改变、多种细胞因子以及遗传背景均起非常重要的作用。近年来研究发现蹦有家庭聚集现象，对L一瑚的有关文献搬导列更多“”，无论是L一蹦或2一DM患者，如果先证瘸静L并发矾，他妁兄弟姐妹患DM后叫的发病率要明显增离O“。在耱尿瘸高耱条件一F，多元醇代谢通路亢进，醛糖还原酶被激活，细胞内山梨醇和果糖大量积聚不易透出细胞膜，胞内渗透压升高，导致细胞肿胀，最后导致细胞结构破坏“。蛋白在高糖环境中可发生蛋白菲酶糖化作霹，笼论觑红蛋白还是肾小球基底膜蛋白，随血糖升高，可形成早期糖化产物最后形成晚期耱他终产物AGE，AGE的秘聚这泼与长期血糖水平呈燕比，在肾小球基戚膜等组织的胶原蛋白中，AGE积聚随时间瓶增加“”。肾，J、球系貘细胞上有AGE受体，AGE与系膜细胞上特异性受体结台后，能增加系膜细胞的细胞因子的释放和细胞外基质的产生，避新导致肾小球肥丈和肾小球硬化的发生，加重病变。大量研究均显示严格控制血糖可显著降低DN的发生“”。AGE的小分子量的降解产物能使近端肾小管肉皮纲脆表选内皮素ET的MRNA增加210“”。从而使内皮缁胞产生ETT明显增加。肾脏懿肾小球毛细血管内皮细胞是会成髓的重要来源。内接素是由2I个氮基酸组成的酸性多敢，主要出趣蛰肉皮绷斑合成释放，是迄今发现的最强豹维血管物质“”。ET在体内分三种ET一1、ET一2、ET一3”，组成内皮素家旅，肾脏中主要表达ETL。肼1主要在内皮细胞中表迭，它在内皮细胞损伤时释放，是其损伤标记物。洲阶段由于高血糖症，红细胞凝集性增加，变形性减弱，M小板凝聚功能异常增加，全盘粘滞度和凝匿性增加，这些因素导致缎织缺血缺氧。导致巍管肉皮损伤，日发血管瘸变，引起肉皮索ET释放增多“。蛳患者盘浆内皮素水平增高又加重血管内皮的损害，内皮细胞构损伤可能是DM微血管病变的主簧原因之一。大量实验证明，ET能够增加外周血管阻力，随着肾功能损害的加重，ET水平增加。如前所述，由于AGE的增加，AGE的小分子量的降解产物使近端肾小管痴皮细胞表达内度素盯的M刖A增抽2】溉，ET的转蒙合成明显增加。ET在引起肾血管收缩、肾血管阻力增高、肾血流速度变缓、肾血量9减少中有重要作用。430GRP与ET大量实验证明，CGRP其有捎抗ET的缋血管活性的作用T2”。含CGRP的神经纤维在血管外膜或平滑肌层交织成网包绕整个M管。CGRP与受体结合厝，激活腺苻酸环纯酶，傻细胞内ATP转变为CAMP，EAMP使无活性静蛋盎激酶PKA激括，催亿细胞内多种蛋白质发生磷酸化反应，包括一些酶蟹自发生磷酸傀，从而|起靶细胞各种生理生纯反应，发挥其生物学效应O“。CGRP与受体缩舍后，述可促进前到环素的释放29帮纲施内外的NACAZ”交换作为第二信傻，促进CA。从施浆摄入至细魏内的膜结构中，使敞浆中的C矿浓度下降。在平滑肌细胞中由于CA2浓度下降，CA2与胞浆中的钙调蛋白解离，导致平滑胍细胞舒张，从而产生舒斑管作蹋。蘸确环索具有抑制炎症、舒张血管、抑制血小扳聚集的作用。这些都加强了CGRP的扩斑管作用。全身所有血管皆有CGRP亳串经纤维分布，ET与CGPGA的相对平衡维持着血管壁的张力，保证组织的盘液供应。育学者洲分剐从离体感觉神经中枢端脊髓切片和外周端肠系膜血管床水平咀及台CGRP神经元脊髓背根神经元水平报导了ET可引起CGRP快速释放增多这一作用部分是通过炎症介质和NO介导的。另外，在肾小球滤过率方面，ET1对入球小动脉及出球小动脉有相似的收缩效应，所以跨毛细敷管静水压没有或有轻微豹下簿，两ET1导致的髯小球系膜细胞收缩则可能是导致肾小球毛细血管超滤系数下降的原因1日。CGRP有抑制肾小球系膜细胞收缡豹作用，能够增加肾小球毛细血管超滤系数，从而政善肾功能。