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文档简介
1、课题2 月季的花药培养 1964年,印度科学家在培养毛叶曼陀罗的花药时,首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的单倍体植株。这个实验说明生殖细胞和体细胞一样,在离体条件下也具有发育成完整植株的潜能。1.识记被子植物花粉发育的过程;2.通过学习花药培养的基本技术,培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力。 (一)被子植物的花粉发育 被子植物的花的结构是怎样的? 观察下图,和减数分裂比较,你能指出对应的时期吗?又有何特点?1.雄蕊由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞.花药:囊状结构,内有很多花粉花丝2.花粉:3.花粉发育阶段:小孢子四分体时期;单核期;双核期小孢子母细胞(2n)( )时
2、期(n)单核( )期(n)双核期(n)( )细胞核(n)( )细胞核(n)( )细胞(n)( )细胞(n)( )个精子(n)( )分裂( )分裂单核( )期(n)( )分裂减数小孢子四分体居中靠边有丝生殖生殖花粉管营养有丝24.花粉的发育过程移栽花药中的花粉胚状体脱分化 愈伤组织 花药中的花粉脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导生根(二)产生花粉植株的两种途径体细胞胚:在组织培养过程中,某些细胞在形态上转变为与合子发育成胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似。原因:培养基中的激素种类及浓度配比 愈伤组织转接种到再生培养基 愈伤组织分化形成再生植株 愈伤组织发育途径部分花药产生愈伤组织 接种
3、在平板上的水稻花药 烟草花药培养 胚状体发育途径(三)影响花药培养的因素花期早期;单核居中期与靠边期之间培养基的组成材料的选择亲本生长条件、材料低温处理、接种密度等适宜的培养条件等(一)材料的选取 选择花药时,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法有醋酸洋红法。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。(二)材料的消毒1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟(也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液)5、无菌水冲洗35
4、次要彻底去除花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成立即将花药接种于培养基上,通常每瓶接种花药7-10个。1、剥取花药勿损伤花药,以免诱导出非花粉愈伤组织2、接种(三)接种和培养培养条件:温度25左右,不需要光照。3、培养培养:花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。 在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化4、鉴定和筛选植物组织培养技术与花药培养技术的异同点项目相同点不同点植物组织培养技术离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。外植体为体细胞,染色体数无需加倍。花药培养技术取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小
5、,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。基础知识实验操作被子植物的花粉发育花粉其他因素影响因素花粉发育经历的时期月季的花药培养 材料与培养基材料的选取产生途径消毒接种和培养 练习1. 答:F2紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法,将F2中的紫色甜玉米与白色甜玉米(aasusu)进行测交,可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐,耗时也较长,需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药培养的技术,在F1产生的花粉中就可能有Asu的组合,再将花粉植株进行染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体(AAsusu)。这种方法可以大大缩短育种周期。 练习2. 答:植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是:培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。 两者的不同之处在于:花药培养的选材非常重要,需事先摸索时期适宜的花蕾;花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及
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