第五章药物制剂分析技术

1、第五章 药物制剂分析技术药物制剂分析技术学习目标1.掌握制剂含量概念；掌握片剂常规检查技术2.熟悉常用辅料干扰的排除方法；熟悉注射剂装量和装量差异检查法3.了解注射剂其他检查项目及含量计算方法4.学会片剂含量测定技术5.具有认真负责、严谨务实的工作态度，牢固树立药品质量第一的观念。第一节：概述第一节：概述药物制成制剂的目的一、一、1.为了防治和诊断疾病的需要；2.为了保证药物用法和用量的准确；3.为了增强药物的稳定性；4.为了药物使用、贮存和运输的方便；5. 为了延长药物的生物利用度；6. 为了降低药物的毒性和副作用。 制剂分析二、二、（一） 定义 利用物理、化学或生物测定方法对不同剂型的药物

2、进行检验分析，以确定其是否符合质量标准。 （二）二） 制剂分析的特点制剂分析的特点 （与原料药的区别）（与原料药的区别）1.性状的规定和描述不同 药品的性状是药品质量的重要表征之一。外观性状是对药品色泽和外表感官的规定。原料药性状项下主要描述药物的外观、色、臭、溶解度、稳定性以及物理常数等。 药物制剂对影响药物内在质量的外观性状也有规定。如中国药典2015年版制剂通则中规定：片剂外观应完整光洁，色泽均匀，有适宜的硬度和耐磨性，以免包装运输过程中发生磨损或破碎。制剂如有包衣或者外壳，还应规定内容物的外观性状。2.鉴别方法或有不同（1）先分离，再鉴别：如乙酰唑胺片的鉴别，先将供试品研细后，用氢氧化

3、钠溶液溶解并滤过，取滤液再按原料药鉴别方法鉴别。（2）选用与原料药不同的方法加以鉴别：如乙酰螺旋霉素的原料药采用薄层色谱法进行鉴别，而片剂增加了紫外分光光度法鉴别。杂质检查的项目不同 一般原料药项下的检查项目不需重复检查，只检查在制备和储运过程中产生的杂质及制剂相应的检查项目。 如：盐酸普鲁卡因注射液“对氨基苯甲酸”阿司匹林片“水杨酸” 3.检验项目和要求不同杂质限量的要求不同杂质限量的要求不同阿司匹林阿司匹林 “ “水杨酸水杨酸”0.1%0.1%阿司匹林片阿司匹林片 “ “水杨酸水杨酸”0.3%0.3%含量表示方法及合格范围不同 1 1、制剂含有附加剂，干扰样品测定、制剂含有附加剂，干扰样品

4、测定2 2、样品测定前往往需要一定的前处理、样品测定前往往需要一定的前处理3 3、应当结合原料药和辅料进行制剂分析、应当结合原料药和辅料进行制剂分析4 4、需要更专属和更灵敏的测定方法、需要更专属和更灵敏的测定方法5 5、制剂往往需要进行特殊检查、制剂往往需要进行特殊检查6 6、应考虑复方制剂中各组分间的干扰、应考虑复方制剂中各组分间的干扰7 7、往往需要进行阴性对照、往往需要进行阴性对照 4.含量测定方法或有不同（1）主药含量大，无其他成分，或其他成分对测定无干扰或干扰可以忽略不计，则一般采用与原料药相同的方法进行测定。如盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因注射液均用亚硝酸钠法进行含量测定。（2）其他

5、成分对主药的含量测定方法有干扰，则应先排除干扰，再采用与原料药相同方法进行测定。如乳酸钠注射液，即先将注射液的溶剂水用恒温干燥法除去后，再用与原料药相同的非水溶液滴定法测定。（3）考虑到附加成分的干扰和主药含量多少等问题，选用与原料药不同的方法进行测定。如盐酸吗啡原料药采用非水溶液滴定法测定含量。其片剂和注射剂采用紫外分光光度法测定含量，其缓释片的测定方法则选用高效液相色谱法。5.含量限度的的含义不同待测物质含量% = 100% 原料药的含量一般要达到99.5%以上，未规定上限，一般不超过101.0%。有时原料药也规定上限，如对乙酰氨基酚规定按干燥品记，含量应为98.0%-102.0%，其上限

