植物体叶绿素含量的测定实验报告

1、实验报告植物体叶绿素含量的测定摘要：本实验采用分光光度法，利用95%乙醇提取菠菜叶片中和番茄叶片中叶绿 体色素，叶绿素a，叶绿素b和类胡萝卜素最大吸收峰的波长分别是 665nm、649nm和470nm。根据分光光度计测定的吸光度值，从而计算出 乙醇提取液中叶绿体色素含量。实验原理：利用95%乙醇提取叶绿体色素，叶绿素a，叶绿素b和类胡萝卜素最 大吸收峰的波长分别是665nm、649nm和470nm。根据分光光度计测定的吸光度值，可以计算出乙醇提取液中叶绿体色 素含量。实验目的：掌握分光光度计法对叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总浓度和类胡萝卜 素总浓度测定和计算的方法。实验材料：生物材料：菠菜叶片0

2、.25g，自己培养的全素番茄苗叶片0.2g，缺磷 番茄苗叶片0.2g；试剂：95%乙醇、石英砂、碳酸钙；仪器：分光光度计、电子天平、研钵、漏斗、玻璃棒、小烧杯、10ml 量筒、50ml容量瓶、剪刀、滤纸、滴管。实验步骤：叶绿体色素的提取取新鲜菠菜叶片0.25g，擦干，去中脉，剪碎放入研钵，加入少许 石英砂和CaCO3，再加入95%乙醇3ml，研磨成匀浆，再加95%乙醇 10ml，静置10min，用漏斗滤去残渣，用乙醇反复冲洗研钵、残渣 至无色；用容量瓶定容至50ml。吸光度的测定取光径1cm比色杯，注入上述叶绿素提取液，以95%乙醇注入另 一同样的比色杯内作为空白对照，在波长665、649、和

3、470nm下 测定吸光度。结果计算依据下列计算公式，分别计算出叶绿素a、B的浓度及其叶绿素总 浓度和类胡萝卜素的浓度。C （叶绿素 a） =13.95 - 6.8A 49C：（叶绿素 b） =24.96A：65 - 7.32A：%Cb （叶绿素）=C +C =18.616A + 6.63aTa b ,649665C （类胡萝卜素）=（1000A - 2.05C-114.8C ）/248x.c470ab叶绿体色素含量=色素浓度（mg/ L）x提取液体积（L）x稀释倍数 样品鲜重（g）实验结果：菠菜叶片提取液吸光值:波长/组别123平均665nm0.7060.7040.6990.703649nm0

4、.2960.2910.2880.292470nm0.8350.8310.8250.830全素培养番茄叶片提取液吸光值:波长/组别123平均665nm0.3020.3060.3000.303649nm0.1320.1320.1310.132470nm0.3590.3580.3520.356缺磷培养番茄叶片提取液吸光值:波长/组别123平均665nm0.2610.2650.2630.263649nm0.1360.1360.1380.137470nm0.3260.3310.3310.329根据以上数据及计算公式可得:材料（g）/ 浓度（mg/L）叶绿素a叶绿素b叶绿素总浓度类胡萝卜素总 浓度菠菜7.822.149.962.29全素番茄3.331.084.410.91缺磷番茄2.741.504.240.609材料（g）/ 色 素含量（mg）叶绿素a叶绿素b叶绿素总含量类胡萝卜素总 含量菠菜1.5640.4281.9920.458全素番茄0.830.270.110.23缺磷番茄0.5480.30.8480.122实验讨论：1、测定叶绿素ab为什么选用红光