生物技术概论

1、生物技术概论复习重点一、名词解释1生物技术（biotechnology） 生物技术（biotechnology），也称生物工程(bioengineering)，是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，利用生物体或其体系或他们的衍生物来制造人类所需要的各种产品或达到某种目的的一门新兴的综合性的学科。2细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。 3.载体 分子克隆载体是一类可供外源DNA插入并携带重组DNA分

2、子进入适当宿主细胞的DNA分子。4.培养基 培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的、按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 5.基因文库 将大分子量的染色体组DNA分子经酶切形成大小合适的DNA片段群 ，或是经过反转录合成不同大小 适合于基因克隆的cDNA分子群体，连接到载体分子上，转入受体细胞后得到的克隆的集合体，叫基因文库。6. DNA 变性与复性变性：在高温及强碱条件下，双链DNA分子氢键断裂，两条链完全分离，形成单链DNA分子复性：降低温度、pH及增加盐浓度可使变性的DNA分子重新形成天然的DNA7.重叠基因 随着DNA核苷酸序列测定技术的发展，人们已经在一些噬菌体和

3、动物病毒中发现，不同核苷酸序列是彼此重叠的，称这样的两个基因为重叠基因（overlapping genes）,或嵌套基因（nest gene）8.植物组织培养是指从有机体内取出组织或细胞，在体外进行培养，使之生存或生长成组织。 9.限制性内切酶 限制性内切酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。 10.断裂基因 在基因编码序列中有与氨基酸编码无关的DNA间隔序列，使一个基因 分隔成不连续的若干区段11.多克隆位点DNA载体序列上人工合成的一段序列，含有多个限制内切酶识别位点。能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。 12. PCR聚合酶链式

4、反应（polymerase chain reaction, PCR），也称为DNA扩增PCR技术的原理并不复杂，实质为体内DNA复制的体外模拟。当双链DNA变性为单链后，DNA聚合酶以单链DNA为模板，并利用反应混合物的四种dNTPs，以与模板互补的核苷酸为引物，合成新生的DNA互补链。 13. 发酵工程 发酵工程属于生物技术的下游技术，是工业化大规模培养细胞、生产生物制品的一种技术。14细胞融合 细胞融合（cell fusion）又称细胞杂交（cell hybridization），是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程15基因工程 是指按人们的需要，用类似工程设计的方法将不同来源的

5、基因（DNA分子），在体外构建杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录、表达的操作16.克隆 作名词时指含有某目的DNA片段的重组DNA分子或含有该重组分子的无性繁殖系. 作动词时是指基因的分离与重组过程。17.转基因动物 是通过基因工程技术将外源的目的基因导入生殖细胞或早期胚胎，并整合到受体细胞的基因组中，发育形成所有细胞都含有目的基因的动物个体。18.细胞核移植利用显微操作技术将细胞核与细胞质分离，然后再将不同来源的核与质重组，形成杂种细胞。19.胚胎工程 以生殖细胞和胚胎细胞为对象进行的操作，主要技术包括体外受精、胚胎切割、胚胎移植等。20. cDNA文库通过一系列的酶

6、催作用，使总poly(A) mRNA制剂转变成双链cDNA群体，并插入到适当的载体分子上，然后再转化给大肠杆菌寄主菌株的细胞内。如此便构成了包含产所有基因编码的cDNA文库（ cDNA library) 。21. 脱分化离体培养条件下，一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织细胞状态或胚性细胞的状态的过程就是细胞脱分化22.细胞分化由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程称为细胞分化 23. 干细胞是动物体内具有分化潜能，并能自我更新的细胞，分为胚胎干细胞和组织干细胞。24.组织工程是在干细胞的基础上发展起来的，将干细胞与材料科学相结合，将自体或异体的

7、干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上，在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化，最终发育具有特定形态及功能的工程组织。25.单克隆抗体26.同裂酶指来自不同有机体，识别切割相同序列的一组酶27.同尾酶 是与同裂酶对应的一类限制酶，它们虽然来源各异，识别的靶子序列也各不相同，但都产生出相同的粘性末端。28转化严格是指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程。 29转染 是专指感受态的真核细胞捕获和表达病毒载体DNA分子的生命过程。30多能性指胚胎干细胞可以分化成各种不同的细胞类型并参与到发育过程中，一个基本的标准是胚胎干细胞具有向三个胚层分化的能力