6、是指用质量标准规定的分析方法测定时可能达到的数值，代表限度或允许偏差，并非真实含量。 供试品量实际测得量二、药物制剂的含量限度1.药物制剂含量限度的表示方法标示量%= 100%标示量是指单位药品中所含存物质的理论值（即药物制剂的规格值）标示量每片（支）实测含量2.药物制剂含量计算举例（1）异烟肼片：异烟肼片规格为50mg，表示每片中含异烟肼的理论值为50mg，即标示量为50mg。药典规定应为标示量的95.0%-105.0%。如果测定结果某批平均实际含量为49.5mg，含量占标示量的百分比为：标示量%=49.5/50=99.0%(2)盐酸普鲁卡因注射液：盐酸普鲁卡因注射液的规格为10ml：100

7、mg。药典规定应为标示量的95.0%-105.0%。如果测定结果是9.90mg/ml,标示量%=99.0%3.含量限度的范围 制剂由原料和辅料组成，杂质在允许范围内，同时由于生产制备测定过程相对复杂，客观存在一定偏差和变化。含量限度一般为标示量的95.0%-105.0%如对乙酰氨基酚片的标示量应为95.0%-105.0%维生素B1的标示量应为90.0%-110.0% 色泽色泽光洁度光洁度片形完整性片形完整性硬度硬度素片素片包衣片包衣片 光亮度光亮度 色泽均匀度色泽均匀度 包衣完整性包衣完整性 化学方法：各种以化学反应为基础化学方法：各种以化学反应为基础的容量的容量方法。方法。生物测定法：主要是

8、以抗原生物测定法：主要是以抗原- -抗体为抗体为反应原理的免疫分析法。反应原理的免疫分析法。酶联免疫吸附测定法酶联免疫吸附测定法(ELISA)(ELISA)物理方法物理方法光谱技术光谱技术 UV IR Flu NIR MS NMRUV IR Flu NIR MS NMR色谱技术色谱技术PC TLC GC HPLC HPCEPC TLC GC HPLC HPCE光谱和色谱联用技术光谱和色谱联用技术GC-MS HPLC-MS CE-MS LC-NMRGC-MS HPLC-MS CE-MS LC-NMR三、剂型检查0.3g/0.3g/片片 7.5%7.5%0.3g/0.3g/片片 5.0%5.0%（

9、1 1）规定）规定糖衣片、薄膜衣片应包衣前检查糖衣片、薄膜衣片应包衣前检查1、片重差异不能完全反映药物的含量均匀度2、主要是在生产过程中引起的3、不适用于对含量较小片剂的检查 取药品20片，精密称定总重量W总，计算平均重量W平，再分别称每片的重量，计算每片片重与平均片重差异的百分比，进而判断该片剂的重量差异是否合格。中国药典的相关规定： 超出重量差异的不得多余2片，并不得有一片超出重量差异的1倍。凡是检查含量均匀度的制剂不再凡是检查含量均匀度的制剂不再检查重量差异检查重量差异【几点说明【几点说明】1、小剂量：、小剂量：Chp2010 标示量标示量25mg，主药含量，主药含量 25（片剂）（片剂

10、）EP7 标示量标示量2mg，主药含量，主药含量15.0 不合格不合格A+1.80S 15.0, A+S15.0 复试复试 另取取供试品另取取供试品2020片片求算求算3030片的平均值片的平均值X X平平、标准差标准差S S和和差值差值A AA+1.45S15.0 合格合格A+1.45S 15.0 不合格不合格思考思考1 1、片剂含量均匀度计算中，片剂含量均匀度计算中，15.0以及系数（以及系数（1.80、1.45）是如何规定的？）是如何规定的？2、取样、取样10片片和和20片片的取样量是如何规定的？的取样量是如何规定的？3、片剂的含量均匀度如何检查？如何判断、片剂的含量均匀度如何检查？如何

11、判断？ 利用该药品再弱碱性环境中发生一级利用该药品再弱碱性环境中发生一级电离，在电离，在240 nm240 nm处有最大吸收，利用处有最大吸收，利用UVUV测定其含量测定其含量NHNHOOOExample:98.6 95.4 102.3 99.4 97.2 94.2 93.4 95.1 94.7 101.316.97X067. 392)(XXiS84. 2100XAA+1.80S=2.84+1.803.067=8.36USP, Ph. Eup取供试品取供试品1010片片测定每片的真实含量测定每片的真实含量X X和和X X平平85X平平 X 115%X平平 合格合格如有一片超出如有一片超出X平平

