ZW-1800无菌检验隔离系统再确认方案

1、编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 1 / 22ZW-SV1800ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统型无菌检验隔离系统再确认方案再确认方案拟定人：拟定人： 日日 期：期： 审核人：审核人： 日日 期：期： 日日 期：期： 批准人：批准人： 日日 期：期：编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 2 / 22目录目录一、概述.3二、目的.4三、范围.4四、依据.4五、确认小组成员及职责.5六、确认前准备.51、文件起草及培训.52、文件确认.53、仪器、仪表的确认 .54、文件管理规范.55、风险评估.7七、确认内容.91、ZW-SV1800

2、 型无菌检验隔离系统安装确认.92、ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统运行确认.93、ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统性能确认.11八、偏差分析处理要求.21九、确认结果评价与结论.21十、附件.21编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 3 / 22一、概述一、概述本公司化验室洁净区安装有 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统，该仪器由温州维科生物实验设备有限公司生产。主要用于我司产品等无菌检查相关的检验。ZW-SV1800 无菌检验隔离系统采用屏蔽的双门隔离技术，配置的自动灭菌系统，能对无菌检验隔离系统进行有效灭菌，可创造动态的、持续有效的高洁净度空间；

3、完全隔离的舱体屏障对操作人员提供了安全有效的防护，并将操作人员彻底地从传统的洁净室里解放出来；无需庞大的净化系统支持，从而大大降低运行成本；无菌检验隔离系统内外完全的隔离，可使隔离舱在一般清洁环境中随意移动，创建了一个“可移动的微型实验室” 。隔离舱可广泛应用于药品、生物制品的无菌检查；无菌分装。无菌隔离器主要由舱体、高效过滤器、离心风机、高压风机、手套、灭菌支架、温湿度传感器、压差表、集菌仪、显示屏、PLC 控制系统、软件程序、针式打印机、微差压传感器、报警装置、照明装置及控制部分等组成。主要技术参数： 环境温度：1826 相对湿度：30% 70%安装位置：无菌室 设备编号：QC-09-03

4、电源： AC220V22V/50Hz1Hz 额定功率： 2500W温度分辨率： 0.1 湿度分辨率： 0.1%RH高效过滤器过滤效率：99.995% 小时泄漏率： Q/V0.5%舱内净化级别： A 级（静态） 压差分辨率： 0.1Pa隔离器 内压力控制范围： 1080Pa 物料门直径： 415mm灭菌剂：过氧化氢溶液（30%分析纯）杀灭率：对嗜热脂肪芽孢杆菌的杀灭能力达到6-logZW-SV1800 无菌检验隔离系统工作原理（图 1-1）： 隔离舱在密闭的条件下，除湿系统使舱内形成一个低湿度的环境，通过过氧化氢发生器向舱内注入过氧化氢蒸汽，在一定浓度与时间的条件下进行灭菌，使舱内形成无菌环境。

5、灭菌完成后用带高效过滤器的通风系统将舱内残留过氧化氢蒸汽外排分解，并通过压力保持系统确保舱内维持设定的压力。编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 4 / 22过氧化氢灭菌机理：过氧化氢低温灭菌（VHP） ，是利用过氧化氢在常温下气体状态比液体状态更具杀孢子能力的优点，经生成游离的氢氧基，用于进攻细胞成分，包括脂类、蛋白质和 DNA 组织，达到完全灭菌的要求。 ZW-无菌检验隔离系统工作原理流程图二、二、目的目的1、检查并确认本仪器安装符合使用要求，确保该仪器安装符合标准要求，能正常投入使用。2、检查并确认本仪器运行符合设计要求，检查确认本仪器的运行情况，以确保该仪器能

6、在使用要求范围内正确运行并达到规定的技术指标。3、检查并确认本仪器性能是否符合设计要求，以确定本仪器符合使用要求。三、范围三、范围本方案适用于本公司所使用的 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统的确认。四、四、依据依据中国药典2015版四部；JG/T19-1999层流洁净工作台检验标准 ；ZW-SV1800型无菌检验隔离系统使用说明书。9206无菌检验用隔离系统安装确认指导原则美国手套箱方针AGS-G001-2007GB5226.1-2002机械安全机械电气第1部分：通用技术条件ISO14622-2标准、JB/T20093-2007制药机械行业标准TJ36-79工业企业设计卫生标准五五、确认

7、确认小组成员及职责小组成员及职责姓 名所在部门职务本确认工作中职责密闭舱体温表舱内除湿润H2O2灭菌 过滤通风压力保持实验操作分解 H2O2空气置换编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 5 / 22公司高层质量副总负责组织成员制定确认方案及报告。确认组织协调和技术相关工作，确认方案和报告的批准。质量管理部质量部经理确认小组成员：审核确认方案、确认报告，监督确认的执行情况。质量管理部QC 主管负责确认方案的拟定，负责协调组织相关的确认工作及数据复核，负责报告的拟定。工程部工程部经理负责安装确认相关内容实施。操作人员质量管理部微生物 QC 人员、QA 验证专员负责具体操作