8、31全能性 是指单个细胞在一定条件下分化发育成为完整个体的能力。32细胞系 指由初代培养产生的能进行无限次传代培养的细胞群。33细胞株通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain），也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群 。二、简答题1基因工程的概念及主要研究内容。 基因工程是指按人们的需要，用类似工程设计的方法将不同来源的基因（DNA分子），在体外构建杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录、表达的操作 其特征是可跨越天然物种屏障，可按照主观愿望创造新的生物品种。 基因工

9、程以称DNA重组技术，基因最大特点是分子水平上的操作，细胞水平上的表达。 基因工程的实施包括四个必要条件：工具酶、基因、载体、受体细胞研究内容¡ 目的基因的DNA片段的获得¡ 体外将外源DNA片段连接到载体分子上¡ 重组DNA分子转入受体细胞一起繁殖¡ 含重组体的受体细胞克隆的筛选¡ 目的基因的进一步分析研究。¡ 外源基因的表达和产物的分离纯化2何谓PCR ？简述他的原理和步骤。 PCR法是聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR），也称为DNA扩增反应体系构成： （1）DNA模板(template

10、)（2）引物（primer）（3）dNTPs（ATP/GTP/CTP/TTP）（4）DNA 聚合酶（特殊耐高温的）PCR的原理 PCR技术的原理并不复杂，实质为体内DNA复制的体外模拟。当双链DNA变性为单链后，DNA聚合酶以单链DNA为模板，并利用反应混合物的四种dNTPs，以与模板互补的核苷酸为引物，合成新生的DNA互补链。 PCR的步骤： 高温变性，低温退火 及适温延伸三个步骤循环周期的多次重复3.简述基因组文库和cDNA文库有何不同。 1.材料不同，基因组文库以基因组为材料 ， cDNA文库以mRNA为材料 2.基因组文库包括全部遗传信息， cDNA文库反应是一定发育时期的遗传信息 3

11、.基因组文库包括中编码基因包括内含子和外显子， cDNA文库的克隆不包含内含子的功能4.DNA重组的连接方法主要有哪几种，它们各自有什么优点与不足？ （一）黏性末端DNA分子间的连接 1.一种限制性内切酶酶切位点的连接 2.不同限制性内切酶酶切位点的连接（二）平末端的连接 1.可用T4 DNA连接酶连接平末端,但连接效 率较低，为粘性末端的1% 2.将平末端处理成粘性末端后再进行连接（三）平末端变粘性末端的方法1.同聚物加尾法 缺点：无法在尾巴处（原位）进行切割 2.衔接物连接法 优点：兼具同聚加尾法和粘性末端法各自的优点 可以根据实验需要设计不同RE识别位点的衔接物，并可大量制备，从而大提高

12、平齐末端DNA片段的连接效率。 可实现外源片段定向克隆。缺点：基因内部有相同酶位点时，酶切会把该基因切断，从而给后续的亚克隆和其他操作带来麻烦。5.基因工程中主要的工具酶有哪些，他们的作用是什么？ 限制性内切酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。 连接酶：连接作用是通过DNA连接酶在体内或体外作用而完成的。这种酶催化DNA上裂口两侧（相邻）核苷酸裸露的3羟基和5磷酸之间形成共价结合的磷酸二酯键，使原来断开的DNA裂口重新连接起来 。修饰酶：1DNA聚合酶：通过缺口转移法制备分子杂交中的探针 2Klenow酶：主要用途: 1.将粘性末端制备为平

13、末端, 2.对具有3隐蔽末端的DNA片段作末端放射性标记, 3.cDNA克隆中第二链cDNA的合成, 4.DNA序列的测定. 3 T4 DNA聚合酶,：主要用途: 1.将任何形式的双链DNA端制备成平末端的双链DNA, 2.对双链DNA3 末端的作末端标记. 4T7 DNA聚合酶和修饰的T7 DNA聚合酶,：多用于DNA测序中 5aq DNA 聚合酶：在较宽的温度范围内都保持着催化能力，一次加酶即可满足PCR反应全过程的需要。6.什么是载体？载体的特点。基因工程中常用的载体有哪些，他们分别有什么特点？ 分子克隆载体是一类可供外源DNA插入并携带重组DNA分子进入适当宿主细胞的DNA分子。 载体