12、的的75125 不合格不合格如有一片超出如有一片超出X平平85115，但未超过，但未超过X平平的的75125 复试复试复复 试试另取取供试品另取取供试品2020片片测定每片的真实含量测定每片的真实含量X X和和X X平平如有一片超出如有一片超出X平平的的75125 不合格不合格如有一片超出如有一片超出X平平的的85115，但未超，但未超过平均含量的过平均含量的75125 合格合格药典附录药典附录用崩解仪测定用崩解仪测定定义定义 固体制剂在规定的介质中崩固体制剂在规定的介质中崩 解溶散并通过筛网（解溶散并通过筛网（2 mm） 所需时间的限度所需时间的限度3、崩解时限、崩解时限测定方法：测定方法：

13、 取片剂取片剂6 6片，分别放于吊蓝的玻璃管中，开片，分别放于吊蓝的玻璃管中，开动崩解仪，每片均应在动崩解仪，每片均应在15 min15 min内全部崩解。内全部崩解。 糖衣片在水溶液中糖衣片在水溶液中60 min60 min内崩解。内崩解。 肠溶衣片先在盐酸溶液（肠溶衣片先在盐酸溶液（9100091000）中）中2 h2 h不不得有裂缝，再在磷酸盐缓冲液（得有裂缝，再在磷酸盐缓冲液（pH 6.8)pH 6.8)中中1 h1 h应全部崩解。应全部崩解。泡腾片，泡腾片，取取1片放于装有片放于装有200 ml 15 25水的水的 250 ml烧杯中，应有气泡烧杯中，应有气泡放出，当气泡停止时，片剂

14、崩解、融放出，当气泡停止时，片剂崩解、融解或分散。应当按同法检查解或分散。应当按同法检查6片，均片，均应在应在5 min内崩解。内崩解。片剂片剂 崩解时限崩解时限 普通片剂普通片剂肠溶衣片肠溶衣片糖衣片糖衣片泡腾片泡腾片15 min60 min60 min5 min溶出度：是指药物从片剂等固体制剂在规定溶出度：是指药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度，难溶性药物均应溶剂中溶出的速度和程度，难溶性药物均应作此项检查。作此项检查。凡是检查溶出度的制剂不再进凡是检查溶出度的制剂不再进行崩解时限的检查。行崩解时限的检查。转篮法转篮法样品置于溶出度仪的转篮中样品置于溶出度仪的转篮中桨桨 法法

15、样品放于容器中用搅拌桨搅拌样品放于容器中用搅拌桨搅拌小杯法小杯法样品放入样品放入250ml250ml烧杯中用搅拌桨搅拌烧杯中用搅拌桨搅拌4、溶出度、溶出度转篮法转篮法 取六份样品置于溶出度仪的转篮中，将转取六份样品置于溶出度仪的转篮中，将转篮降至篮降至1000 ml烧杯中，注入经脱气处理的溶烧杯中，注入经脱气处理的溶剂剂900 ml，控制温度为，控制温度为370.5，按规定转，按规定转速旋转到速旋转到45 min时，在规定取样点取样，立即时，在规定取样点取样，立即经经0.8m（0.45m）的微孔滤膜过滤，测定）的微孔滤膜过滤，测定每片的溶出度。每片的溶出度。桨桨 法法 基本装置同转篮法，使用搅

16、拌桨搅拌，测定基本装置同转篮法，使用搅拌桨搅拌，测定时将供试品分别放入时将供试品分别放入1000 ml1000 ml烧杯中，启动搅拌烧杯中，启动搅拌桨，桨，45 min45 min时取样测定，立即经时取样测定，立即经0.8m0.8m 的微的微孔滤膜过滤，测定每片的溶出度。孔滤膜过滤，测定每片的溶出度。小杯法小杯法 基本装置同转篮法，使用搅拌桨搅拌，测定时基本装置同转篮法，使用搅拌桨搅拌，测定时将供试品分别放入将供试品分别放入250 ml250 ml园底烧杯中，加入经脱园底烧杯中，加入经脱气处理的溶剂启动搅拌桨，气处理的溶剂启动搅拌桨，45 min45 min时取样测定，时取样测定，立即经立即经

17、0.8m0.8m 的微孔滤膜过滤，测定每片的溶的微孔滤膜过滤，测定每片的溶出度。出度。结果判断结果判断测定每片的溶出量测定每片的溶出量X X及及X X平平设定溶出限度值设定溶出限度值Q = 70%标示量标示量如果有如果有1片片 Q，但，但Q-10%，并且，并且X平平Q 合格合格如果有如果有1片片 Q-10%，需复试需复试复试：复试： 另取另取6片进行溶出度测定，如果片进行溶出度测定，如果12片中仅片中仅有有12片片50 ml 最低装量检查法检查最低装量检查法检查具体检查方法具体检查方法 用相应体积的干燥注射器抽取溶液，用相应体积的干燥注射器抽取溶液，注入经标化的量具内，在室温下检视；注入经标化