8、，记录填写。六六、确认前准备、确认前准备1、文件起草及培训、文件起草及培训：在 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统确认前应起草文件方案并进行方案的培训。培训记录可填写于附件 1 确认培训记录表中。2、文件确认、文件确认：在 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统确认前应确认所需要的文件资料及存放位置，确认结果填写于附件 2 确认所需文件资料及存放处确认结果表。3、仪器、仪表的确认、仪器、仪表的确认：在 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统确认前应确认所需要仪器仪表的相关信息，确保确认结果准确、可靠。确认结果由操作人员填写于附件 2 仪器仪表确认结果表。4、文件管理规范、文件管理规范 记录

9、用笔： 使用黑色签字笔记录。签名： 被授权的人员才能签署文件。 应签全名，除非文件另有规定。 签名应始终一致。填写栏目：所有栏目必须填写。 填写内容与上面栏目相同也应重新填写。编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 6 / 22填写栏目内容，应按照实际测试情况，对测试结果使用打钩“”填写，只能选择一种测试结果填写。 如下： 文件名称是否完整可读xxx确认方案 Yes是 No否 若有单个栏目不需要填入内容，则在空白处填写英文字母“不适用”的简写“N/A”，表示无此项内容。 若有多个栏目不需要填入内容，应用斜线划掉，斜线上方填写“N/A” ，下方签名并注明日期。 如下: N

10、/A签名 日期更改错误： 在错误处划线，填入正确的内容，签名并注明更改日期，确保原先信息仍清晰可识别 如: 2011年01月01日 修改人签名和修改日期 2011年01月02日 记录日期： 年用4位数表示，日和月用2位数表示如：2011年09月01日使用缩略语： 在术语全称后的括号内注明缩写，然后才可以使用缩写。书面语及名称： 使用规范的书面语及名称。文件前后名称要一致。5、风险评估5.1 质量风险分析及评估(汇总在FMEA分析表)编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 7 / 22采用失败模式对无菌检验隔离系统确认进行风险评估。风险的评价项目：风险的严重性、风险的可能

11、性、风险的可识别性/预测性。严重性的评定等级(S)类别严重系数严重程度微小1由于仪器操作不熟练导致的运行确认失败，但对产品质量影响不明显，可以忽略。中等2由于仪器小部件缺陷不符合要求导致的运行失败，但可能导致成品的一般缺陷，对产品质量影响不太明显。严重3由于仪器关键部件缺陷，但可能使产品质量受到一定影响，导致患者由于成品质量缺陷或药品不良反应以及副作用而感到不满意。发生的可能性的评定等级表(P)类别可能性系数发生的可能性不可能1很少发生，如：标准操作程序中存在缺陷，指导操作可能失败。可能2偶尔发生，如：标准程序指导操作下的人为失败。很可能3极易发生，如：标准程序能指导操作，但由于习惯操作而造成

12、人为失误。可识别性的评定等级表(B)类别等级发生的可能性可能性大1潜在缺陷在抵达下一个过程前可能由过程控制发现或防止中等可能性2潜在缺陷在抵达下一个过程前不大可能由过程控制发现或防止几乎不可能的3潜在缺陷在抵达下一个过程前被发现的可能性非常小风险评价的标准RPN风险水平概述13RPB27S2高风险此为不可接受风险，必须尽快采用控制措施，通过提高可检测性及降低风险产生的可能性来降低最终风险水平。4RPN12中等风险此风险要求采用控制措施，通过提高可检测性及降低风险的可能性来降低最终风险水平，所用的措施可以是规程或技术措施。RPN3低风险此风险水平为可接受风险，无需采用额外的控制措施。注：风险优先

13、系数(RPN)：RPN=SPB云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 8 / 225.2风险评估调查分析表对影响性能确认效果的风险项目分析评估，如下表。影响无菌检验隔离系统确认的风险项目分析评估表序号风险项目潜在失效影响(风险范围)潜在失效原因(风险描述)严重程度（S）发生的可能性（P）可识别性（B）RPN风险等级有效措施及建议1参数关键参数确认结果不符合确认标准要求。购入使用的设备，运行性能参数不符合使用标准。32318高风险设计选型，严格进行各项确认。2电源影响设备寿命，使设备损坏电压不稳，电源线脱落或电源线短路3216中等风险设计选型，

14、安装符合GMP要求。3环境影响设备寿命，使设备损坏环境不符合设备安装及运行环境要求2228中等风险按文件规定定期监测环境；对不符合环境的情况进行有效控制。4完整性影响隔离器内部洁净度，导致标准洁净度级别无法达到。检漏不合格。32318高风险定期确认检漏，日常使用维护好高效。5灭菌效果导致确认结果失败，影响产品检验结果。灭菌程序错误或灭菌效果不符合设计要求。33327高风险定期进行灭菌效果确认。6洁净度导致确认结果失败，检验结果不能代表真实结果。洁净度级别不符合要求。33218高风险定期进行洁净度检测，日常使用中做好维护保养。7运行安全导致确认结果失败，影响检验人员安全。灭菌过程泄露或灭菌后排残

15、不符合设计使用要求。32318高风险定期进行确认。8人员培训人员未经培训或培训不到位，致使操作失败。人员未经培训或培训不到位。2124中等风险按预定要求进行培训，并考核合格后上岗；加强培训和考核。9文件造成操作人员误解，影响确认结果文件不完整或内容有误，或者包含有让人误解的信息。2112低风险加强人员培训；按照标准操作程序严格执行；加强现场检查及监管力度。影响运行确认结果的主要高风险点存在于参数选型、完整性、灭菌效果、洁净度及运行安全，中等风险存在于电源、环境、人员培训等，在确认时，应将以上风险点作为检查和监控的重点，将所有高风险和中等风险作为质量控制点，并将控制措施后的结果记录在报告中。云南