14、特点： 1. 至少有一个复制起点，因而至少可在一种生物体中自主复制。2. 至少应有一个克隆位点，以供外源DNA插入。3. 至少应有一个遗传标记基因，以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞 常用的载体：质粒载体（plasmid) 噬菌体的衍生物 柯斯质粒 病毒载体和人工染色体载体 质粒载体：染色体外能够自主复制的双链闭合环状DNA分子。本身大小为1-200kb，可容纳外源插入片段大小10kb左右，不超过15kb。 能自主复制，是能独立复制的复制子（autonomous replicon）。 质粒对宿主生存并不是必需的。 噬菌体的衍生物：噬菌体是一类细菌病毒的总称。噬菌体载

15、体，线性双连DNA分子，本身48.5kb，可容纳10-20kb外源基因。其左右两端各有一个12核苷酸组成的5突出的粘性末端，称为cos位点。柯斯质粒：具噬菌体特点，具有质粒DNA的特性，高容量的克隆能力，具有与同源序列的质粒重组的能力。广泛用于基因组文库建立。7.理想质粒载体必备的条件？ （1） 分子量尽量小，（2）应最大限度的具有各种常用RE的单一酶切位点多克隆位点（ MCS），是包含多个（最多20 个）限制性 酶切位点的一段很短的DNA序列。 （3）具两种以上的选择标记基因 ； （4）缺失mob基因 （5）易导入宿主细胞并复制和表达。7.细胞工程的概念、主要研究内容及其特点。概念n 细胞工

16、程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。 n 广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术，狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。研究内容：根据研究生物类型不同，细胞工程可分为植物细胞工程、动物细胞工程、微生物细胞工程。根据实验操作对象可分为：细胞、组织、器官培养；细胞融合；细胞核移植；染色体操作；体细胞诱变；转基因生物等。以细胞工程为基础，发展派生了不少以工程冠名的新领域：组织工程，胚胎工程，染色体工程。组织工程是应用细胞生物学和

17、工程学原理，将人体某部分组织细胞种植和吸附在一种生物材料的支架上进行人工培养繁殖、扩增，然后移植到人体内所需要的部位，从而达到器官修复的或再造的治疗目的的一种技术。染色体工程把单个的染色体或染色体组转入或移出受体细胞，从而形成新的染色体组合和遗传构成。胚胎工程以生殖细胞和胚胎细胞为对象进行的操作，主要技术包括体外受精、胚胎切割、胚胎移植等。转基因动物是通过基因工程技术将外源的目的基因导入生殖细胞或早期胚胎，并整合到受体细胞的基因组中，发育形成所有细胞都含有目的基因的动物个体。将目的基因在器官或组织中进行特异性高表达的转基因动物称为动物生物反应器。转基因植物转基因植物的置备比转基因动物相对简单。

18、通过基因工程技术将外源的目的基因导入植物细胞后直接进行诱导培养就可以再生出转基因植株。当这些转基因植株开花结果时，所改变的遗传性状就可以通过种子遗传给下一代植株。8.干细胞分哪几种？举例说明干细胞在临床上的应用。9.多莉是如何产生的？10.如何利用体细胞克隆出哺乳动物，克隆动物有何意义？11.简介酶发酵生产的定义及生产技术环节。12.简介一下微生物工程常用的微生物的种类。13.简述菌种退化的主要原因是什么？如何防止其退化？ 由于微生物细胞内DNA结构发生了变化，从而使由DNA决定的性状发生相应变化。 防止：1.合理育种，使用单核细胞，避免使用多核细胞。2.使用合适的培养基。3.创造良好的培养条

19、件。4.挖制传代次数，采用有效的菌种保藏方法。14.何谓酶工程，酶工程包括哪些主要内容。 将酶学和工程学相结合，产生了酶工程(enzyme engineering)这样一个新的领域。指酶的工业化生产和酶制剂的大规模应用技术，是生物技术的重要组成部分。酶工程主要研究酶的生产、纯化、固定化技术、酶分子结构的修饰和改造以及在工农业、医药卫生和理论研究等方面的应用。 主要包括三个方面内容：克隆酶、突变酶、新酶。15.何谓固定化酶，并简述酶的固定化方法。P16616.什么是酶分子修饰？简要回答为什么进行酶的分子修饰，以及如何进行酶的分子修饰？P16017.酶自身在应用上暴露出来的缺点有哪些，制备修饰酶的

