第七章芳香烃

1、第七章第七章 芳香烃及其代谢产物的测定芳香烃及其代谢产物的测定主要内容主要内容苯苯甲苯和二甲苯甲苯和二甲苯乙苯和苯乙烯乙苯和苯乙烯多环芳烃多环芳烃 理化性质理化性质 代谢和生物监测指标代谢和生物监测指标 样本采集与保存样本采集与保存 测定方法测定方法第一节第一节 苯苯l C6H6 芬芳气味 无色透明液体l煤焦油分馏或石油裂解产物 极易挥发l微溶于水 与有机溶剂互溶l遇热易燃烧、爆炸l能与氧化剂发生剧烈反应l不能与己硼烷共存进入人体的苯原型由呼吸道排出原型贮存体内各组织肝脏代谢（CYP）肝微粒体上的细胞色素P45050%40%10%苯的体内代谢产物苯的体内代谢产物l体内(组织器官)主要代谢产物：

2、 反,反-黏糠酸(t,t-MA)、苯巯基尿酸l苯蒸汽体内的代谢产物：苯蒸汽体内的代谢产物： 苯酚，随尿排出 职业苯接触生物标志物l己二烯二酸 （反，反-黏糠酸，t,t-MA）l苯巯基尿酸（S-PMA）生物监测指标l尿中的苯酚的排出量 尿酚10mg/L,有苯的接触l呼出气体中苯的含量样品的采集与保存样品的采集与保存 苯接触者呼气中苯含量和尿液中苯酚含量显著增高l呼出气呼出气 气样需浓缩 常用Tenax-GC、活性炭 采集接触苯后次日班前终末呼出气 打开采气管活塞， 一端含入口中 ，深呼气后关闭活塞 室温运输保存 6小时之内稳定样品的采集与保存样品的采集与保存l尿样检测己二烯二酸和苯巯基尿酸宜取班

3、后尿检测苯酚则宜取班末尿室温运输 4保存2周气相色谱测定呼出气中苯气相色谱测定呼出气中苯l原理 终末呼出气样品收集在50ml采气管内，然后用氮气将样品吹入活性炭内，使样品中的苯吸附在活性炭上。280热解吸，氮气将释放出的苯带入FFAP柱中，火焰离子化检测器检测，以保留时间稳定性，峰高或峰面积定量。l样品处理 将采气管放置37恒温箱2小时后取出与活性炭管相连，用100ml注射器推送氮气，使苯吸附于活性炭气相色谱测定呼出气中苯气相色谱测定呼出气中苯l注意事项1 采样要在无污染的室内进行2 回收率低于75%时坚持更换活性炭3 活性炭要按照热解吸条件活化以除去已吸附的有机物HPLC测定黏糠酸和苯巯基尿

4、酸测定黏糠酸和苯巯基尿酸l原理 尿样中的黏糠酸和苯巯基尿酸经强阴离子固相萃取小柱萃取，10%乙酸水溶液洗脱，再用4ml乙酸乙酯萃取，氮气吹干流动相后后重溶残留物用于色谱进样，经C18色谱柱分离，紫外检测器检测，以保留时间定性，内标法标准曲线法定量l样品处理 取1ml尿样于离心管中，加入香草酸内标溶液，混匀后加到预先分别用3ml甲醇、6ml水活化过的强阴离子固相萃取小柱上，以0.5ml/min的速度通过小柱后分别以3ml水、3ml 5mmol/l的磷酸水溶液、3ml 0.5%乙酸水溶液淋洗小柱，再以4ml 10%的乙酸水溶液洗脱黏糠酸和苯巯基尿酸。尿中苯酚的测定尿中苯酚的测定l气相色谱法1 原理

5、 尿样经加热酸解，使结合态的酚水解，乙醚萃取，经色谱柱将尿中酚与人体内正常代谢物对甲酚分离，火焰离子化测器检测，以保留时间定性，标准曲线法定量2 样品处理 取5ml尿液于具塞试管中，加入1ml盐酸，摇匀，加塞。90水浴1h，冷却至室温，加水稀释至10ml。加3ml乙醚震摇1min，静置分层，补足乙醚至3ml,乙醚层供测定尿中苯酚的测定尿中苯酚的测定l4-氨基安替比林分光光度法1 原理 尿液在酸性条件下水解，游离的酚随水蒸气蒸出，碱性条件下在氧化剂铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应，生产红色化合物，比色定量2 样品处理与测定 取5ml尿液于蒸馏瓶中，加入1.5mlHCl，摇匀后蒸馏，收集50

6、ml蒸馏液，取10ml于试管中依次加入氨水、 4-氨基安替比林、铁氰化钾各1ml并摇匀。于520nm下测定吸光度，标准曲线法定量。第二节第二节 甲苯和二甲苯甲苯和二甲苯l均为无色透明 芳香气味 易挥发液体l均难溶于水 易溶于有机溶剂l甲苯 C6H5CH3 煤焦油分馏或石油裂解产物 体内代谢产物为马尿酸 无色结晶l二甲苯 C6H4(CH3)2 邻、间、对三种异构体 焦煤油轻油部分分馏或催化重整轻汽油分馏 代谢产物甲基马尿酸代谢和生物监测指标代谢和生物监测指标l甲苯和二甲苯通常用来制作染料，塑料，人造香精和合成纤维l常温下以蒸汽状态进入人体，液态可经消化道和皮肤吸收l对脂肪和类脂质的组织亲和力强l