关于CGRP接抗ET豹生物学效应的机制，国内学者通过对WISTAR丈鼠在体慢性血液动力学实验及离体心脏灌流，观察HACGRP对EL“I的升压作用的影嫡及14NCGRP对ET|灌流所致的离体丈鼠心艟损伤的影晌。结果显示H10一指标都能被CGRP明显改善，此研究提取CGRP作用后的及对照组犬鼠的心肌细胞膜，利用放射标记的ETI观察了ETI与心肌细胞膜的最大结合率，结果表明HDCGRP能下调ETL结合位点的密度而不影响“ET1与受体的亲和力。遮一结果说明ET受体密度的下调参与了或至少部分参与了CGRP拮抗ET的生物学效应。CGRP除拮抗ET的斑管收缩效应外，还对血管内皮细胞缺氧损伤具有保护作用，可降低细艟瓣膜流动性及细胞膜豹通透性，减少纲胞内G”缺失，具有膜稳定作用。”。44CGRP与糖尿病鬻病441糖尿瘸肾病肾脏血流动力学的改变与CGRP糖尿瘸对肾脏盘流动力学的影响包括两个方面一是全身高血压的影响另一方面是肾内血流动力学的改变。肾内血流动力学的改变直接参与了DN的发生面肾小球商滤过则在其中起关键作用。在糖尿瘸的早期就可以出现肾小球高滤过，有10一17早期糖尿病患者的肾小球滤过率增加。糖尿病肾瘸肾小球滤过率增加的主要原因是由于肾疮血管阻力，尤其是入球小动脉和出球小动脉隘力降低，使单个肾单位血浆流量增加。出于与肾小球出球小动脉相比其入球小动脉的阻力下降更为明显从而使肾小球滤过压增加，出现肾小球内赢滤过现象，即所谓“高灌注、高压力、高滤过”。肾小球毛细血管压的升高是导致糖尿瘸肾病组织损伤的关键。糖尿病肾病血流动力学改变的形成是多因素综合作用的结果，涉及到捃代谢素乱、血管活性物质的释放以及血管自身反应性等诸多因素。如前所述糖尿病状态下肾小球高滤过形成的主娶因素之一是入球小动脉阻力下降较出球小动脉下降得更为明显，此现象的发生与体内胰岛素RI不足有关“。系膜细胞上寄RI受体，RI的作用能够使入球小动脉收缩。在RI缺乏的情况下会出现入球小动脉的过度松弛。糖尿病肾病一旦出现疆恩蛋白尿看，高血压就成为肾销避展的主要因素。离血压的发生是多瑚索的。其中一个重要因素可能是钠满留。糖尿病患者体内肾素一血管紧张素一醛固酮系统活性增加，更加麓了体内的水钠潴留，使血压升高。国外学者通过肾血管牲高血压小鼠模型实验，证明了商血压对体内。OGRP的影响“。此实验通过央闭小鼠单侧肾动脉，造成小鼠体内血压升高。夹闭小鼠单侧肾动脉10天后，收缩压明显升高，测定血浆CGRP浓度和脊髓背根CGRPMRNA水平及肠系膜CGRP免疫反盘纤维密度结果显示血浆CGRP浓度明显升高，脊髓背碾ACGRPMRNA水平表达明显增加，肠系膜CGRP免疫反应纤维密度显著增高。辣椒素，对具有CGRP免疫反藏活性的无髓鞘传入神经纤维有选择性毒性作用，它可选择性作用予辣椒素敏感的C一感觉神经永梢，选择性耗竭感觉神经释放的递质SP、CGRP、VIP及NPY等多种感觉神经肽。辣椒素的作用具有浓度和剂量依赖性。此实验初次注入一定剂量的辣椒素结果显示可抑制脊髓背根ACGRPMRNA水平表达，但并不能使血浆CGRP浓度下降再次注入相同剂量的辣椒素才能使血浆CGRP浓度下降。这些结果表明肾血管彀离血压小鼠体内辣椒素敏感感觉神经增加起到一种补偿性抑制作用，部分抵消血压的升高。DN患者体内CGRP豹含量增加，可能是机体对血压拜高的一争争代偿反应”。442OE，RP与肾素一血管紧张素系统肾索一血管紧张素系统能促进CGRP的释放。”。有研究显示DN患者血浆斑管紧张素转换酶ACE水平显著高于糖尿病无臀病患者，且随着DN加重，血浆ACE水平迓渐升高侣9。ACE是一种肽链端解酶，通过催化血管紧张素I转化为血管紧张紊IL以及灭活缓激聩来调节全身及肾脏血渡循环。