20、目标是什么？18.何谓细胞融合？诱导细胞融合的方法有哪些。 细胞融合（cell fusion）又称细胞杂交（cell hybridization），是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。诱导细胞融合的方法 ： 生物法仙台病毒法 化学法PEG结合高Ca、 高pH诱导法 物理法电融合诱导法 19.何谓组织工程？简述组织工程三要素及技术路线？ 组织工程是在干细胞的基础上发展起来的，将干细胞与材料科学相结合，将自体或异体的干细胞经体外扩增后种植在预先构建好的聚合物骨架上，在适宜的生长条件下干细胞沿聚合物骨架迁移、铺展、生长和分化，最终发育具有特定形态及功能的工程组织。组织工程的三要素为：人工

21、细胞外间质支架、细胞与生长信息20.发酵工程经历了哪几个发展阶段？ 起初是来源于拉丁语ferver即“发泡”、“沸涌”之意。指酵母作用于果汁或发芽谷物时产生二氧化碳的现象。巴斯德在探讨了酵母酒精发酵的生理意义后，认为发酵是酵母在无氧状态下的呼吸过程，是生物获得能量的一种方式。近代，好气微生物的代谢作用，氧是必需的，也并不伴随起泡、沸涌现象。三论述题1. 结合所学的专业谈谈你对生物技术的理解，及生物技术在你的专业领域的发展前景。2. 利用学过的知识，谈一下你对转基因食品安全性的认识。3. 你对动物克隆技术怎样看待? 如何正确应用动物克隆技术?4通过对本课程的学习，请举23例说明现代生物技术发展史

22、上有影响的重大事件，并简述其创造的社会和经济价值。5试述人类基因组计划和克隆技术对伦理的冲击及我们应采取的应对策略。6谈谈你学习本课的收获和体会。7. 简述现代生物技术的主要内容及其与人类生活的关系。生物技术概论模拟练习题第一部分 分类练习一、名词解释生物技术、细胞工程、基因工程、酶工程、蛋白质工程、发酵工程、人类基因组计划、蛋白质组学、组织培养、生长因子、人工种子、连续培育、细胞分化、愈伤组织、分批发酵、肝细胞、TE细胞、酶分子修饰、酶反应器、生物传感器、生物芯片、细胞融合、细胞培育、无菌操作、组织培养、单倍体、花药培养、花粉培养、胚珠培养、单克隆抗体、体细胞克隆、受体细胞、载体、PCR、限

23、制性内切酶、目的基因、转化子、花粉管通道法、报告基因、重组子、转基因技术、动物反应器、基因治疗、离子交换、吸附、超临界流体萃取、固定化细胞、外植体、继代培养、悬浮培养、固定化培养、转基因植物、蛋白质功能改性、细胞融合、DNA粘性末端、重组质粒二、简答题1、细胞全能性学说的基本内容是什么？2、植物材料与细胞全能性表达有何关系？对培养中的选材有何指导意义？3、细胞脱分化在细胞结构上有何变化？4、细胞周期的调控在细胞脱分化中有何作用？5、细胞分化有什么基本特征？6、蔗糖在组织培养过程中的功能是什么？7、与器官发生形成个体相比体细胞胚形成个体有哪些特点？8、如何理解体细胞胚的遗传稳定性和变异性？9、离

24、体培养物的遗传变异机理是什么？10、哪些因素会影响培养物的遗传变异？11、从体细胞变异的分子基础分析体细胞变异的外遗传变异，实践中如何应用这些外遗传变异？12、总体上讲离体培养的条件主要有哪些？13、为什么茎尖分生组织培养能够除去植物病毒？14、花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？15、花药培养中再生植株的形成途径与再生植株倍性有何关系？16、用于建立悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？17、一个好的悬浮细胞系有哪些特征？18、悬浮细胞系在继代培养中其群体生长有何规律？19、哪些因素会影响原生质体培养？20、原生质体融合要经过哪些过程？21、对称融合与非对称融合的细胞杂种有何异同？22、胚乳培养