7、属于低毒类有机化合物，大剂量时对中枢神经系统有抑制作用，刺激皮肤黏膜进入人体的甲苯原型由呼吸道排出原型由尿液排出体内代谢约20%79%1%马尿酸：生物监测指标进入人体的二甲苯原型由呼吸道排出肝脏代谢5%95%甲基马尿酸：生物监测指标样品的采集与保存样品的采集与保存l呼气 班前或班后采集终末呼出气气相色谱测定呼出气中甲苯和二甲苯气相色谱测定呼出气中甲苯和二甲苯l原理 用Tenax GC吸附管浓缩采样 ，分析时将吸附管于250下解吸，由氮气直接载入色谱柱分离，火焰离子化检测器检测，保留时间定性，标准曲线法定量。 低浓度则需增加制冷浓缩程序：解吸后经-30冷凝浓缩，再在300下挥发HPLC测定马尿酸

8、和甲基马尿酸测定马尿酸和甲基马尿酸l原理 尿液经盐酸酸化后，马尿酸和甲基马尿酸用乙酸乙酯萃取，去适量挥发干，残渣用水溶解后进样，经反向C18色谱柱分离，紫外检测器检测，以保留时间定性，标准曲线法定量。本法最低检测浓度： 马尿酸：0.015mg/L 甲基马尿酸：0.03mg/L l样品处理 取1ml尿样于10ml离心管中，加入0.1ml盐酸溶液、0.3g氯化钠和4ml乙酸乙酯，漩涡混匀1min，1000r/min离心5min。取0.4ml于具塞试管中70水浴或氮气挥干后，加水溶解作为测试液。第三节第三节 乙苯和苯乙烯乙苯和苯乙烯l乙苯 C2H5C6H5 无色透明 甜味 芳香味 易挥发性液体 难溶

9、于水 易溶于有机溶剂 主要代谢产物为苯乙酸醇 白色结晶或粉末l苯乙烯 无色至淡黄色 芳香气味 油状液体 极微溶于水 与乙醇乙醚混溶 代谢产物有苯乙醇酸和苯乙醛酸气相色谱测定呼出气中乙苯和苯乙烯气相色谱测定呼出气中乙苯和苯乙烯l原理 用Tenax吸附管或者活性炭管采集呼气中的乙苯，热解吸后进样。经FFAP柱分离后，用火焰离子化检测器检测。以保留时间定性，峰高或峰面积定量。 本法检测限 乙苯：2X10-3g 苯乙烯：5X10-3gHPLC测定尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸测定尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸l原理 尿样经盐酸酸化后，以乙酸乙酯萃取苯乙醇酸和苯乙醛酸，离心后取上层有机相氮气吹干，色谱流动相重溶残留物，

10、C18色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，内标法峰面积比定量。本法检测限 苯乙醇酸：1.2mg/L 苯乙醛酸：2.5mg/Ll内标物的要求：l1. 所分析的样品中要不含有；l2. 要和所有组分都能分开（就是分析时不存在干扰）l3. 保留时间要和目标组分较为接近l由于内标物选择时较为困难，严重影响内标法的应用！ 第四节第四节 多环芳烃（多环芳烃（PAHs）l指分子中含有两个及两个以上苯环的碳氢化合物，是一类典型的持久性有机污染物l是煤、石油、木材、烟草、有机高分子化合物等不完全燃烧时产生的l有部分具有致癌性，常见四到六环稠环化合物如苯并a芘C20H12：浅黄色针状结晶 五个苯环l代谢产物：

11、1-羟基芘 、3-羟基苯并a芘样品的采集与保存样品的采集与保存l聚乙烯材质冻存管收集班后尿，避光-4，最好当日处理分析l-20保存一个月以内尿中尿中1-羟基芘的测定羟基芘的测定l（一）高效液相色谱法1 原理 尿液用-葡萄糖苷酸酶将尿液中结合态的1-羟基芘水解成游离态后，以C18固相萃取小柱萃取，甲醇洗脱，反向色谱柱分离，荧光检测器检测，保留时间定性，内标标准曲线法定量。 取尿液2ml时，此法最低检测浓度：0.02g/L尿中尿中1-羟基芘的测定羟基芘的测定l（二）同步荧光测定法1 原理 尿液经-葡萄糖苷酸酶的乙酸-乙酸钠缓冲液水解，正己烷萃取，NaOH反萃取，水相萃取液进行同步荧光光谱扫描，315nm,405nm，起始扫描，峰值在440nm，用窄基线法进行定量测定。外标法计算样品中的含量尿中尿中3-羟基苯并羟基苯并a芘的测定芘的测定l（一）高效液相色谱法1 原理 尿样经