洲虑者体内由予ACE水平升高，导致血管紧张素II的产生增加。肾素血管紧张素LI系统活性增加。国外有研究发现蹦大鼠血管紧张素转换酶在肾小管细胞和闷质细胞豹免疫耐受性增加，DM大鼠肾组织中血管紧张素II水平明监升高，肾组织中血管紧张索1受体裘达亦明显增加。临床及实验研究均显示台理应用ACE抑制剂能有效预防DN的发生及发展“；。由于删患者体内血管紧张紊IL水平升高，能促进更多的CGRF释放。图外亦有研究发现CGRP能与肾索一血管紧张素系统相互作用，抑肯I醛固酮的释教。443CGRP与炎症介质及代谢性酸中毒12国内学者在血管水平上证明了些常见炎症介质如前列腺索、缓激肽以及低渊、商乳酸、高张液等环境因素可矗接刺激含CGRP的神经兴奋，引起CGRP的释放增加“。乳酸水平增商类似组织酸中毒可加强上述炎症介质和低洲引起的CGIIP释放增加”，国内学者芏宪等人利用大鼠脊髓切片作为组级模型，通过不鞫低PH液及乳酸浓度来测定CGRP的释放，结果显示低PH鞫乳酸皆能够使CGRP的释放增多，二者联合能引起更多的CGRP释放。国外学者通过酶免方法测定小鼠背部皮肤CGRP的释放，指也炎症夼质缓激肽、5一羟色氨、组胺、前列腺桑能直接通过疼瘸刺激的传入蟹致神经腿的释放，缓激肢能引起CGRP释放增加，单独的S一羟色氨、组胺、前列腺索对CGRP的释放笼明显影响，但它们能够促使缓激肽引起的CGRP释放明照增加”。糖尿病肾病随病情进展，肾功能损害逐渐加墓，血胍酐、尿素氮升高，体内代谢废物潴窿，代谢性酸中毒出现，疥、痫等皮肤化脓性感染常见，有时爱复发生，可G起败血症或脓毒血症，以上因素皆可使体内的炎症介质释放增加，以及体内的低PH环境皆可刺激黪觉神经纤维释放CGRP增多。4。4。4CGRP的降解体外实验已证明CGRP可以在肝、肺、肾组织中降瓣。肾脏是外源性CGRP的主要作用部位和影响其清豫的部位“”。糖尿病肾病随蓉病情的发鼹，肾脏功能逐渐减退，对体内各种物质的代谢能力逐渐降低，CGRP在肾脏中的代谢减少，因此血浆中的含嚣辅肾脏功能减退丽运濒升高。我们的研究结果袭明2型糖碌病病人血浆中CGRP的含量随着痛情的加重两逐渐增高，在糖尿病瞥病尿毒症阶段舍堂这最高。糖尿病病入随着病情的发展。全身小血管和馓血管的病变逐辩加重。血管内皮损伤亦随之加蕙，血管内皮细巍产生的殴逐渐增加。同时由于AGE增加导致肾脏近端肾小管内皮细胞台成ET一1明最增多肾脏局部雌一L自辱浓度升高。由于肾脏悬CGRP的主簧靶器官之一，肾血管床中存在丰富的CGRP受体，作为ET的拈抗剂，肾脏局部CGRP的含蠡亦井高以此对抗ET1的缩血管作用，增加肾脏的血液供应，改善肾脏微循环。血浆中X；RP的含爨升高可增加机体其他醚器的血液供应。糖尿134讨论病肾病患者体内肾素一血管紧张素系统活性增加，促进了高血压的发展。而血管紧张素】L能刺激CGRP豹舍成和释救，这在一定程度上缓解了高血压的进展。醛固酮具有保钠排钾的作用，导致水钠潲留，这是继发性糖尿病肾病商血压的主要原因之一而CGRP具有抑制醛固酮释放豹作用，这对于拮抗继发性辅屎病臀病商血压具有熏要意义。随着糖屎痛肾脏功能的减退，肾脏在清豫体内各种物质方丽的作用降低，从而导致血浆中CGRP的降解减少，含量相应增细。以上这些服西导致血浆孛CGRP的含量增加都是机体在病理条件下的一种代偿作用，对于处于I恼床期和屎毒症期阶段的糖尿病患者具有更加重要的意义，CGRP通过与肾脏特异性豹受傣结合而产生强大的舒张肾血暂作用，进藤增加肾有效血流量，这对予毛细血管腔逐渐变窄的肾小球，对于失代偿阶段的肾功能都是一种极其重要的代偿作用。45小结1随着糖尿病病情的发展CGRP在各实验组的禽量有明显逐渐增加的趋势。