25、有何意义？23、同是薄壁细胞为什么胚乳薄壁细胞培养比较困难？24、细胞工程对实验室的基本要求有哪些？25、为什么胚乳培养物及其再生植株的倍性常发生紊乱？26、何为正选择?何为负选择?27、人工种子利用有何优点?28、用于制备人工种子的繁殖体主要有那些?29、为什么说微型变态器官是最有可能作为人工种子的繁殖体?30、同游离酶相比，固定化酶的性质改变主要有哪些？31、固定化操作对酶反应系统的影响主要有哪些？ 32、固定化酶有何性质？33、固定化酶有哪些指标？ 34、酶反应器有哪些基本类型？描述其特点？35、酶反应器有何设计原则？36、传感器的有哪些类型？各有何特点？37、蛋白质工程为什么又称为第二

26、代基因工程？二者有何联系与区别？38、简述氨基酸的基本理化性质？39、蛋白质的基本组件有哪些？40、什么是蛋白质组学？41、干细胞的显著特点？42、干细胞研究包括那几个阶段？43、什么样的细胞可作为受体细胞？44、载体有何左用？各种载体有何特点？45、从cDNA文库和基因文库中获得目的基因有什么不同？46、基因工程研究的理论依据？47、PCR的基本原理及过程？48、现代发酵工程的主要特征是什么？49、发酵工程经历哪几个时期，每个时期的特征是什么？50、简述分批培养过程中微生物生长的规律。51、简述制备固定化酶的原则。三、问答题1、培养基、外植体、玻璃器皿、金属用具以及外植体各选择什么灭菌方法？

27、2、维持实验室环境相对无菌应采取哪些措施？3、体细胞胚诱导与培养在培养基和生长素应用上有何特点？4、对于生根困难的植物脱毒在培养方式采用哪些措施？5、通过离体培养获得单倍体的途径有哪些？6、花药培养中如何选择外植体？7、花药培养与花粉培养有什么不同？8、幼胚培养的关键技术是什么？9、如果要获得有关抗某种病害的细胞系应采用何种措施？10、建立悬浮细胞系的关键技术有哪些？11、目前用做原生质体分离的材料有哪些？12、原生质体纯化有哪些方法？13、原生质体的培养方法有哪些？各有何优缺点？14、体细胞杂交和原生质体融合有哪些类型？其产物和再生个体有何特点？15、哪些类型的外植体适宜用做建立悬浮细胞系起

28、始培养物？16、原生质体培养中如何稳定培养基的pH？17、如何防止培养过程中外植体的褐化？18、细胞固定化培养系统有哪些类型？各有何特点？19、如何进行悬浮细胞系的继代培养？20、简述固定化酶的制备方法。21、细胞的固定化方法有哪些？各有何特点？22、如何维持美反应器恒定的生产力？23、为什么要进行酶的修饰？酶的蛋白质工程是如何进行的？24、反向生物学有哪些基本途径？25、试述原生质体的制备过程？ 26、原生质体的融合方法有哪些？27、如何鉴别和筛选杂合体？28、如何制备人工种子？描述其具体过程？29、动物细胞融合的主要途径有哪些？各有何特点？30、阐述外源基因导入受体细胞的各种途径？31、筛

29、选克隆子有哪些方法？32、怎样才能在发酵过程中保持工程菌的遗传稳定性？ 33、配制培养基的原则和方法是什么？34、简述菌种衰退的原因及防止措施。35、简述大规模工业生产常用的菌种扩大培养方法。36、简述影响种子质量的主要因素。37、常用灭菌方法有哪些？各有何特点？38、述发酵液的下游加工过程？四、综合能力部分1、为什么说细胞工程是一门承上启下的技术（举例说明）？2、如何理解植物细胞的全能性？3、绘制一个示意图将所有培养技术联系起来。4、任选一培养技术叙述从外植体到再生植株的完整实验过程。5、为什么说原生质体培养系统是现代生物技术的载体？6、要使细胞杂交技术成为常规育种途径还有哪些技术

30、问题需要解决？7、如何理解细胞工程的发展既依赖于相关学科的发展又促进了相关学科的发展？8、人工种子的应用前景如何? 需要解决那些问题?9、植物细胞规模培养与次数产物生产前景如何？为什么？10、为什么说动物细胞工程技术的发展在为人类造福的同时也对人类提出了新的挑战?11、你对动物克隆技术怎样看待? 如何正确应用动物克隆技术? 12、举例说明对现有蛋白质进行改造的主要方法及其应用？13、如何从一片嫩叶经组织培养培育出众多的完整植株？14、如何从植物细胞培养中获得较高的次声代谢产物？15、单倍体植株性单体弱？为什么还有不少的科学家热衷于诱发产生单倍体植株？16、开展干细胞研究对人类有何积极的意义？1

