腺苷脱氨酶ADA测定

1、腺苷脱氨酶ADA测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果 的准确。2原理ADA腺苷+HO肌苷+NH3PNP肌苷+Pi次黄嘌呤+1-磷酸核糖XOD次黄嘌呤+2 H42O尿酸+2 H2QPODH 2C2 +4-AAP+EHSPT4H 2O+苯醌类3标本要求3.1使用新鲜血清，不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.3 8h内不能及时测定血清可存放于2-8 °C冰箱保存,3天后测定的血清置-15 °C- -20 °C冰冻保存，但冰冻血清只能复融一次.3.4 严重溶血或脂血的标本不能作测定 .4 试剂4.1试剂：上海复星长征医学科学有限公司A

2、DA试剂盒（沪食药监械（准）字 2014 第 2400166 号 YZB/ 沪 1546-40-2014 ）4.1.1 试剂组成试剂 1 60 ml, 试剂主要成分如下 :Tris HCL缓冲液（PH8.0）50.0mmol/L XO 0.2u/ml4-AAP 2.0mmol/LPOD 0.6u/mlPNP 0.1u/mlNaN3 0.2g/L试剂 2 60 ml, 试剂主要成分如下 :Tris HCL缓冲液（PH4.0）50.0mmol/L腺苷EHSPT2.0 mmol/L10.0mmol/L4.1.2 试剂准备： 试剂为即用式4.1.3试剂稳定性与贮存：28 C避光、密封的储存条件下，试剂

3、（盒）自生产之日起有效期为 12 个月。试剂 1 与试剂2启用后，在210C避光的条件下可稳定 20天。4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.2 校准品：4.2.1 采用以检测用水为空白的方式进行校准。4.2.2 校准及校准频次的要求： 正常情况下，应每周至少对 测定进行一次校准。当发生下列情况时（如：使用的试剂批 号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行 更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等） 应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。5 仪器AU2700 生化分析仪，罗氏 P800

4、 生化分析仪 , 西门子ADVIA-2400 生化分析仪，东芝 TBA-120 生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数： 参见生化检验 AU2700 生化分析仪，罗 氏 P800 生化分析仪 , 西门子 ADVIA-2400 生化分析仪，东芝 TBA-120 生化分析仪项目测定参数。6.4 仪器操作步骤：参见生化检验 AU2700生化分析仪，罗氏P800 生化分析仪 , 西门子 ADVIA-2400 生化分析仪，东芝TBA-120 生化分析仪操作规程。7

5、 质量控制在每一批标本中都应把非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以 2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结 果，以 U/L 报告。9 参考值4-22 u/L(37 C)10 临床意义ADA在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要价值，国内外研究表明，ADA对诊断结核性渗出液的特异性和敏感性明 显优于活检和细菌学法、结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性二者无显著差异，此外， 脑脊液ADA检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的 重要指标，结核性脑膜炎显著增高，病毒性脑炎不增高，颅 内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高。11 操作性能11.1本法的 ADA可报告范围为 0 200 u/L (37C)11.2精密度CVC 5%11.3 准确度 测定值在正常及异常质控范围内12 超出范围结果处理如果超过线性范围用生理盐水 1：1 稀释，结果乘 213 病危报警值的处理：无。14 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。15 参考文献15.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规 程中华人民共和国卫生部医政司编（第四版）15.2 钱士匀主编 . 临床生物化