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文档简介

实验二、普通生物显微镜的使用（二）

显微测微及细胞计数一、实验目的：继续掌握显微镜的基本使用方法学习血液涂片的制做方法学习用测微尺进行显微测量的方法学习人体微量采血及血细胞的计数方法二、实验原理：

（一）显微测微：细胞长度、面积、体积的测量是研究正常和病理组织细胞的基本方法之一。在显微镜下观察细胞大小的工具为显微测量计，由镜台测微尺和目镜测微尺组成。应用显微镜的成像原理，同时借助两尺配合使用，使用镜台测微尺标定目镜测微尺每一小格的实际长度，再用目镜测微尺测定样本的实际长度，通过测量和运算，可以得出细胞的大小.目镜测微尺每一小格的大小：

载物台测微尺之格数10μm×目镜测微尺之格数三、材料和仪器：仪器：普通光学显微镜及显微用品、测微尺、细胞计数板材料与器材：碘液、瑞-吉氏染液、洋葱滴管、镊子、标本盒（内有各种装片）四、实验步骤：（一）显微镜测微技术放置目镜测微尺：（已做好）。将镜台测微尺置于载物台上，低倍镜下调焦至看清镜台测微尺的刻度。标定目镜测微尺在低倍、高倍镜下每小格的长度。测量生物标本大小：用毕处理：用擦镜纸擦净镜台测微尺。（三）洋葱鳞茎表皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液备用。剥取洋葱鳞茎叶：用刀在洋葱内表面表面画一个3-4mm2的方框，用镊子将框内表皮撕下，在碘液中铺平。用镊子取一盖玻片，将一边缘接触碘液，然后缓缓盖在液滴上，防止产生气泡。轻压盖片，用吸水纸吸去挤出的碘液。显微镜观察并测量洋葱细胞的大小。1、吸取之前彻底混匀样本

2、取血盖片放在计数板上，如图A和B所示

盖玻片必须大约盖住一个点样区的3/4，如图B所示3、（确保盖玻片上的CELL-VU®字样面向观察者，因为网格是蚀刻在它的背面）吸取1滴（约4μl）血样品

4、将样品注入点样区，使其通过毛细作用填满点样区，如图C所示

5、将盖玻片移至最终的位置，使盖玻片上的圆圈位于点样区圆圈的中心（图D和E）

六、讨论：在实际操作过程中，影响测微尺使用精确性因素有哪些，应如何提高测量的精确性？在实际操作过程中，有哪些因素影响白细胞记数的准确性，应如何准确记数？实验后的感受、体会、意见与建议，对改进本实验有何设想？将实验结果填入下列表格：

目镜测微目尺校正结果（μm）物镜

目尺格数

台尺格数

目尺校正值10×40×100×洋葱细胞大小测定记录

（格）

1

2

3

4

5

6

7

8

平均值长宽结果计算

长μm＝平均格数×校正值宽μm＝

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