31、7、如何在体外获得大量生长、分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆？18、基因工程的科学意义和应用价值？19、试述基因工程的基本技术路线？20、如何采用PCR技术从生物材料中获得目的基因？21、生物技术的种类及其相互关系？22、试述生物技术对经济社会发展的影响？23、基因工程的研究进展24、蛋白质工程的研究进展25、细胞工程的研究进展26、发酵工程的研究进展27、酶工程的研究进展28、查找阅读有关生物技术的英文文献并翻译成中文第二部分 综合练习一、单项选择题1、现代生物技术是一项高新技术，它具有高新技术的“六高”特征，下面哪个不属于“六高”？ A、高效益B、高风险C、高势能D、 高效率2、生物技术是以

32、下面哪个为核心？ A、基因工程B、细胞工程C、 酶工程 D、 发酵工程3、分子克隆主要是指A、DNA的大量复制   B、DNA的大量转录C、DNA的大量剪切   D、RNA的大量反转录4、多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为A、平头末端   B、3突出末端   C、5突出末端   D、粘性末端5、设计聚合酶链反应的引物时，应考虑引物与模板的A、5端特定序列互补   B、5端任章序列互补C、3端特定序列互补   D、3端任意序列互补6、用于鉴定转化于细胞

33、是否含重组DNA的最常用方法是A、抗药性选择   B、分于杂交选择C、RNA反转录    D、免疫学方法7、下列哪些是发酵技术独有的特点A、多个反应不能在发酵设备中一次完成 B、条件温和、能耗少、设备简单C、不容易产生高分子化合物 D、发酵过程中不需要防止杂菌污染8、不是工业生产上常用的微生物为 A、担子菌 B、细菌 C、酵母菌  D、霉菌9、机械搅拌发酵罐与通风搅拌发酵罐相比，下列不属于前者特点的是A、发酵罐内没有搅拌装置，结构简单B、发酵罐内有搅拌装置，混合速度快C、耗能少，利于生产D、发酵罐内没有搅拌装置，结构复杂10

34、、从微生物细胞制备酶的流程一般包括破碎细胞、溶剂抽提、离心、过滤、 干燥这几个步骤。A、改造 B、浓缩 C、变异 D、强化11、花药培养的主要目的是A、单倍体育种 B、形成成熟花粉 C、形成正常胚 D、形成花粉管12、多莉羊是 的结果A、体细胞克隆 B、胚胎干细胞核移植 C、胎儿成纤维细胞核移植 D、胚胎细胞核移植法13、细胞融合技术主要过程不包括   A、备原生质体 B、诱导细胞融合 C、筛选杂合细胞 D、筛选混合细胞14、植物组织培养不包括   A、预备阶段 B、诱导去分化阶 C、继代增殖阶段 D、精卵结合阶段15、哪一年首先实现

35、了DNA体外重组技术，标志着生物技术的核心技术基因工程技术的开始？ A、1973 B、1970 C、1968 D、197216、平床培养系统的组成不包括：  A、烧杯B、液罐C、动泵D、培养17、原生质体制备不包括：A、取材与除菌B、酶解C、分离D、清洗18、基因组代表一个细胞或生物体的A、部分遗传信息   B、整套遗传信息C、可转录基因     D、非转录基因E、可表达基因19、在基因工程中通常所使用的质粒存在于A、细菌染色体     B、酵母染色体C、细菌染色体外 

36、60; D、酵母染色体外E、以上都不是20、就分于结构而论，质粒是A、环状双链DNA分子   B、环状单链DNA分于C、环状单链RNA分子   D、线状双链DNA分子E、线状单链DNA分子21、聚合酶链式反应可表示为A、PEC   B、PER   C、PDR   D、BCR   E、PCR22、在发酵工艺控制中，对发酵过程影响不大的是（ ） A、温度  B、搅拌功率 C、PH  D、溶解度23、发酵过程中，pH值取决于（ ） A、菌种 B、培养基