16、龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 9 / 22七七、确认内容、确认内容1、ZW-SV1800ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统型无菌检验隔离系统安装确认安装确认1.1确认目的：确认ZW-SV1800型无菌检验隔离系统安装符合标准要求。确认运行需要的公用系统已经正确连接。确认运行需要的公用系统的参数满足使用要求。1.2 确认方法：检查ZW-SV1800型无菌检验隔离系统安装环境，安装位置和空间是否能满足使用和维修需要；检查电源与控制连接是否正确。实际对照设备是否安装在指定无菌室内，目测设备是否已连接排气管且排气管通向室外。目测无菌检验隔离

17、系统外观应完好，平整，无明显划痕。目测设备是否已提供设备标识牌。检查电源连接是否正确，气源连接是否正确。1.3 确认要求：实际对照设备是否安装在指定无菌室内，目测设备已连接排气管且排气管通向室外。目测无菌检验隔离系统外观应完好，平整，无明显划痕。目测设备已提供设备标识牌。检查电源连接应正确，电源线应接地。气源连接应正确，应符合使用要求。确认结果填写于附件3 ZW-SV1800型无菌检验隔离系统安装确认结果表。2、ZW-SV1800ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统型无菌检验隔离系统运行确认运行确认2.1 隔离器完整性确认2.1.1 确认目的：确认 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统各功

18、能程序运行正常。2.1.2 确认方法：必须使要检验的隔离器内的温度和压力以及检验室的室温和气压温度稳定后才能开始测漏检验。设备带有自动测漏功能，设置测漏压力为 80Pa，点击测漏按钮，设备开始自动加压、充气，然后进行自动测漏，测漏时间为 142s，测试结束后，自动显示泄漏率。 当设备测漏功能无法使用时也可以采用手动方法进行测漏，先用放置在隔离器附近的温度计和气压计测量室内温度和大气压。在测试隔离器泄漏率之前，必须把测量无菌隔离器内部温度的温度计悬挂在隔离器的中心位置。当压力和温度稳定后，关闭阀门，给隔离器内部充气，同时测量隔离器内的温度和压差以及外部大气压。记录第一次测量的压力读数（初始读数1

19、）和最后一次测量的压力读数（结束读数2）。采用小时泄漏率的公式计算舱内小时泄漏率。检验报告必须包括按规定的时间间隔测量的温度和压力。小时泄漏率Tf为：云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 10 / 22 ）（11423600n11nfTPTPT 式中： P1第一次读数时隔离器内的绝对压力（外部大气压减去压差），Pa； Pn最后一次读数时隔离器内的绝对压力（外部大气压减去压差），Pa； T1第一次读数时的温度，K； Tn最后一次读数时的温度，K； 3600表示1h等于3600s 压力达到正常工作压力的1.5倍以上，设备开始运行测漏程序，正常工

20、作时压力为50Pa，故设定测漏开始时压力为80Pa。注：摄氏温度摄氏温度 （）与开式温标 T（K）之间的转化关系为： T=+273。2.1.3 标准要求：隔离系统保压时间结束时，无菌检验隔离系统的泄漏率0.5%/h。确认结果填写于附件 4 无菌检验隔离系统完整性确认结果表。2.2 参数设定运行有效性确认2.2.1 确认目的：确认隔离系统能有效的设定运行参数，且隔离系统可按照设定的参数值有效运行。2.2.2 确认方法：按 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统标准操作规程操作，通过手动设定隔离系统的每一个参数，目测在设置范围内，参数能正常输入，超过设置范围的数字则无法输入。同时运行设定的参数，观

21、察设备是否按照设定的参数进行运行。2.2.3 标准要求：隔离系统能有效输入设定参数且正常运行各个参数。确认结果填写于附件 5 无菌检验隔离系统参数设定运行有效性确认结果表。2.3 高效过滤器完整性确认2.3.1 确认目的：确认无菌检验隔离系统过滤器完整性符合要求。2.3.2 确认方法：过滤器完整性测试是通过在过滤器上游释放PAO气溶胶烟雾，在下游通过光度运行检测该PAO气溶胶烟雾。调整气溶胶发生器，使上游气溶胶烟雾浓度达到10-30g/l，设置过滤器上游的气溶胶烟雾浓度为100%。当无气溶胶烟雾的样品空气通过过滤器时，将仪器光散射读数归零。 用光度运行扫描整个过滤器，保证整个滤芯被检验。离过滤

22、器3cm处移动探头，扫描速度不宜超过5cm2/s。沿着滤芯与框架龙骨及过滤器框架与静压箱之间，将检验区域分区。记录任何超出允许渗透量的区域和泄漏点。记录每个过滤器、密封处及过滤器框架的最大渗透点。过滤器框架必须密封完好以防止任何颗粒通过旁路泄漏。测试需云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 11 / 22包含扫描滤芯、过滤器框架及密封。2.3.3 标准要求：泄漏率应不超过 0.01%。确认结果填写于附件 6 无菌检验隔离系统高效过滤器完整性确认结果表。2.4 报警功能确认2.4.1 确认目的：确认报警功能正常、有效。2.4.2 确认方法：通过