2CGRP与内生肌酐清除率二者呈明显负相关。3CGRP在糖尿病肾病中的作用机制可能为1通过对摅ET1的血管收缩教应，增拍肾脏的血液供应改善肾脏的微循环。2通过其强大的扩血管作用，对抗继发的糖尿瘸肾病高血压。3通过抑制醛固酮的分泌，调节机体的水、电解质的代谢。CGRP确切作用机制还不明确，今后还需要通过对CGRP的进一步研究，明确其在DN发曼三发展过程中韵作用，为将来临康治疗提供新的依据。14参考文献参考文献L潘良玉，陆菊明田慧，等旨都钢铁公司成人糖尿病患病率的调啬中华医学杂志，1995754094162RITZ，STEFANSMADIABETICIATYPEILNEPHROPATHYDIABETESAMERICANOFDISEASE，199627167JOURNALKIDNEYIN3RENELDISEASELILSENDSTAGE2904A1PRODUCTIONCFANOVELROSENFELD弧MERMODJJ，AMARASG，ETENCOOLEDTHECALCITONINVIARNANEUROPEPTIDEBYGENETISSUESPECIFICPROCESSINGNATURE，198330459221291355BRAINSD，HUGHE8SR。CALCITONINGENERELATEDPEPTIDEIS8VASODILATOR口】NATURE，1995306313POTENT0WIMALAWANSACALCITONLNSJ。AMYLINGENERELATEDPEPTIDEADRENOMEDULLINAREVCALCITONINANDPEPTIDESUPERFAMILYCRITNEUROBI011997LL231672397樊必夫，季乃军，梅益斌，等慢性心力衰竭患者血清肾上稼髓质素测定及其临床意义放射免疫学杂志，2002153138A1THEROLEOFTHE8RUBISTEIEC，FLETCHERDR，SHULKESA，ETKIDNEYNZINTHECLEARANCEOFCALCITONINGENERELATEDPEPTIDEJAUSTJSURG，19946442662689VILLARREALA1CALCITONINDREAMSG，FREEMANK，ETGENE。RELATEDANDOPIONEPHROLPEPTIDEKIDNEYJCURRZAIDIFORCALCITONIN10M，DATTAH，BEVISPJKIDNEYATARGETORGANPEPTIDEEXPPHYSI011990752732GENERELATEDIIALRENALVILLAREALD，FREEMANRH，VERBURYKM，ETHEMODYNAMICINFUSIONOFCALCITONINRESPONSETOINTRARENALGENERELATEDPEPTIDE15INDOGSPEPTIDES，1988，91129113L12KURTZA，MUTTR，BOMW。ETA1THERENALISAMESANGIUMTARGETFORCALCITONINGENERELATEDPEPTIDEKIDNEYINT，19893622222513KROLEWSKIAS。GENETICSOFDIABETICFORANDMONETMAJORGENEEFFECTSKIDNEYINT，1999551582159614DISCORDANTROGUSJJKROLEWSKIASUSINGSIBPAIRSTOMAPLOCIFORTRAITSWITHRECURRENCEQUALITATIVEHIGHSIBLINGRISKA糯HUMGENET，1996591376138115FARONATOA1PP。