37、 C、培养条件 D、以上都是24、大量培养哺乳动物细胞方法：   A、微导管培养法 B、中导管培养法 C、微载体培养法 D、微胶囊培养法25、c DNA是指A、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB、在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC、在体外经转录合成的与DNA2补的RNAD、在体内经反转录合成的与RNA互补的DNAE、在体内经转录合成的与DNA互补的RNA26、发酵工程以培养微生物为主，所以又称为（ ） A、细胞工程 B、微生物工程 C、细菌工程 D、活化酶27、发酵工程的主要内容包括（ ）A、生产菌种的选育 B、发酵条件的优化与控制C、反应器的设计

38、及产物的分离 D、 以上都是28、下列哪些不是目前具有生产价值的发酵类型（ ） A、微生物菌体发酵 B、微生物菌体代谢产物发酵C、微生物的转化发酵 D、以上都不对29、微生物传感器是应用细胞固定化技术，将各种微生物固定在_的生物传感器 A、膜上 B、探针上 C、微生物上 D、细胞壁上30、重组DNA的基本构建过程是将A、任意两段DNA搂在一起    B、外源DNA接入人体DNAC、目的基因接人适当载体   D、目的基因接入哺乳类DNAE、外谭基因接人宿主基因31、ECoRI切割DNA双链产生A、平端   B、5突出

39、粘端   C、3突出粘端   D、钝性末端   E、配伍末端32、催化聚合酶链反应的酶是A、DNA连接酶    B、反转录酶C、末端转移酶   D、Taq DNA聚合酶33、将Pst I内切酶切割后的目的薹因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属A、同聚物加尾连接   B、人工接头连接C、平端连接         D、粘性末端连接34、限制性核酸内切酶切割DNA后产生A、3磷酸基末端和5

40、羟基末端      B、5磷酸基末端和3羟基末端C、3磷酸基末端和5磷酸基末端   D、5羟基末端和3羟基末端E、3羟基末端、5羟基末端和磷酸35、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是A、DNA聚合酶   B、RNA聚合酶C、DNA连接酶   D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶36、以质粒为载体。将外源基因导人受体菌的过程称A、转化   B、转染   C、感染   D、转导   E、转位37、互补筛选

41、法属于A、抗药性标志筛选   B、酶联免疫筛选C、标志补救筛选     D、原位杂交筛选E、免疫化学筛选38、下列常用于原核表达体系的是A、酵母细胞   B、昆虫细胞   C、哺乳类细胞   D、大肠杆菌39、在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用A、反转录酶   B、多聚核苷酸激酶C、末端转移酶     D、引物酶40、常用的外植体不包括下列：A、种子根，子叶 B、下胚轴 C、胚细胞 D、花细母细胞41、

42、酶变性时不表现为A、溶解度降低B、易受蛋白酶水解C、酶活性丧失D、紫外线(280nm)吸收增强42、10人工种子由三部分构成，不属于这三部分的是：A、人工种皮 B、人工胚乳 C、胚状体 D、胚轴43、基因工程常用于DNA分子体外切割的酶是（ ） A、限制酶 B、核酸酶 C、反转录酶 D、连接酶 44、基因工程的基本程序一般不包括( ) A、工具酶的改造 B、制备目的DNA C、目的DNA与载体的连接 D、导入寄主细胞 45、在重组DNA技术中，不常用到的酶是A、限制性核酸内切酶   B、DNA聚合酶C、DNA连接酶     

43、     D、DNA解链酶46、可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为A、限制性外切核酸酶     B、限制性内切核酸酶C、非限制性外切核酸酶   D、非限制性内切核酸酶47、_是微生物细胞生命活动的基础，是合成酶的主要原料之一。A、碳源 B、培养基 C、细胞膜 D、活化酶48、酱油曲霉蛋白合成酶合成的最适温度为_，而其生长的最佳温度为40。 A、30 B、20 C、0 D、2849、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是A、化学合成法 &#

44、160; B、基因组文库法C、CDNA文库法   D、聚合酶链反应50、植物基因工程最常用的质粒载体是（ ）A、F质粒 B、R质粒 C、Ti质粒 D、COLE51、关于pH对酶活性的影响，以下哪项不对A影响必需基团解离状态B也能影响底物的解离状态C酶在一定的pH范围内发挥最高活性D破坏酶蛋白的一级结构EpH改变能影响酶的Km值52、构建基因组DNA文库时，首先需分离细胞的A、染色体DNA   B、线粒体DNA   C、总mRNA   D、t RNA   E、r RNA53、天然蛋白质中不存在的氨