23、人为误操作，观察确认报警是否正常。1）设备高低压报警，在保压或通风状态下，修改超压报警下限和上限值，使其超出设定值，应有声光报警。2）在自动运行结束和手动运行的每一个步骤结束，应有声光报警。3）设备发生故障时，应有声光报警。2.4.3 标准要求：报警功能正常、有效。确认结果填写于附件 7 无菌检验隔离系统报警功能确认结果表。2.5 参数断电保护功能确认2.5.1 确认目的：确认隔离系统的参数设定在断电之后有保护功能，重新上电参数不会发生更改。2.5.2 确认方法：开启隔离系统，进入无菌检验隔离系统参数设置界面，在参数设定范围内任意设定一组参数，点击工艺参数保存，同时将设置值记录于工作表中，断电

24、10s，再重新上电。2.5.3 标准要求：断电之后参数设定界面上显示的值应与断电之间设定参数一致。确认结果填写于附件 8 无菌检验隔离系统参数断电保护功能确认结果表。2.6 三级权限确认2.6.1 确认目的：确认设备具有三级权限并与权限描述一致。2.6.2 确认方法：用一级、二级、三级权限登陆，手动操作。2.6.3 标准要求：设备具有三级权限，各级权限所能执行的功能与权限描述一致。确认结果填写于附件 9 无菌检验隔离系统三级权限确认结果表。3、ZW-SV1800ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统型无菌检验隔离系统性能确认性能确认3.1 洁净度级别确认3.1.1 确认目的：确认 ZW-SV1

25、800 型无菌检验隔离系统洁净度级别是否达到A 级洁净度标准要求。云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 12 / 223.1.2 检查项目及标准限度洁净度级别性能确认的内容为确认设备过滤空气的质量（即隔离舱内洁净度级别） ，检查的项目包括悬浮粒子、沉降菌、浮游菌确认。相关的标准要求如下：检测项目取样点数接受标准（静态）验证监测频率0.5m 5m悬浮粒子2 点 3,520 粒/m3 20 粒/m3每天 1 次，连续 3天沉 降 菌2 点1cfu/皿每天 1 次，连续 3天浮游菌2 点1cfu/皿每天 1 次，连续 3天3.1.3 确认方法确保

26、设备能正常运行时，进行悬浮粒子数、沉降菌、浮游菌数检测。 悬浮粒子用尘埃粒子计数器按Y09-310 型悬浮粒子计数器标准操作规程进行测定，悬浮粒子计数方法参考 GB/T 16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法。测试时间：对于紊流隔离系统，测试宜在净化空气调节系统（保压系统）正常运行时间不少于30min后开始。采样点数目为2点，采样点布置方式如下图：采样点的位置：采样点选择在距离工作台面2040cm高度（手套操作时的高度）水平面上均匀布置。采样次数：每个点连续3次。采样量：结合测试仪器的流量（以流量为100L/min的粒子运行数器为例），各点单次取样量和取样时

27、间规定如下：云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 13 / 22测试方法：a）对隔离舱内进行清洁；b）将激光尘埃粒子计数器采样支架在开机前放入待测试隔离舱内，关闭舱门，按设备的手动运行程序“通风”或“保压”开机运行应不少于20min。c）系统运行时，可将舱门稍开（门钩不要脱开）。d）手动运行完成后，保持正压2050 Pa稳定 30分钟后，扣紧进料门，用激光尘埃粒子计数器进行检测，检测方法参照激光尘埃粒子计数器说明书或SOP文件，检测时，采样管通过隔离舱的测试口与采样支架上的等动力采样头连接。e）依次测试每个点的悬浮粒子。注意事项：a）在确认

28、隔离舱内压力达到设定要求(维持压力应2040Pa)时，方可进行采样。b）在采样中，采样管口要向上。c）环境相对湿度、温度等因素对激光尘埃粒子计数器的测试结果有一定影响，应避免在不符合测试仪器使用环境的条件下进行测试。d）若使用其它型号尘埃粒子计数器，需确认其对舱内尘粒测试结果无影响，并根据仪器使用说明书进行测试。e）若测试结果不稳定，可能属舱内不够清洁所致，可对舱内进行清洁并增加补风量进行再次测试。结果计算方法参考GB/T 16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法。结果评定：判断悬浮粒子洁净度级别应依据以下条件：a）每个采样点的平均粒子浓度必须低于或等于确认要求界限。b）全

29、部采样点的粒子浓度平均值均值的 95%置信上限（UCL）必须低于或等于确认要100L/min粒子运行数器洁净级别A级B级C级D级单次取样量1 m3/次0.7m3/次0.1 m3/次0.1 m3/次单次取样时间10min7min1min1min云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 14 / 22求界限。试验结果记录于附件 10 悬浮粒子确认结果表。悬浮粒子的监测原始记录见附件。 沉降菌 按沉降菌测试标准操作规程 ，沉降菌测试方法参考GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法。测试时间：对于紊流隔离系统，

30、测试宜在净化空气调节系统（保压系统）正常运行时间不少于30min后开始。采样点数目为2点，采样点布置方式如下图：采样点的位置：工作台面上。培养皿数：14个，每个采样点均放置7个培养皿。测试步骤：a）将无菌的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）培养皿包装好（采用不锈钢桶包装形式），放置于隔离系统内部，关上隔离系统舱门，开启隔离系统自带的汽化过氧化氢灭菌器对舱体进行灭菌；b）灭菌完成后，开启隔离系统保压功能，待保压稳定后，按照培养皿采样点布置图，在隔离系统的每个采样点上均匀布置7个培养皿，总共14个培养皿。c）保持正压2050 Pa稳定 30分钟后，逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露于空气中。d）静态测