MAIOLIM，TONOLOG，ETCLUSTERINGOFALBUMINEXCRETIONRATEABNORMALITIESINCAUCASIANWITHNIDDMTHEPATIENTSNIDDMITALYNEPHROPATHYSTUDY16刘章锁。全身疾病与肾损害。河南，河南医科大学出版社1998464717戴瑞鸿，林果为内科学新理论与新技术上海科技教育出版社1996；25225318王金粜，刘志红糖尿病肾脏损害能否被控制和逆转一强化胰岛素治疗及移植现状肾脏病与透析肾移植杂志，19998325826019DEUTHERLONRADW。FRANKSHENLET，ETA1INVITROPREPAREDADVANCEDANDTHEOFGLYCATIONENDPRODUCTSMODULATINGPOTENTIALTHEIR10WMOLECULARINIRPTCARATWEIGHTDEGRADATIONPRODUCTSDERIREDCELLLINECELLMOLPROXIMALTUBULARKIDNEYEPITHELIALBIOLNOIPUBOL18796SYLEGRAND，200147ONLINE20陈玉冲，罗群糖康病肾病患者血浆内皮素变化右江民族医学院学报，20002237卜732L丁鹤林傅祖植接近正常扮血糖对糖尿病微血管并发瘟的影响国外医学内科学分册1995229373375TSCHIRHARTAL。ENDOTHELINS22EJ，DRIJFHOUT婵，PELTONYR，ETFUNCTIONALANDSTUDIESINAUTORADIOGRAPHICGUINEAPIGTRACHEAJ16LPHARMACOLEXPTHOR1991JUL1258”381723王振义，李家增，既长耿，等血拴与止血一基础理论与临床第2舨。上海上海科学技术出版社1996；14514824王海燕肾脏病学M3第2版北京人民卫生出版社，199810310425曾正培，唐丹，孙梅励，等舷浆内皮素与糖尿病斑管病变的关系中华内科杂志，199433746746926王秋闫，刈国良，王誊义，等。早期糖屎病蟹病患者血浆肉皮素、心钠素、血管紧张索的变化意义J中华实用内科杂志，1998181272172227谭教勇，张继峰，牟大地，等箨钙素基因相关驮拮抗内皮素生物效应研究中国病理生理学杂志，1993；9565365728A1CALCITONINSUPOWITSC，ZHAOH，HALLMANDM，OTGENERELATEDISAOFINPEPTIDEDEPRESSORDEXYCORTICOSTERONESALTBYPERTENSIDNTHERATHYPERTENS，199729494529HATADAK，UCHIBA乩ETN。OKAJIMALEVELOFISINDUCEDINCREASEINTHEHEPATICMAINLYPROSTACYCLINOFTIREINMEDIATEDBYACTIVATIONCAPSAICINSENSISENSORYNEURONSLABC1INMED2002RATSJHPCMEEHANISMOFCGRPINDUEEDSHEYKHZADEM，BERGNYHORGRELAXATIONINRATINTRAMURALCORONARYARTERIESBRJMAR132612354631NITRICOXIDEANDWANGX，WUZ，TANGY，ETAL，RAPIDPROSTAGLANDINSRELEASEOFCALCITONINDEPENDENTGENERELATEDINBYENDOTEXINRATMESENTERICARTERLABEDBRJPHARMACOT，19961182164217032BARDANDRENELKF。