45、基酸是A、色氨酸 B、胱氨酸 C、羟脯氨酸 D、胱氨酸54、酶催化作用对能量的影响在于A、增加产物能量水平 B、降低活化能 C、降低反应物能量水平 D、降低反应的自由能 E、增加活化能 55、关于维生素C的生理作用，下列哪项是错误的A可作为供氢体或受氢体参与体内的氧化还原反应B保持谷胱甘肽为氧化型C具有解毒功能D参与某些物质的羟化反应E促进肠内铁的吸收56、金属离子在结合酶中的作用，错误的是A所有金属离子都可与酶紧密结合B金属离子可与酶、底物形成复合物C金属离子可稳定酶构象D金属离子可参与酶活性中心的组成E金属离子可能提高酶活性57、基因(gene)这个名词是_年由遗传学家约翰(W.Joham

46、sen)提出来的.A、1908 B、1909 C、1907 D、190658、现代对基因的定义是DNA分子中含有特定遗传信息的一段_序列总称，是遗传物质的最小功能单位。A、核酸 B、脱氧核糖核酸  C、核糖核酸 D、核苷酸 59、_的发现和应用为从细胞基因组中分离目的基因提供了重要工具.A、连接酶   B、限制性内切酶  C、末端修饰酶 D端粒酶60、_是细菌内独立于染色体并能自我复制的小环状DNA分子，是在细菌细胞分裂时能稳定传递给子代的遗传因子。 A、质粒 B、线粒体 C、核糖  D、叶绿体二、填空1、限制酶命名采用Smith和Athens提议的方案

47、，第一个字母大写取自来源细菌的 ；第二、三个字母取自来源细菌的 ；第四个字母（如果有）取自来源菌的 。2、现代生物技术中，一项可堪称与阿波罗登月计划相媲美的研究内容是 。3、根据采用的克隆载体性质不同，将重组 DNA 分子导人细菌的方法有 、 及感染。4、科学家感兴趣的外源基因又称 ，其来源有几种途径： ， ， ，以及通过构建 或 制备目的基因。 5、早期的PCR用 酶，其适温为 ；后来采用 的最适温度为 ，连续保持30min仍具有活性。6、pBR322具有两种遗传标记基因： 抗性基因，来源于 ； 抗性基因。7、分批培养微生物时，微生物明显地表现出四个时期，即 、 、 和 。8、生物酶工程主要

48、包括三方面内容： ， ， 。9、液体深层培养主要控制条件有： 、 、 。10、细胞工程按照研究的对象分为 、 、 ；植物组织培养包括培养基的配制、 、 和培养、移栽等环节。11、干细胞是一类具有 和 的细胞。12、人工种子由 、 、 构成。13、染色体工程是人们按照一定的设计，有计划地 、 或代换同种或异种染色体，从而达到定向改变遗传性和选育新品种的一种技术。14、 DNA片段重组连接的方法主要有 、 、 、 连接 。15、动物细胞融合途径主要有 、 、 。16、细胞工程是指以细胞为基本单位进行 或按照人们的意愿 的某些生物学特性，从而创造新的生物和物种，以获得具有经济价值的生物产品。17、限

49、制酶是一类专门切割 的酶，它能特异性识别切割 链（单、双）DNA。 18、II型限制酶既具有 的专一性，也具有 的专一性。它作用时需要 离子作辅助因子。19、现代生物技术具有的基本特征： 、 、 、 、 、 。20、酶的发酵生产方式有两种，一种是 ，另一种是 。21、液体深层培养过程中主要控制的条件有：    ；  ； 。22、植物细胞融合的方法主要有 、 、 。23、外植体是指植物组织培养中用来进行 的离体材料，如离体的器官、 、 和 等的培养。24、愈伤组织是指外植体产生的排列疏松而无规则且没有发生 的薄壁细胞。 25、按培养基的功能分类，培养基可分为脱分化培养基、 、壮苗培养基、 生根培养基。 26、分批培养微生物时，微生物明显地表现出四个时期，即 、 、 和 。27、按照设备来分，发酵又可分为 、 、 。28、最早的蛋白质设计方法是 ，其特点是尽量使设计的复杂性 ，一般仅用 。 设计的序列往往具有一定的 。29、设计的蛋白质序列从三方面来检