31、试时，培养皿暴露时间不少于30分钟。e）全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。培养温度3035，时间不少于2天。f）每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。每批选定3个培养皿作为对照培养。g）用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记，必要时用放大镜检查有否遗漏。结果计算方法参考GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法。结果评定：云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 15 / 22a）每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准中的界限。b）在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准

32、，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。确认试验结果记录于附件 11 沉降菌确认结果表。 浮游菌浮游菌测试方法参考GB/T 16293-2010 医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法。测试时间：对于紊流隔离系统，测试宜在净化空气调节系统（保压系统）正常运行时间不少于30min后开始。采样点数目为2点，采样点布置方式如下图：采样点的位置：采样点选择在距离工作台面2040cm高度（手套操作时的高度）水平面上均匀布置。采样量：1000L/次。测试步骤：a）将无菌的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）培养皿包装好（采用不锈钢桶包装形式），和浮游菌采样器一起放置于隔离系统内部，关上隔

33、离系统舱门，开启隔离系统自带的汽化过氧化氢灭菌器对舱体进行灭菌；b）灭菌完成后，开启隔离系统保压功能，保持正压2050 Pa稳定30分钟后，按照培养皿采样点布置图，在隔离系统的每个采样点上使用浮游菌采样器进行采样，浮游菌采样器使用方法参照浮游菌采样器说明书或SOP文件，每个点采样1000L。c）依次进行每个点的浮游菌采样。d）全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。培养温度3035，时间不少于2d。e）每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。每批选定3个培养皿作为对照培养。f）用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记，必要时用放大镜检查有否遗漏。云南龙海天然植物药业有限公司编号

34、：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 16 / 22注意事项：a）浮游菌采样器的采样口及采样管，使用前必须进行高温灭菌。b）浮游菌采样器的顶盖、转盘及罩子在汽化过氧化氢灭菌时，应尽可能的暴露，保障过氧化氢气体灭菌完全。结果计算方法参考GB/T 16293-2010 医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法。结果评定：a）每个测点的浮游菌平均浓度必须低于所选定评定标准中的界限。b）在静态测试时，若某测点的浮游菌平均浓度超过评定标准，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。确认试验结果记录于附件 12 浮游菌确认结果表。3.2 除湿性能确认3.2.1 确认目的：确认无菌

35、检验隔离系统除湿速率符合要求。3.2.2 确认方法：在参数设定界面，在 20-90%RH 的范围内，设定除湿湿度，在手动运行程序中，启动除湿程序，在除湿程序运行之前，记录舱内原始湿度，并在除湿运行程序停止时即刻记录除湿湿度及除湿时间，计算出除湿前后湿度读数的差值，以差值除以除湿时间即为隔离系统内除湿速率。并将除湿停止时的湿度读数与设定值比较是否符合要求。3.2.3 标准要求：无菌检验隔离系统除湿系统在正常运行情况下，在 20%90%RH 相对湿度范围内，其对隔离系统（2m）内除湿速率应1%RH/min（注：因无菌隔离系统体积大小不定，因此除湿速率应根据实际情况修改），除湿结束时，隔离系统内相对

36、湿度读数应在设定值的5%误差范围之内。3.2.4 确认试验结果记录于附件 13 除湿性能确认结果表。3.3 灭菌阶段过氧化氢蒸汽分布均匀性确认3.3.1 确认目的：通过对无菌检验隔离系统内过氧化氢蒸汽分布的状态进行确认测试，以确认隔离系统是否满足灭菌的要求。3.3.2 确认方法：在测试之前，要对隔离系统进行预先风险评估。VHP 灭菌化学指示卡（CI）布点方式的风险评估：主要考虑2个因素：VHP蒸汽分布情况位置和无菌检验操作接触的关键暴露区域。云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 17 / 22编号编号位置描述位置描述风险级别风险级别类别类别

37、1左一手套手指间高VHP分布差, 微生物污染2左二手套手指间高VHP分布差, 微生物污染3左三手套手指间高VHP分布差，微生物污染4左四手套手指间高VHP分布差，微生物污染5隔离系统左侧大门高VHP分布差，微生物污染6隔离系统操作平台左底板高关键操作区域，微生物污染7隔离系统操作平台蠕动泵高关键操作区域，微生物污染8隔离系统操作平台高关键操作区域，微生物污染9隔离系统右侧大门高VHP分布差，微生物污染10隔离系统操作平台右底板高关键操作区域，微生物污染11右一手套手指间高VHP分布差, 微生物污染12右二手套手指间高VHP分布差, 微生物污染13右三手套手指间高VHP分布差，微生物污染14右四

38、手套手指间高VHP分布差，微生物污染15搅拌风机高微生物污染16隔离系统回风高效高微生物污染17隔离系统回风高效高微生物污染18隔离系统进风高效高微生物污染19隔离系统进风高效高微生物污染20搅拌风机高微生物污染化学指示剂卡布点图：化学指示剂卡布点图：云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 18 / 22图注：表示过氧化氢化学指示卡，每次20片，3次共60片试验方法：a) 在无菌检验隔离系统舱内20个不同的位置（见化学指示卡布点图）各放1份化学指示卡；c) 设定无菌检验隔离系统运行参数，确认并开机运行；d) 灭菌过程中观察其变色情况，并对各点