MARRAYJJMESANGIALCELL，GLOMERULARVASCULARTOENDOTHELININTHERATCHININVEST。RESPONSEKIDNEYJJ19988333617袭耋茎墼一一33谭敦勇降钙素基困相关肽拮抗内皮索生物学效应与内皮素结合位点下调心肺血管病杂志，2000；191565734RENA1IMEMBRANEYS，MATGWANGHB，ETFLUIDITYINCHANGESEELISSEVEFANDMYOCARDIALFOILOWINGHYPOXIASIMULATEDREPERFUSIONANDEFFECTSOFCALCITONIESCIGENERELATEDPEPTIDEJ，MEDRES，1993；211762762835刘志魏，黎磊石糖羼病肾病发病机理中华肾脏病杂志，1999152120124A1AN36OENGPY。YETZHUH。，ETINCREASEJNTHEANDSYNTHESISRELEASEOFCALCITONININGENERELATEDPEPTIDEHYPERTENSIRERATS，REGULPENT2003JUL15114231758237支红，JE乃尊，黄瑞衡，等耱藤瘸大血管病变与血浆内皮素、降钙素基因相关肽的关系研究广西医科大学学报，1999；16321321438A。ETEFFECTOFPORTALUPPIVERGNANIL，MARGUTTIATMODULATORYTHERENJOILTHE1EVELSNNANGIOTENSIASYSTEMPLASMAOFCALCITONIINNORMALINAN，CLINENDOCRINOLGENERELATEDPEPTIDEYETAB，1993SEP；7738162039郭新意，任桂卿，许笑梅内皮索和血管紧张素转换酶与耱屎病肾病的关系中毽现代医学杂志，2000；10743243440GIIBERTRLSONBERKAA1THERE，KRUMH，WIIKIJ，ETRENINANGIOTENSINANDTHEOFDIABETBSSYSTEMLONGTERMCOMPLICATIONSANDTHERAPEUTIOCONSIDERATIONSDIABETMED2003PATHEPHYSIOLOGICALAUG2086072141MEZZANOA1S，PROGUETTA，BURGOS雌，ETACTIVATIONANDINTERSTITIALINFLAMMATIONINHUMANDIABETICSYSTEMNEPHROPATBY，KIDNEYINTSUPPL，2003OCT86S647042MAZZOCCHIGADRENOMEDUL1INANDG，REBUFFATP，GOTTARDO18妻耋塞整CALCITONINGENERELATEDPEPTIDEINHIBITALDOSTERONESECRETIONINVI8ACOLONRATS，ACTING43吴中欣韩启德，自燕等机体内环境理化因素对降钙素基因相关肽释放的影响生理学报，19954757357944吴中欣，唐跃明，韩启德，等炎症介质对离体大鼠肠系膜动脉降钙素基因相关肽释放的影响生理学报，19964857157645X，FISCUSRRLACTIOACIDLOWWANGPOTENTIATESBR8DYKININANDRELEASEOFC6RPFROMRATCORDSLJCESMPHINDUCEDSOLNALJPHYSIOL，1997273E92一E9846AVERHECKBREEHPWINTERACTIONSOFMEDIATORSINFLMMATORYOFCALCITONINPSTIMULATINGRELEASEGENERELATEDPEPTIDE，SUBSTANCEANDISOLATEDRATPROSTAGLANDINE2FROMMARJ40341623OF47RUBINSTEINC，FLETCHERDR，SHULKESA，ETA1THEROLETHEINTHECLEARANCEOFCALCITONINGENEREIATEDKIDNEYPEPTIDECGRPAUSTNZJSURG1994APR644266919致谢致澍在论文结束乏际，谨向指导老师RQ丽被教授致以衷心感谢，感谢刘丽秋教授在论文选题、课题研究及撰写过程中给予的无私帮助。刘藤秋教授以其严谨的治学态度、丰富的知识经验、诲人不倦的教学方法，对学生言传身教、热忱帮勘，使学生颛利地完成了课题研究。在谍越研究过程中，学生不仅扶老师鄢里学习到了一定的专业瑾论知识，髓且对老师执着追求、认真受责、襟怀坦荡的处世态度有所镶悟，对学生以癌的工作学习将有很大帮助，学生受益非浅。同时衷心感谢青医酣院放射免疫中心李褥升主任在实验室测定数据过程中的大力支持和帮助。最后真诚感谢研究生齄全体老师的辛勤培养。OO综述综述降钙素基因相关肽与糖尿瘸肾病新发现的一种生物活性多肽，在体内主要分布于中枢和外周神经系统及某些器官组织中。是目前已知体内最强的舒血管多驮，参与许多重要功能的调节在许多疾病的发病中有重器意义。糖尿病是影响人民健康和生命的常见病。近年来髓着人民生活水平提高，糖尿病发病率日益增高，糖擐瘸肾病DN是糖尿病的主要并发症，最终进展为尿毒症。近年来对CGRP在心脑血管疾病中的作用研究较多，对CGRP在DN中的作用研究较少。且国内外文献报导不一。本文就CGRP的特点及近几年有关CGRP与洲的相关报导综述如下。1CGRP特点11降钙素基因肽超家族基因肽超家族。CT与CGRP来自一个共同的基因，它们的基园由2800个碱基对组成，其中有5个内含子和6个外显子。它们在不同的组织中进行基因重组CTCGRP基因在甲状腺E细胞可转录、袭达成CT，面在卒申经组织中可以转显子和5个内含子组成。CT与CGRP虽然来自一个共同的基因但其结构、分布和功能都不相同。CT燕含有一个二硫键的三十二敲，分子量为3400。CT的生物学作用主要是降低血钙和血磷，其主要靶器官是骨对肾脏也有一定的作用。甜摔制破骨细臆的潘动，减弱溶骨过程增强戒骨过程，使嚣组织释放的钙磷减少，钙磷的沉积增加因而血钙和血磷含量下降。CT能抑制肾小管对21综述钙、磷、钠、氯的重吸收，使这些离子从尿中捧出增多。AMYLIN在37个氮基酸的组成中只有8个氨蒸酸与CGRP不同，它主要分布予胰岛8细胞，与2型糖屎病的发病机制有关。AMYLIN早期政变璇岛细胞对血糖帮食物的生理反应性，在疾病的后期，通过大量沉积子胰腺组织，导致B细胞的破坏同时它能握离机体的胰岛素抵抗性，数AMYLIN在糖尿崩发病中具有重要意义。分稚予肾上腺髓质、鹜脏、心肺、血管蠹皮细胞、血管平滑肌等器官E的一种循环激素池是由血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和心肌分泌的一种局部激素。它可以自分泌、旁分泌和胞内分泌的方式发挥其作用。血液中的ADRENOMEDULLIN来源于血管内皮细胞和血管平滑肌细胞，其生物学散应可能与下列因素相关”透过与靶细胞膜上的特异性受体结合使细胞内CAMP拜高脉，增加肾小球滤过率，抑制远蠡小管钠的熏吸收，具有缀强的促钠排泄、利屎功挠。排钠聱屎作用似乎与心铀素、醛淘酮无关。但也有学者观察到激心肌内的CAMP生成。