18、的量具内，在室温下检视；油溶液或混悬液应先加热摇匀后用注油溶液或混悬液应先加热摇匀后用注射器抽取置于容器中放冷至室温后再射器抽取置于容器中放冷至室温后再进行检视。进行检视。2 2、渗透压摩尔浓度、渗透压摩尔浓度渗透溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度扩散渗透溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度扩散的现象。的现象。渗透压阻止渗透所施加的压力渗透压阻止渗透所施加的压力测定法测量溶液的冰点下降测定法测量溶液的冰点下降凡处方中添加了渗透压调节剂的制剂均应控制凡处方中添加了渗透压调节剂的制剂均应控制渗透压渗透压静脉输液及椎管注射用注射液静脉输液及椎管注射用注射液3 3、可见异物、可见异物检查注射液中是否含有不溶性异

19、物检查注射液中是否含有不溶性异物 主要检查：主要检查：50 m50 m的微粒的微粒 更小的微粒：更小的微粒：不溶性微粒的检查不溶性微粒的检查 灯检法和光散射法灯检法和光散射法实验设备：装有日光灯的伞棚式实验设备：装有日光灯的伞棚式装置，背景用黑色布装置，背景用黑色布自自 检检抽抽 检检灯检法灯检法无色透明容器包装的无色注射溶液用无色透明容器包装的无色注射溶液用1000lx2000lx的光照射的光照射透明塑料容器或棕色透明容器包装的注射剂照透明塑料容器或棕色透明容器包装的注射剂照度为度为2000lx3000lx混悬型注射液或乳状液照度应为混悬型注射液或乳状液照度应为4000lxType No.

20、Sample No. per Detection time12 ml5 ml10 ml20 mlOver 50 ml200200200200206433118 s16 s15 s21 s15 s 具体的操作方法具体的操作方法 取规定的支数置于伞棚的边缘，用手拿安取规定的支数置于伞棚的边缘，用手拿安踣的颈部，使药液转动，用目视检测，样品和踣的颈部，使药液转动，用目视检测，样品和眼睛的距离为眼睛的距离为2050 cm2050 cm。检查不得发现有肉眼。检查不得发现有肉眼可见的白块和纤维等异物；不合格率可见的白块和纤维等异物；不合格率55。如。如超过规定，则应当加倍抽检样品。超过规定，则应当加倍抽检

21、样品。 样品贮存期的不合格率样品贮存期的不合格率77油性针剂：油性针剂：先在先在10m10m和和25m25m的微粒数。的微粒数。不同规格制剂的检查方法有所不同不同规格制剂的检查方法有所不同结果判断结果判断1 1、标示量、标示量100 ml100 ml的静脉注射液的静脉注射液每每mlml中中10m10m不得超过不得超过1212粒，含有粒，含有25m25m不得超过不得超过2 2粒。粒。2 2、标示量、标示量100 ml100 ml的静脉注射液、无菌粉末等的静脉注射液、无菌粉末等每个供试容器中每个供试容器中10m10m不得超过不得超过30003000粒，含有粒，含有25m25m不得超过不得超过300

22、300粒。粒。 保证注射剂等无菌产品无菌保证注射剂等无菌产品无菌注意事项注意事项100100级洁净度空间进行，单向流空气区域级洁净度空间进行，单向流空气区域需用相应的溶剂或稀释液作阴性对照需用相应的溶剂或稀释液作阴性对照五、无菌五、无菌直接接种法直接接种法适用于非抗菌作用的药品适用于非抗菌作用的药品间接接种法间接接种法适用于具有抗菌作用的药品适用于具有抗菌作用的药品薄膜过滤法薄膜过滤法当供试品对检查有干扰时当供试品对检查有干扰时检查方法检查方法直接接种法：直接接种法：按照按照Chp规定取样后，规定取样后，分别接种于需氧菌、厌氧菌培养基分别接种于需氧菌、厌氧菌培养基6管（管（3035），其中），

23、其中1管接种金黄色管接种金黄色葡萄糖球菌葡萄糖球菌1ml作为阳性对照，另接作为阳性对照，另接种种5管于真菌培养基（管于真菌培养基（2025），共），共培养培养14天。天。判断结果：判断结果：（1 1）阳性对照应在阳性对照应在484872h72h内有菌生长；内有菌生长；（2 2）需氧菌、厌氧菌和真菌培养管应当澄）需氧菌、厌氧菌和真菌培养管应当澄 清并没有细菌生长；清并没有细菌生长；（3 3）如有）如有1 1管浑浊并正是有细菌生长，应管浑浊并正是有细菌生长，应取取2 2倍供试品重新试验。倍供试品重新试验。薄膜过滤法：薄膜过滤法：取规定的供试品，加入取规定的供试品，加入0.9的无菌的无菌NaCl溶液