39、颜色进行比对。注意事项：a）灭菌效力验证之前需检测CI化学指示卡的基本信息。结果评定：化学指示卡均由蓝色变为粉红色，且各个化学指示卡之间变色效果无明显差异。3.3.3 标准要求：分布于隔离系统内各测试点的过氧化氢化学指示卡均能显著变色，且各个化学指示卡变色效果无明显差异，视为汽化过氧化氢分布均匀。确认试验结果记录于附件 14 灭菌阶段过氧化氢蒸汽分布均匀性确认结果表。3.4 灭菌效果验证3.4.1 确认目的：通过生物挑战试验，验证无菌检验隔离系统的灭菌效果能使生物指示剂下降超过 6 个对数级。云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 19 /

40、223.4.2 确认方法： 在测试之前，要对隔离系统进行预先风险评估。VHP 灭菌效力生物指示剂（BI）布点方式的风险评估：编号编号位置描述位置描述风险级别风险级别类别类别1左二手套手指间高VHP分布差, 微生物污染2隔离系统操作平台高关键操作区域，微生物污染3隔离系统操作平台蠕动泵高关键操作区域，微生物污染4右三手套手指间高VHP分布差, 微生物污染5隔离系统回风高效高微生物污染6隔离系统进风高效高微生物污染生物指示剂布点图：生物指示剂布点图：云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 20 / 22表示过氧化氢生物指示剂，每次6片，3次总共1

41、8片。试验方法：a) 在无菌检验隔离系统舱内6个不同的位置（见生物指示剂布点图）各放1份嗜热脂肪芽孢杆菌片（BI生物指示剂）（ATCC12980），阳性对照置于超净工作台；b) 在无菌检验隔离系统内放置8支已经灭菌的TSB培养基试管；c) 设定无菌检验隔离系统运行参数，确认并开机运行；d) 将湿度降到30%RH以下的预先设定值，根据舱体大小，设定适当的加药量。e) 灭菌结束后，开启无菌检验隔离系统的排残程序，进行过氧化氢排残；f) 同时开启无菌检验隔离系统的通风系统，采用系统送排风管道将过氧化氢蒸汽排除；g) 过氧化氢浓度降至10ppm以下时，将嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂菌片接种到胰酪大豆胨肉

42、汤培养基（TSB）试管中，留一只试管不接种作为阴性对照，以证明培养基本身的无菌性。并在超净工作台上将阳性对照的嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂菌片接种到TSB培养基内，将所有培养基一起置于5560恒温培养箱中培养7天后观察结果。注意事项：a）灭菌效力验证之前需检测BI生物指示剂的基本信息。b）测试用具要作灭菌处理,以确保测试的可靠性、正确性。c）采取措施防止外源性污染，并对无菌检验隔离系统灭菌参数、培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。结果评定：a）试验组中接种生物指示剂的 TSB 培养基均未长菌（未出现浑浊），阳性对照管有菌生长（出现浑浊），阴性对照管无菌生长，判定灭菌合格。b）若试验组培养基变

43、混浊，需在排除外源性污染等因素后，重新测试。c）阳性对照组无菌生长或阴性对照组有菌生长，试验组结果不管如何，均判定本次试验无效，需重新测试。3.4.3 标准要求：阴性对照应无菌生长，阳性对照应生长良好，试验管应无菌生长。确认试验结果记录于附件 15 灭菌效果确认结果表。云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 21 / 223.5 过氧化氢排空效果确认3.5.1 确认目的：在灭菌完成后，通过对无菌检验隔离系统舱内残留的过氧化氢排空进行测试，以确认其系统设定的通风时间是否达到要求，确保舱内过氧化氢达到安全浓度的要求。3.5.2 确认方法：在“自动

44、运行”控制程序中，设定通风时间为60分钟。待自动运行程序中“灭菌”完成时，设备自动进 “通风”程序，通过过氧化氢浓度探头进行测试。按上述规定的测试条件，记录通风时间设定值，然后分别于45min及60min记录一次过氧化氢浓度及相对湿度的变化值。 注意事项：当过氧化氢浓度降至 100ppm 以下时，采用过氧化氢低浓度测试仪进行检测。若 60min 记录的过氧化氢浓度大于 10ppm，应调整通风时间并重新进行该项的确认。3.5.3 标准要求：通风结束后，隔离系统内 H2O2浓度应小于等于 10ppm。确认试验结果记录于附件 16 过氧化氢排空效果确认结果表。3.6 灭菌循环验证3.6.1 确认目的

45、：运行一个灭菌循环，以确认灭菌循环各阶段实际运行值与其设定值是否相符。3.6.2 确认方法：通过手动输入隔离系统的每一个参数，启动设备“自动运行”按键，观察设备是否按照设定的参数进行运行。3.6.3 标准要求：隔离系统能有效正常运行各个参数且与其设定值相符合。确认试验结果记录于附件 17 灭菌循环确认结果表。3.7 操作人员安全确认3.7.1 确认目的：确认无菌检验隔离系统在灭菌过程中安装无菌检验隔离系统房间内的VHP 浓度对操作人员是安全的。3.7.2 确认方法：设定灭菌参数，开启无菌检验隔离系统自动灭菌；在灭菌过程中采用低浓度测量范围的过氧化氢浓度检测仪进行现场测试；测试点应覆盖无菌检验隔