抑制心肌肥厚，可L；L预防和或延缓自发性高血难大鼠心肌肥厚的发生、发展。CGRP是由37个氦基酸组成含有一对二硫键的多前体，储存于分泌颗粒蠹，释放时酶解成CGRP，发挥其生物学臻用。人拘CGRP有Q和8穗丰孛分子型式，其氨基酸的组或和序列基本相同，仅在第3、第22和第25位的氮基酸不同A为天门冬氮酸、缬氨酸和天门冬酰胺为天门冬酰胺、蛋氨酸和丝氨酸。近年来研究发现CGRP的基因亦有N和B两种分别表达如口和一CGRP，它们都是单拷贝基医，均定位在第LL号染色体韵短臂上。CGRP血浆半囊期为9分钟，它可被肽链内切酶分解为卜16和1737两个片22综述段。表明内切酶抑制剂可增强CGRP的生物学效应。2CGRP的分布及受体CGRP作为一个神经肽广泛分布于中枢及外周神经系统中。在中枢神经系统CGRP主要分布于杏仁核、尾核、脊摊背角和三叉神经束。垂体、下丘脑、延髓和海马也有定的分布。CGRP的含量在脊髓中较高，在大脑皮层其含量则极低，但其受体密度高，均有较多的特异性结合位点。CGRP亦存在于心血管系统中，心血管系统广泛分布丰富的CGRP神经纤维，CGRP几乎存在予赝有的血管床神经纤维内，其分布骘血管紧密联系，在皿管中CGRP的含量明显高于心脏。CGRP的神经纤维在血管外膜或平滑肌层交织成网包绕照个盘管。在心脏CGRP神经纤维一般沿心肌纤维或冠状动脉平行走向，也可交织成网形成神经丛。心血管系统CGRP的含量不仅高，其受体分布也非常广泛，心房、心室、冠脉、肠系膜上动脉和股动弥等均含有CGRP受体。在呼吸系统已证明气管、支气管和肺泡都含有CGRP。含有CGRP的神经纤维一般分布在支气管、肺内啦管和结缔组织内，肺沲上皮纲臆亦含有CGRP。在消化系统中CGRP斡含量以胃和直肠最高，依次是结肠、肝、胰、胆等器官。CGRP的神经纤维主要分布于环行肌层和纵行肌层，在胃和食管主要分布予黏膜和黏膜下及肌层。其中以环章亍肌层的分布尤为密集，并沿胍柬平行走向。在麦氏神经丛、黏膜下神经丛和神经节中CGRP的含量亦非常丰富。肾脏是CGRP的主要靶器官之一，肾血管床中存柱丰富的CGRP受体，CGRP通过与这些受体结合丽产生强大的舒张肾血管作用。13CGRP生物学效应CGRP与受体结台嚣，可潋澈活腺苷酸环化酶，促使细胞盎CAMP水平升高发挥其生物学效应”。它还可以促进前列环索的释放”和细胞内外的钠钙交换”。CGRP与受体结合詹。还可促进前列环紊的释放和细胞内外的NAC岔交为第二信使，促进CR从胞浆摄入至细胞内的膜结构中使胞浆中的C矿浓度下降。在平滑肌缍驻中出于C8浓度下降，CA”与胞浆中豹钙调蛋自解离，导致平滑肌细胞舒张，从而产生舒血管作用。CGRP作为一个舒血管物质和神经递质23综述在体内作用广泛是一种多功能生理调节肽。CGRP是冈前已知的最强的扩血管物质。NOZAKI“O实验证明CGRP血管舒张反应呈现不同程瘦的齐J一效依赖性，邵适当加大CGRP注入剂量时反应增强。浓度低则效应缓慢，但持续时闻长，其作用强于SP、VTP等其他血管扩张介质。CGRP舒张脑血管的作用并不完全依赖斑管内皮的完装性，去除内皮细匏其好张作用板然存在，CGRP对粥样硬化的动脉仍有扩张作用，目前认为机制可能是“”1CGRP对血管的赢接作用；2通过激活斑管平滑飘细胞上的K“ATP通道来实现3细胞内第二信使CAMP介导作用CAMP升高程度与血管扩张反应强弱密切相关4可能与CGRP能维持纲胞内E矿稳定，降低壤施膜CA2“透透性有关。绘太鼠脑两注射CGRP使血压升高，而静脉注射CG胂使血珏降低。显示CGRP对婶L枢神经系统的活动有多方碾的调节作用。心房心宣和血管存在有CGRP的特异性受体。其中以心房的密度鳆离。