24、或其他适宜溶剂溶液或其他适宜溶剂100 ml，混匀后通过装有孔径不大于混匀后通过装有孔径不大于0.45m的薄膜的薄膜过滤器，再用过滤器，再用0.9的无菌的无菌NaCl溶液冲洗至溶液冲洗至对阳性菌群正常生长，将需氧菌、厌氧菌对阳性菌群正常生长，将需氧菌、厌氧菌培养基，真菌培养基以及阳性对照分别加培养基，真菌培养基以及阳性对照分别加到薄膜过滤器内。按照规定的温度下培养到薄膜过滤器内。按照规定的温度下培养35天。天。判断结果：判断结果：（1 1）阳性对照应在阳性对照应在2448h内有菌生长；内有菌生长；（2）需氧菌、厌氧菌和真菌培养管应当澄）需氧菌、厌氧菌和真菌培养管应当澄 清并没有细菌生长；清并没

25、有细菌生长； （3）如有）如有1管浑浊并正是有细菌生长，应管浑浊并正是有细菌生长，应取取2倍供试品重新试验。倍供试品重新试验。六、热源或细菌内毒素检查六、热源或细菌内毒素检查 热源热源是指药品中含有的能引起体温升是指药品中含有的能引起体温升高的杂质。高的杂质。细菌内毒素细菌内毒素是由脂多糖组成的细菌细胞是由脂多糖组成的细菌细胞壁组分，是热源的主要来源。壁组分，是热源的主要来源。热源热源家兔法家兔法细菌内毒素细菌内毒素鲎试剂法鲎试剂法检查方法检查方法家兔法：家兔法： 取家兔取家兔3 3只，测定其正常体温后只，测定其正常体温后15 min15 min内，自耳缘静脉缓缓注入规定剂量并温热内，自耳缘静

26、脉缓缓注入规定剂量并温热至至3838的供试品，然后每隔的供试品，然后每隔30 min30 min测量体测量体温一次，共测温一次，共测6 6次，以次，以6 6次中最高的一次体次中最高的一次体温（温（T Tmaxmax）减去正常体温（）减去正常体温（T Tnornor），即为家），即为家兔升高的体温（兔升高的体温（T T升升）。）。判断标准判断标准 如果有一只家兔如果有一只家兔T升升0.6如果如果3只家兔只家兔T升升0.6，但，但T升升总和总和1.3如果如果3只家兔只家兔T升升0.6，但，但T升升总和总和1.3复试中复试中T升升0.6的家兔仅有一只的家兔仅有一只并且并且8只家兔只家兔T升升总和总和

27、3.5合合格格复试复试鲎试剂法鲎试剂法凝胶法：凝胶限度和凝胶半凝胶法：凝胶限度和凝胶半定量定量光度测定法：浊度法和显色光度测定法：浊度法和显色基质法基质法鲎试剂法鲎试剂法 检查方法检查方法：取装有：取装有0.1 ml0.1 ml鲎试剂溶液的鲎试剂溶液的101075 75 mmmm的试管的试管8 8支，其中支，其中2 2支加入支加入0.1 ml0.1 ml按最大有效稀释按最大有效稀释倍数稀释的倍数稀释的供试品溶液供试品溶液，2 2支加入支加入0.1 ml0.1 ml内毒素溶内毒素溶液液作为阳性对照管，作为阳性对照管，2 2支加入支加入0.1 ml0.1 ml细菌内毒素检细菌内毒素检查用水查用水作为阴性对照管，作为阴性对照管，2 2支加入支加入供试品阳性对照供试品阳性对照溶液溶液作为阳性对照管，混匀后，封闭管口，垂直放作为阳性对照管，混匀后，封闭管口，垂直放于于373711的恒温箱中，保温的恒温箱中，保温60602 min2 min后，将试管后，将试管取出，缓缓倒转取出，缓缓倒转180180度，判断结果。度，判断结果。结果判断结果判断倒转倒转180180度，度，若管内凝胶不变形，不从管壁脱落为阳性若管内凝胶不变形，不从管壁脱落为阳性（）（）倒转倒转180180度，度，若管内凝胶变形，并从管壁脱落为阴性（）若管内凝胶变形，并从管壁脱落为阴性（）供试品供试品2 2管均为（）则认为合格