46、离系统周围所有区域，测量采样点距无菌检验隔离系统腔体表面 30cm 以上；3.7.3 标准要求：在整个灭菌循环过程中，安装无菌检验隔离系统的房间内H2O2浓度应低于1ppm。云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 22 / 22确认试验结果记录于附件 18 操作人员安全确认结果表。八八、偏差分析处理要求偏差分析处理要求确认过程中应严格按照本确认方案执行，出现个别确认项目不符合标准结果时，填写偏差记录，分析不合格原因，必要时重新确认不合格项目或全部项目，所有异常情况及处理过程，记录于附件 19 确认偏差处理单。九九、确认、确认结果评价与结论结果

47、评价与结论确认结束后，由操作人员负责收集各项确认结果，并进行综合评审并给出结论。对确认结果评审应包括：A、确认试验是否有遗漏？B、确认实施过程中对确认方案有无修改？修改原因、依据以及是否经过批准？C、确认记录是否完整？D、确认试验结果是否符合标准要求？偏差及对偏差的说明是否合理？是否需要进一步补充试验？十、附件十、附件 附件 1：确认培训记录表 附件 2：确认所需文件资料及存放处确认结果表、仪器仪表确认结果表 附件 3：ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统安装确认结果表 附件 4：无菌检验隔离系统完整性确认结果表附件 5：无菌检验隔离系统参数设定运行有效性确认结果表附件 6：无菌检验隔离系统

48、高效过滤器完整性确认结果表附件 7：无菌检验隔离系统报警功能确认结果表附件 8：无菌检验隔离系统参数断电保护功能确认结果表附件 9：无菌检验隔离系统三级权限确认结果表附件 10：悬浮粒子确认结果表附件 11：沉降菌确认结果表附件 12：浮游菌确认结果表附件 13：除湿性能确认结果表附件 14：灭菌阶段过氧化氢蒸汽分布均匀性确认结果表附件 15：灭菌效果确认结果表云南龙海天然植物药业有限公司编号：VE-30-1-0-2016 文件类别：确认文件 页码： 23 / 22附件 16：过氧化氢排空效果确认结果表附件 17：灭菌循环确认结果表附件 18：操作人员安全确认结果表附件 19：确认偏差处理单附

49、件 20：确认总结及评价表 ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 1：确认培训记录表确认培训记录表日期：地点：培训名称：ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认方案培训讲师：应参加人数：实际参加人数：课时： 小时姓名职别部门考核情况培训内容：培训内容：1、 验证方案；2、验证记录的填写要求；3、验证偏差处理要求。培训效果要求：培训效果要求：要求参加培训人员熟悉负责的内容、操作方法与要求。培训效果评价：培训讲师/日期：ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 2 2：确认所需文件资料及存放处确认结果表确认所需文件资料及存放处确认结果表资料名称可接受标准检查

50、方法检查结果存放处ZW-SV1800型无菌检验隔离系统说明书资料齐全，存放符合要求检验仪器计量证书资料齐全，存放符合要求验收确认资料资料齐全，存放符合要求确认人/日期:复核人/日期:仪器仪表确认结果表仪器仪表确认结果表名称规格型号编号校验日期校验有效期确认人/日期:复核人/日期:ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件3 3： ZW-SV1800ZW-SV1800型无菌检验隔离系统安装型无菌检验隔离系统安装确认结果表确认结果表序号测试项目测试方法是否符合1放置在有洁净、无强烈震动及腐蚀性气体的室内，在其周围不可放置易燃易爆物品。安装位置和空间是否能满足使用和维修需要。目测查验是

51、 否2外观应完好，平整，无明显划痕。目测查验是 否3已连接排气管且排气管通向室外。目测查验是 否4应提供设备标识牌。目测查验是 否5主电源与控制连接应正确，有接地保护，气源连接应正确，符合设计要求。电源220V50HZ，保护电流25A，气源0.4-0.8MPa工程部查验是 否6设备安装在指定无菌室内，房间洁净级别至少满足D级。检查无菌室环境监测报告是 否结论结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期： ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 4：无菌检验隔离系统完整性无菌检验隔离系统完整性确认结果表确认结果表项目开始压差（Pa）结束压差（Pa）时间（min）开始温度（）结

52、束温度（）隔离系统泄漏率确认要求隔离系统保压时间结束时，无菌检验隔离系统的泄漏率0.5%/h。结论结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期： ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 5：无菌检验隔离系统无菌检验隔离系统参数设定运行有效性确认结果表参数设定运行有效性确认结果表项目设定值显示值检测内容及确认要求是否符合要求开机开机界面显示界面能正常开机是 否设定湿度湿度设定范围为 20%RH-70%RH是 否设定汽化汽化温度设定范围为72-99.9是 否喷药时间喷药时间设定范围为100ms-999ms是 否喷药间歇喷药间歇设定范围为100ms-999ms是 否调节喷药调节喷

53、药设定范围为1次-99次是 否灭菌喷药灭菌喷药设定范围为1次-99次是 否设定压差压差设定范围为1-99Pa是 否调节周期调节周期设定范围为1-99次是 否灭菌周期灭菌周期设定范围为0-99次是 否调节间歇调节间歇设定范围为1-999min是 否灭菌间歇灭菌间歇设定范围为1-999min是 否排残时间排残时间设定范围为1-999min是 否灭菌工艺设定通风时间通风时间设定范围为0-999min是 否设置湿度除湿达到设定之后，是否自动运行调节。是 否设置汽化温度温度达到设定之后，是否开始喷药。是 否设置调节次数是否按设置次数运行是 否设置灭菌次数是否按设置次数运行是 否设置排残时间是否按设置时间

54、运行是 否自动运行设置通风时间是否按设置时间运行是 否ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录设置定时时间是否按预约时间开启是 否启动按键N/A是否能开始运行是 否停止按键N/A是否能停止运行是 否除湿N/A是否运行除湿是 否调节N/A是否运行调节是 否灭菌N/A是否运行灭菌是 否排残N/A是否运行排残是 否通风N/A是否运行通风是 否维持N/A是否运行维持是 否手动运行返回N/A是否返回到上一界面是 否喷药量校正输入实际喷药量，点击喷药量校正，显示喷药量修改成实际喷药量是 否时间校正输入年、月、日、时、分，点击时间校正，时间修改为设定值是 否湿度校正输入实际湿度与显示湿度的偏差值，点

55、击过程量校正，将显示湿度修改为实际湿度是 否舱温校正输入实际舱温与显示舱温的偏差值，点击过程量校正，将显示舱温修改为实际舱温是 否参数校正压差校正输入实际压差与显示压差的偏差值，点击过程量校正，将显示湿度修改为实际湿度参数校准的有效性是 否标准要求：隔离系统能有效输入设定参数且正常运行各个参数。结论结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期： ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 6：无菌检验隔离系统高效过滤器完整性无菌检验隔离系统高效过滤器完整性确认结果表确认结果表序号过滤器编号上游浓度（g/l）最大泄漏率可接受标准是否符合要求1.3-0420790.01%是 否结论

56、结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期： ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 7：无菌检验隔离系统报警功能无菌检验隔离系统报警功能确认结果表确认结果表序号确认要求确认方法是否符合要求1设备高低压报警，在保压或通风状态下，修改超压报警下限和上限值，使其超出设定值，应有声光报警。在保压阶段，设置保压压力为40Pa，设置超压报警下限为20Pa，超压报警上限为60Pa。当设备处于保压阶段时，打开大门，当舱体压力降到20Pa以下时，设备声光报警。人为堵住设备排风管，当设备压力超过60Pa时，设备有声光报警。是 否2在自动运行结束和手动运行的每一个步骤结束，应有声光报警。完整

57、运行一遍设备的除湿、调节、灭菌、通风、保压5个阶段，当每一个阶段结束时，设备有声光报警。是 否3设备发生故障时，应有声光报警。设备发生故障时，设备应有声光报警。例如关掉设备压缩空气，设备在运行时会有声光报警。是 否标准要求：报警功能正常、有效。结论结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期： ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 8：无菌检验隔离系统无菌检验隔离系统参数断电保护功能确认结果表参数断电保护功能确认结果表运行阶段参数项设定值（断电之前）显示值（重新通电）是否符合要求自动除湿除湿湿度%RH %RH 是 否自动调节调节次数次 次是 否自动灭菌灭菌次数次 次是 否

58、自动排残排残时间minmin是 否自动通风通风时间minmin是 否标准要求：断电之后参数设定界面上显示的值应与断电之间设定参数一致。结论结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期： ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 9：无菌检验隔离系统无菌检验隔离系统三级权限确认结果表三级权限确认结果表序号权限权限描述实际情况是否符合要求1一级权限为操作者权限，仅能启动自动运行程序，查看故障记录；是 否2二级权限为调试者权限，能启动自动运行和手动运行程序，可查看故障记录以及灭菌参数；是 否3三级权限为管理者权限，能启动自动运行和手动运行程序，观察故障记录，查看并修改灭菌参数，对湿

59、度、压差、喷药量以及时间进行校正；能修改用户等级权限并能修改用户密码。是 否标准要求：设备具有三级权限，各级权限所能执行的功能与权限描述一致。结论结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期： ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录附件附件 10：悬浮粒子悬浮粒子确认结果表确认结果表测试状态静态设备编号标准要求粒径0.5m：3,520 粒/m3；粒径5m：20 粒/m30.5m（粒/m3）5m（粒/m3）UCL测试日期监测点测试数据平均值测试数据平均值0.5m5m检查结果12 1212结论结果评价：偏差描述：确认人/日期:复核人/日期：ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记

60、录附件附件 11：沉降菌沉降菌确认结果表确认结果表测试状态静态标准要求1cfu/皿。测试日期 培养时间培养基配制批号培养温度测试点检查结果（cfu/皿）平均值（cfu/皿）检查结果（cfu/皿）平均值（cfu/皿）检查结果（cfu/皿）平均值（cfu/皿）1平皿 12平皿 23平皿 34平皿 45平皿 56平皿 67平皿 78平皿 89平皿 910平皿 1011平皿 1112平皿 1213平皿 1314平皿 14对照试验结果判断检查结果及评价：偏差说明：ZW-SV1800 型无菌检验隔离系统再确认记录测试状态静态标准要求1cfu/皿。测试日期 培养时间培养基配制批号培养温度确认人/日期:复核人